嘧霉胺对黄瓜灰霉病的室内毒力测定和田间防效研究

刘鸣韬+田雪亮

摘要：采用菌丝生长速率法测定了40%嘧霉胺悬浮剂对河南地区黄瓜灰霉病菌的室内毒力，并评价其对黄瓜灰霉病的田间防效。结果表明， 40%嘧霉胺悬浮剂对黄瓜灰霉病菌的EC50为0.58 μg/mL；当田间喷药量分别为4.17、6.25 g/hm2时，对黄瓜灰霉病的防治效果均可达到78%以上。

关键词：嘧霉胺；黄瓜灰霉病；毒力；防效

中图分类号：S432.4+4 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）20-5022-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.20.024

Toxicity and Efficiency of Pyrimethanil against Grey

Mould of Cucumber in Henan Province

LIU Ming-tao， TIAN Xue-liang

（Henan Institute of Science and Technology， Xinxiang 453003，Henan， China）

Abstract： The toxicity of pyrimethanil 40% SC against Botrytis cinerea were measured according to inhibition of mycelia growth velocity. Meanwhile， the efficacy of the fungicide against grey mould of cucumber was tested in the field. The result showed that the EC50 of pyrimethanil was 0.58 μg/mL. The control efficacy of pyrimethanil was all above 78% at concentration of 4.17、6.25 g/hm2.

Key words： pyrimethanil； grey mould of cucumber； toxicity； efficiency

蔬菜灰霉病由灰葡萄孢（Botrytis cinerea）引起，主要为害黄瓜、番茄、辣椒、豇豆和茄子等蔬菜作物。随着中国设施蔬菜的迅猛发展，在20世纪70年代后期灰霉病危害日趋严重，目前已经成为中国设施蔬菜生产上的主要病害。黄瓜是中国设施蔬菜的主要作物之一，而黄瓜灰霉病在设施黄瓜生产上普遍发生，可造成黄瓜减产20%～30%，甚至高达50%左右。

嘧啶胺类化合物是一类具有良好生物活性的杂环化合物，因其在生物体内有很重要的生理作用而被广泛应用于合成医药及农药[1]。嘧霉胺[N-（4，6-二甲基嘧啶-2-基）苯胺]是嘧啶胺类化合物的代表性品种，可抑制植物病原真菌蛋白酶的分泌，降低某些水解酶的含量，从而降低植物病原真菌对植物的侵染率[2]。嘧霉胺与现有的杀菌剂无交互抗性，对敏感性、抗性植物病原真菌有特效，主要用于防治苹果黑星病、斑点落叶病、桃灰星病等病害[3]。为了明确嘧霉胺对河南地区黄瓜灰霉病的药效和对黄瓜的安全性，本研究采用40%嘧霉胺悬浮剂对黄瓜灰霉病进行了室内毒力测定和田间防效试验，以期为防治黄瓜灰霉病奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验药剂和菌种

供试药剂为40%嘧霉胺悬浮剂（河南省银田精细化工有限公司），对照药剂为50%多菌灵WP（江苏宝灵化工有限公司）。灰霉菌采集于河南新乡周边大棚黄瓜，分离纯化后保存于河南科技学院植物病理实验室。

1.2 室内毒力测定

采用菌丝生长速率法测定嘧霉胺对灰霉菌的毒力[4]。在无菌条件下，用直径为0.5 cm的打孔器在培养2 d的黄瓜灰霉病菌落边缘打取菌饼，将菌饼接种到含有嘧霉胺有效成分为0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、50.0、100.0 μg/mL的PDA培养基上，无菌水作对照（CK1），多菌灵作为药剂对照（CK2），每个处理重复4次。25 ℃培养，待对照中菌落长满平皿时，采用十字交叉法测量对照和处理的菌落直径，求得菌落直径平均值。按下列公式计算菌丝生长抑制率。

菌丝生长抑制率=[（对照菌落直径-处理菌落直径）/（对照菌落直径-接种菌饼直径）]×100%

采用SPSS数据处理系统，计算嘧霉胺和多菌灵对灰霉菌丝生长抑制的毒力回归方程和EC50。

1.3 田间防效试验

试验在河南科技学院试验田进行，地块土壤肥沃，排灌条件较好，土质为两合土。黄瓜品种为新世纪，播前催芽，8月10日直播。常规管理。

供试药剂40%嘧霉胺悬浮剂设2.50、4.17、6.25 g/hm2 3个施药量，对照药剂多菌灵10.0 g/hm2进行常量喷雾。试验设5个处理，每个处理4次重复，共20个小区，每个小区面积为15 m2，随机排列。于发病初期第1次用药。喷药时只有零星病叶，药前摘除。以后每隔7 d用药1次，连续施药3次。药后连续观察药剂对黄瓜生长的影响，第3次用药后10 d进行病情调查，每小区采取5点取样，每点随机取3株，每株在上、中、下部各取3片叶，以叶为单位记载病情严重度级别。病情分级标准如下。

0级，无病斑；1级，单片叶有病斑3个以下；3级，单叶片有病斑4～6个；5级，单片叶有病斑7～10个；7级，单片叶有病斑11～20个，部分密集成片；9级，单片叶病斑密集，占叶面积1/4以上。

计算公式如下：

病情指数=■×100%

防治效果=■×62.5%

2 结果与分析

2.1 40%嘧霉胺悬浮剂对灰霉菌的室内毒力endprint

室内毒力测定结果（表1）表明，40%嘧霉胺悬浮剂对灰霉菌具有较高的抑制活性，菌丝生长抑制的EC50为0.58 μg/mL。对照处理菌落的菌丝疏松，生长较快，而药剂处理的菌丝生长较慢，菌丝较细密。多菌灵WP的EC50为2.26 μg/mL，高于40%嘧霉胺悬浮剂。结果表明，40%嘧霉胺悬浮剂比多菌灵WP对灰霉菌生长的抑制效果好。

2.2 40%嘧霉胺悬浮剂对黄瓜灰霉病的田间防效

40%嘧霉胺悬浮剂对黄瓜灰霉病的田间防效见表2，从表2中可以看出，各施药处理对黄瓜灰霉病均有控制作用。从防治效果看，40%嘧霉胺悬浮剂6.25 g/hm2的效果最好，平均防效为82.44%；对照药剂多菌灵WP（CK2）与40%嘧霉胺悬浮剂4.17 g/hm2，平均防效分别为79.39%和78.90%，差异不显著，但均极显著高于40%嘧霉胺悬浮剂2.50 g/hm2。40%嘧霉胺悬浮剂2.50 g/hm2处理的平均防效仅为68.03%，效果最差，与其他各施药处理相比差异均达极显著水平。

2.3 40%嘧霉胺悬浮剂对黄瓜生长的影响

施药后5～7 d，40%嘧霉胺悬浮剂2.50 g/hm2和4.17 g/hm2处理，均未对黄瓜造成影响，而6.25 g/hm2处理，黄瓜叶片边缘出现轻微失水状，但对植株生长无影响。田间试验结果表明，40%嘧霉胺悬浮剂安全施药量可以达到6.25 g/hm2。

3 小结与讨论

当前防治黄瓜灰霉病的杀菌剂类型较多，如多菌灵和甲基硫菌灵属于苯并咪唑类；腐霉利、异菌脲和速克灵属于二甲酰亚胺类；乙霉威属于N-苯氨基甲酸酯类。灰霉菌遗传变异快、产孢量大和生态适应强的特点使得灰霉菌对杀菌剂产生抗药性及交互抗性的速度快于其他真菌[5]。灰霉菌对苯并咪唑类、二甲酰亚胺类、苯氨基甲酸酯类、苯胺基嘧啶类杀菌剂已产生一定程度的抗药性[6，7]。因此在黄瓜灰霉病防治中应科学合理地轮换使用杀菌剂，避免长期使用同类药剂，才能延缓抗药性的产生。

嘧霉胺的蒸气压为2.2×10-3Pa（25 ℃），易挥发，持久性较差[8]。因此在使用时要缩短2次用药的间隔时间。嘧霉胺既有保护和治疗作用，又兼有内吸和熏蒸作用，作用方式全面。在培养条件下，嘧霉胺能够抑制灰霉菌丝生长和分化，菌落较小。嘧霉胺作用机理是抑制真菌的芽管伸长和菌丝生长[9]。因此在毒力测定时，对灰霉菌的菌落抑制效果较好，嘧霉胺浓度越高抑制活性越强。40%嘧霉胺悬浮剂EC50为0.58 μg /mL，多菌灵WP的EC50为2.26 μg/mL，表明40%嘧霉胺悬浮剂对灰霉菌的毒力强于多菌灵WP。

田间防效表明，40%嘧霉胺悬浮剂6.25 g/hm2平均防效为82.44%，高于多菌灵WP （CK2）10 g/hm2和40% 嘧霉胺悬浮剂4.17 g/hm2的防治效果。40%嘧霉胺悬浮剂2.50 g/hm2处理的平均防效为68.03%，显著低于其他处理，因此建议不使用该剂量。

黄启良等[10]测定了嘧霉胺对山东和河北地区黄瓜灰霉病的防效，并未发现药害反应。本研究40%嘧霉胺悬浮剂6.25 g/hm2用量对黄瓜叶片有轻微药害反应，但对黄瓜生长无影响。建议在生产中应用时，严格控制40%嘧霉胺悬浮剂浓度和剂量。

综合来看，40%嘧霉胺对黄瓜灰霉病具有较好的防治效果，在河南地区防治黄瓜灰霉病的推荐用量为4.17～6.25 g/hm2。

参考文献：

[1] 李 斌，林柄栋，刘长令，等.2-取代氨基-4，6-二氯嘧啶类化合物的合成及其杀菌活性[J].合成化学，1996，4（2）：176-179.

[2] 刘长令.新型嘧啶胺类杀菌剂的研究进展[J].农药，1995，34（8）：25-28.

[3] 张培志，吴 军，龚钰秋.嘧啶类铜（Ⅱ），锌（Ⅱ）配合物的合成和生物活性[J].应用化学，2000，17（5）：558-560.

[4] 赵卫松，韩秀英，齐永志，等.辣椒疫霉对双炔酰菌胺的敏感性测定及其抗药突变体生物学性状研究[J].农药学学报，2011，13（1）：21-27.

[5] 宋 晰，肖 露，林 东，等.番茄灰霉病菌对腐霉利的抗药性检测及生物学性状研究[J].农药学学报，2013，15（4）：398-404.

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[7] 刘圣明，张艳慧，高续恒，等.洛阳市番茄灰霉病菌对嘧霉胺的抗药性检测[J].中国农学通报，2014，30（22）：300-303.

[8] GREEN S A，WILLIAMS R J，STOCK D. Influence of formulants and salt formation on volatilisation and activity of pyrimethanil[J]. Pesticide Science，1998，54（3）：313-314.

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[10] 黄启良，李凤敏，王 敏.40%嘧霉胺悬浮剂防治黄瓜灰霉病药效试验[J].植物保护，2000，26（2）：44-45.endprint