免疫荧光病理检验中荧光抗体的敏感性在诊断狼疮性肾炎方面的作用探讨

刘洪玲

（辽宁省锦州市中心医院，辽宁 锦州 121001）

免疫荧光病理检验中荧光抗体的敏感性在诊断狼疮性肾炎方面的作用探讨

刘洪玲

（辽宁省锦州市中心医院，辽宁 锦州 121001）

目的 探究免疫荧光病理检查中荧光抗体的敏感性在诊断狼疮性肾炎的应用价值。方法 选取我院2013年7月至2015年3月收治的112例狼疮性肾炎患者，所有患者均采用免疫荧光病理检验方法对其免疫病理进行探究。将其结果和实行光镜组织切片检查以及电镜检查的结果进行对比。同时对患者C1q、C3、IgG、IgM、IgA荧光抗在病理切片上的沉积状况进行观察，利用免疫荧光病理检查对狼疮性肾炎的阳性率进行诊断。结果 经检验后，C1q、C3、IgG、IgM、IgA多数沉积在Ⅱ～Ⅴ型狼疮性肾炎的病理切片中，其沉积数量较多的常见Ⅳ型以及Ⅴ型病理切片中。将此结果和光镜组织切片以及电镜检查的结果进行对比，其阳性率经比较，以P＜0.05为差异，表示具有统计学意义。结论 对狼疮性肾炎患者采用免疫荧光病理中荧光抗体敏感性进行诊断，其效果较为显著，具有临床应用价值。

免疫荧光病理检验；敏感性；狼疮性肾炎

狼疮性肾炎在临床中是一种常见的恶性内脏损伤性疾病，对患者的生命安全造成严重的威胁。所以，对狼疮性肾炎患者进行及时诊断对治疗而言，具有重要意义，就目前而言，采用免疫荧光病理检验方法对其进行诊断，具有显著的诊断效果[1]。此研究对我院2013年7月至2015年3月收治的112例狼疮性肾炎患者的临床资料进行分析，报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料：选取我院2013年7月至2015年3月收治的112例狼疮性肾炎患者，男性患者为86例，女性患者为36例，年龄均在18～63岁，平均年龄为（39.6±8.3）岁。所有患者均符合狼疮性肾炎的诊断标准。在临床诊断中将其分为六种类型，4例患者为Ⅰ型（轻微系膜病变），25例患者为Ⅱ型（系膜增生型），17例患者为Ⅲ型（局灶型），45例患者为Ⅳ型（弥漫型），16例患者为Ⅴ型（膜型），5例患者为Ⅵ型（重度硬化型）。

表1　不同类型狼疮性肾炎患者的阳性率对比

1.2方法：通过B超穿刺探头进行引导，选择患者右肾下侧位置，并将其设置为穿刺点，通过皮自检活动枪对其实行穿刺，选择2～4 mm左右的肾组织，随后将其放置在生理盐水冰瓶里，立即送往检查。肾组织应采用OTC进行处理，并将其制作成为冰冻病理切片，其切片厚度大致为4 μm，采用丙酮对其进行固定处理，时间为10 min，并通过PBS进行清洗，清洗次数为3次。除此之外，还需要在病理切片上滴入C1q、C3、IgG、IgM、IgA荧光体，放置在温度为37 ℃的环境中进行培育，培育时间为30 min，完成上述流程后再次利用PBS对其进行清洗，通过甘油密封病理切片，并予以储存，储存地点为4 ℃的冰箱中。

1.3判定标准[2]：通过显微镜对C1q、C3、IgG、IgM、IgA荧光体的沉积现象进行观察。按照视野范围中所存在的荧光强度采用半定量进行分析。当上述荧光体在同一个肾小球中存在沉积现象，且沉积强度大于（+）时，将其称为“满堂亮”。

1.4统计学处理：选择Stata软件对研究中的数据进行分析，其数据结果以%来进行表示，数据间以P＜0.05为差异，表示具有统计学意义。

2　结 果

2.1对比不同分型狼疮性肾炎的检验阳性率：患者经检测后发现，其C1q、C3、IgG、IgM、IgA常见于Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型以及Ⅴ型中，病理间抗体阳性率经对比，以P＜0.05为差异，表示具有统计学意义，见表1。

2.2不同分型狼疮性肾炎患者病理切片中“满堂亮”的分布状况：患者经检验后，其Ⅰ型患者病理切片中的IgG均为阴性，同时Ⅵ型患者的病理切片也呈现为阴性，所以，上述两种类型患者的病理切片均为出现“满堂亮”现象。而Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型以及Ⅴ型患者经检查后，其阳性率为44.1%、48.7%、76.4%以及67.8%，经比较，以P＜0.05表示，具有统计学意义。

3　讨 论

狼疮性肾炎是一种自身免疫复合物性肾炎，具有较为复杂的病理变化，此病产的原因是由于免疫复合物的生成，其免疫细胞因子出现异常现象，其临床症状则表现为肾功能不全以及血尿等症状[3]。根据ISN标准能够将其分为6种类型，即为Ⅰ型（轻微系膜病变），Ⅱ型（系膜增生型），Ⅲ型（局灶型），Ⅳ型（弥漫型），Ⅴ型（膜型），Ⅵ型（重度硬化型）。

狼疮性肾炎在临床中病情发展较为缓慢，常和发作进行相互交替，因此病理类型也会出现转化现象，通常情况下，因自然发展的狼疮性肾炎会由Ⅰ型（轻微系膜病变），Ⅱ型（系膜增生型）向Ⅲ型（局灶型），Ⅳ型（弥漫型）进行转变。从而使得狼疮性肾炎患者的活动进行缓解，病理类型会从重型向轻型进行发展，Ⅳ型（弥漫型）会随着病情发展转化成Ⅱ型（系膜增生型），因此对患者进行肾活检时，其结果仅仅只代表疾病过程中的某一部分。

狼疮性肾炎患者自身具有相应的抗体，会逐渐形成大小存在差异的免疫复合物，并在肾小球皮下位置、上皮下方位置以及系膜位置处产生沉积现象，虽然主要物质为C3以及IgG，其IgG、IgM、IgA会一同出现，因此形成“满堂亮”现象[4]。此现象是狼疮性肾炎的主要表现特征。而“满堂亮”所具有的活动性在狼疮性肾炎患者中较为显著，然而对于病情较轻的狼疮性肾炎以及出现较为硬化的狼疮性肾炎患者来说，免疫复合物具有较弱的沉积强度。

在临床中对狼疮性肾炎进行诊断的过程中，是通过肾脏病理、临床表现症状以及实验室检查进行诊断的，所以，免疫荧光病理检验对狼疮性肾炎进行诊断具有重要的临床意义，提升“满堂亮”阳性的百分率对此病而言，作用较大[5]。免疫荧光病理检验的主要基本原理则是将抗原抗体所存在的异性进行相互结合，此方法具有较高的敏感性以及特异性，同时对患者的定位较为准确，能够对其采用半定量进行探究。然而所处的温度、时间以及对抗体形成的效价则会其染色效果产生影响。为此，想要提升免疫荧光病理的技术水平，应在检查工作中做到以下几点：想要将患者肾活检标本所存在的抗原性进行保存，应及时将组织放置在生理盐水纱布中，而生理盐水纱布应处在湿润的状态中，随后将其放置在4 ℃的环境中，及时送往检查。抗体应遵循现配现用的原则，按照说明书对其进行试验，从而找出良好的工作浓度。

在对抗体进行滴加之前，需要通过免疫组织笔在组织周边进行划圈，这样做则可以使抗体完全覆盖在组织切片中，并未和周边组织中的抗体出现相互影响的现象。而盒中还应存在适量的蒸馏水，以免在进行染色过程中切片出现干燥现象，如果染色后没有显著的效果可以选择4 ℃过夜的手段，从而使肾活检的质量提升。在玻片背面采用记号笔将组织切片的范围减小，这样做有助于荧光镜及时找出肾组织，以此来缓解荧光衰减现象。

在此研究中，C1q、C3、IgG、IgM、IgA常见于Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型以及Ⅴ型中，而“满堂亮”现象出现在Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型以及Ⅴ型患者中，患者经检查后，其阳性率为44.1%、48.7%、76.4%以及67.8%，病理间经比较，以P＜0.05为差异，表示具有统计学意义。

综上所述，对狼疮性肾炎患者而言，采用免疫荧光病理检验中荧光抗体的敏感性进行诊断，具有良好的效果。经过大量研究表明，敏感性能够有效提升狼疮性肾炎的诊断效果，有助于后续治疗方案的确定，值得在临床中推广应用。

[1] 褚利霞，刘玉东.敏感性在狼疮性肾炎诊断中免疫荧光病理检验的临床价值分析[J].中外女性健康(下半月)，2014(4):70-.

[2] 张秀智，赵焕芬，徐明堂，等.肾穿刺组织免疫荧光检测阳性对照片的制作[J].临床与实验病理学杂志，2015，31(1):107-107.

[3] 任献国，刘光陵，夏正坤，等.儿童肾病综合征肾组织病理光镜和免疫荧光分型的关系[J].临床儿科杂志，2012，30(2):147-149.

[4] 姚卫国，王云满，金周慧，等.复合感染法联合5/6肾切除IgAN肾小球硬化模型的病理研究[J].国际泌尿系统杂志，2012，32(2):151-155.

[5] 李艳杰，彭川洋，张英，等.直接免疫荧光检查诊断口腔黏膜大疱类疾病临床价值研究[J].中国实用口腔科杂志，2014，7(12):736-739.

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1671-8194（2015）34-0114-02