HPLC-ELSD法测定感愈胶囊中盐酸金刚烷胺及对乙酰氨基酚的含量

盐城市药品检验所（224002）王蕾 仇其原

感愈胶囊是由板蓝根、金银花、人工牛黄、对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺等制备而成的中西结合的复方制剂。主要用于风热感冒所致的发热，有汗，鼻塞，咽喉痛，咳嗽，是一种常用的清热解毒，疏风解表药。现行质量标准用HPLC法测定对乙酰氨基酚的含量，用非水滴定法测定盐酸金刚烷胺的含量[1]，笔者参考文献[2][3]，建立了HPLC-ELSD法同时测定感愈胶囊中盐酸金刚烷胺及对乙酰氨基酚的含量，该法简便、灵敏、准确、重复性好。

1 仪器与试药

1.1 仪器 高效液相色谱系统：Agilent 1200 Series 高效液相色谱仪（G1311A四元泵高效液相色谱仪，G1316A柱温箱）（美国Agilent公司），Varian 380- LC ELSD检测器；XS205DU电子天平（梅特勒有限公司）；KQ-300V型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2 试药 盐酸金刚烷胺对照品（批号：100426-200301，中国药品生物制品检定所）对乙酰氨基酚对照品（批号：100018-200408，中国药品生物制品检定所）；感愈胶囊（通药制药集团股份有限公司，批号为130503、130621、131015）；甲醇为色谱纯；乙腈为色谱纯；水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：CAPCELL PAK MGⅡC18(4.6mm×150mm，5μm)；流动相为乙腈-0.06%三氟乙酸溶液（20∶80），流速0.6mL·min-1，柱温30℃，进样量10μL，ELSD检测器漂移温度为100℃，雾化气体为空气，气流速度为2.0L·min-1。

附表1 盐酸金刚烷胺和对乙酰氨基酚加样回收试验结果

附表2 供试品含量测定结果

附图 感愈胶囊色谱图

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取盐酸金刚烷胺对照品105.92mg与对乙酰氨基酚对照品248.70mg，置于50mL量瓶中，加甲醇适量溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品贮备液。精密量取贮备液4mL，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1mL含盐酸金刚烷胺0.8474mg、对乙酰氨基酚1.990mg的对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 取感愈胶囊10粒，精密称定装量，研细内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于盐酸金刚烷胺80mg）置100mL量瓶中，加甲醇适量超声处理30min，取出，放置至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2.2.3 阴性对照溶液的制备 按处方比例制备不含盐酸金刚烷胺和对乙酰氨基酚的阴性样品，取0.34g，按“2.2.2”项下方法制备阴性对照溶液。

2.3 专属性试验 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10μL，注入液相色谱仪测定，结果表明，在此条件下，对乙酰氨基酚与盐酸金刚烷胺的分离度符合规定，峰形良好，阴性样品无干扰。结果见附图。

2.4 线性关系的考察 精密吸取对照品贮备液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0mL，分别置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，按上述“2.1”色谱条件测定。以进样量对数值（X）为横坐标，峰面积对数值（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，得盐酸金刚烷胺的线性回归方程为Y=0.6811X-1.8772，r=0.9999；对乙酰氨基酚的线性回归方程为：Y=0.6852X-1.9099，r=0.9999。盐酸金刚烷胺和对乙酰氨基酚分别在2.1184～12.7104μg、4.9736～29.8416μg范围内线性关系良好。

2.5 精密度试验 精密吸取对照品溶液10μL，在上述色谱条件下重复进样6次，记录色谱峰面积。峰面积的RSD（n=6）分别为：0.85%，1.09%。结果表明精密度良好。

2.6 重复性试验 取同一批次样品5份（批号130503），按“2.2.2”项下供试品溶液的制备方法，制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件测定，结果对乙酰氨基酚含量平均为100.2%， RSD=0.91%；盐酸金刚烷胺含量平均为9 9.3%，RSD=0.95%。

2.7 稳定性试验 取同一批次样品，按样品溶液制备方法制备供试品溶液，分别精密吸取同一供试品溶液10μL，于0、2、4、8、12、24h进样，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，记录色谱峰面积。结果盐酸金刚烷胺与对乙酰氨基酚的峰面积的RSD分别为0.91%，0.78%（n=6），说明供试品溶液在24h内稳定性良好。

2.8 加样回收率试验 取已知含量的感愈胶囊（批号：130503）内容物，研细，混匀，取粉末约33.72mg共6份，精密称定，分别置20mL量瓶中，分别精密加入对照品溶液10mL，按供试品溶液制备方法制备溶液并测定含量，计算回收率。结果见附表1。

2.9 样品含量测定 取供试品溶液，滤过，进样，测定，按外标法计算含量，测定3批的含量，结果见附表2。

3 讨论

3.1 流动相的选择 参考相关文献资料，曾经试验采用不同的流动相按不同比例进行检测，结果表明以乙腈-0.06%三氟乙酸（20∶80）为流动相效果最好，所以可作为本实验流动相。

3.2 现行质量标准用HPLC法测定对乙酰氨基酚的含量，用非水滴定法测定盐酸金刚烷胺的含量[1]。试验中发现该方法操作步骤繁琐，样品前处理取样量大。本文运用HPLC-ELSD法测定感愈胶囊中盐酸金刚烷胺及对乙酰氨基酚的含量，该方法操作简便，结果准确，重复性好，本文所进行的工作为今后开发感愈胶囊的质量监控奠定了基础。