HIV快速检测在替代策略中的应用研究

吴学美 王禹鑫 雷寿熊 白子匡 王兴金

【摘 要】目的 通过对昭通市2015年1-6月445份艾滋病病毒（HIV）抗体检测结果、2006年-2014年的123例确证阴性标本和110例不确定标本用2种快速试剂复核及WB带型的分析，探讨HIV抗体快速检测替代策略应用的可行性。方法 对所有筛查阳性标本同时用2种免疫层析试验（RT）、1种酶联免疫吸附试验（ELISA）及免疫印迹法（WB）检测，并对检测结果进行分析。结果 445份初筛阳性的标本中：434份两种快速检测结果均为阳性的，426份WB结果为阳性，8份WB结果为不确定；11份2种快速检测结果为1阴1阳的，5份WB结果为不确定，6份WB结果为阴性；110份WB不确定样本中，41份两种快速检测结果为阳性，69份两种快速检测结果为1阴1阳；123份WB结果为阴性的样本，快速检测结果均为1阴1阳。结论 两种快速试剂检测结果均为阳性与WB结果符合率为98.16%，两种快速试剂检测结果为1阴1阳的WB结果无1例为阳性。

【关键词】HIV；快速检测；替代策略

经典的HIV确证检测免疫印迹试验（WB）成本比较高，检测要求高，确证实验室集中检测，开展的频率有限，时效性并不高。作为控制传染源的重要措施之一，早发现早治疗感染者已成为防治艾滋病的一个非常重要的环节。探讨寻求一种成本低、檢测方便、时效高的检测方法是控制好传染源方法之一。

一.材料及方法

1.样本来源

选取2015年1-6月昭通市各检测实验室筛查阳性送确证样本445份：其中男性290例，女性155例，年龄2-84岁；2006年-2014年确证检测不确定样本110例和阴性样本123例。

2.试剂

1）筛查试剂 酶联免疫吸附试验（ELISA），采用英科新创（厦门）科技有限公司生产的HIV1+2抗体诊断试剂盒；高敏感性快速检测试剂为美国雅培HIV1+2型胶体硒法试剂，高特异性快速试剂为韩国SD胶体金法试剂。

2）确证试剂 新加坡MP生物医学亚太私人有限公司生产的Gene lab HIV Blot2.2人类免疫缺陷病毒（HIV1+2）抗体免疫印迹试验。

所有试剂批检合格，在有效期内使用。

3.仪器

1）洗板机美国宝特（Bio-Tek）ELx50，酶标仪美国BioTek ELx808。

2）全自动免疫印迹仪TECAN ProfiBlt 48。

3）快速法用目测。

4.方法

对所有HIV初筛阳性送检样本均进行复检，用两种快速检测和酶联免疫吸附实验（ELISA）进行检测，三种结果均阴性，则报告阴性，有一种、两种或三种阳性者则进行免疫印迹试验（WB）。对于既往确证不确定及阴性的样本用两种快速试剂复核。

5.判定标准

快速试验依据雅培、韩国SD试剂说明书、《艾滋病病毒抗体快速检测技术手册》2011年版【2】的要求进行判读。免疫印迹试验（WB）依据《全国艾滋病检测技术规范》2009年版【3】和MP生物医学亚太私人有限公司Gene lab HIV Blot2.2试剂使用说明书的结果判断标准，HIV抗体阳性为特异性条带出现满足阳性标准的既判为阳性。

二.结果

1.445份标本快速检测结果与WB结果见表1

表1.快速检测结果与WB结果

快速法 数量 WB结果 阳性符合率（%）

阳性 不确定 阴性

双阳

1阴1阳 434

11 426

0 8

5 0

6 98.16

0

合计 445 426 13 6 95.73

445份筛查阳性的样本中，WB结果为阳性的仅占95.73%，不确定的占2.92%，阴性的占1.35%；两种快速检测结果均为阳性的434份样本中，WB结果为阳性的率高达98.16%，1.84%为不确定，没有阴性样本；两种快速检测结果为1阴1阳的11份样本中，WB结果没有阳性，只有45.45%的为不确定，54.55%的为阴性。

2.110份不确定样本和123份阴性样本复核结果见表2

表2.不确定及阴性样本复核结果

样本 数量 快速检测

双阳 单阳 阴性

WB不确定 110 41 69 0

WB阴性 123 0 123 0

合计 233 41 192 0

110份WB不确定样本中，两种快速试剂检测结果均为阳性的样本有41份（37.3%），结果为1阴1阳的样本有69份（62.7%）；而在123份WB阴性的样本中，两种快速试剂检测结果均为阳性的样本为0，结果为1阴1阳的样本有123份（100%）。

三、讨论

目前，全国艾滋病（AIDS）疫情流行快速增长的趋势已经得到控制，但昭通市的疫情却处于不断上升趋势。现行的HIV抗体筛查和确证实验[酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫印迹试验（WB）]策略成本高、检测要求高、筛查到确证的时效性不高，导致HIV检测的可及性受到一定的影响，成为艾滋病检测的不利因素【4】。使艾滋病的预防和控制工作受到影响。因此，研究HIV抗体检测经典确证方法的替代策略，应用现有的用于HIV抗体检测的几种快速试剂联合检测，代替经典的ELISA和WB的确证组合，以期在检测结果的可靠性和准确性不降低的情况下，使检测时间、检测成本降低，从而提高检测的可及性。

本次研究的445例样本中，两种快速试剂检测结果均为阳性的434例样本，免疫印迹试验阳性率为98.16%，不确定的8例样本（1.84%）；而两种快速试剂检测1阴1阳的11例样本，免疫印迹试验无1例阳性结果，只有5例不确定和6例阴性结果。进一步对2006年-2014年的110例不确定样本和123例免疫印迹试验阴性样本用两种快速试剂复核，发现110例样本中有41例复核结果为双阳，69例为1阴1阳；123例阴性样本复核结果全为1阴1阳，无双阳结果。

鉴于两种快速试剂检测均为阳性的样本，免疫印迹试验（WB）阳性率仅为98.16%，所以单纯快速检测阳性不能替代确证试验；两种快速试剂检测结果为1阴1阳的样本，免疫印迹试验（WB）无阳性，只有一半不到的样本为不确定结果，其余均为阴性，所以两种快速试剂检测结果为1阴1阳的样本建议随访观察。

参考文献：

[1]中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心，艾滋病病毒抗体快速检测技术手册，2011年版。

[2]中国疾病预防控制中心，全国艾滋病检测技术规范，2009年版。

[3]秦淑文，蒋岩，汪宁，HIV抗体免疫印迹法的替代策略及应用进展，中国艾滋病性病，2005年5期。

[4]楚承霞，赵山平，刘芳芳等.HIV抗体不确定标本158例的结果及随访转归观察[J].检验医学与临床，2013，10（6）：659-660，662.

[5]曹栋卿，胡雪娜，赵丹燕等.HIV抗体不确定样品的随访结果[J].浙江预防医学，2015，26（1）：68-70.