水产品氯霉素胶体金试纸条快速检测研究

张莹莹

摘要：水产品中氯霉素残留会通过食物链富集作用对人体健康构成危害，建立快速、简便、有效的检测技术十分必要。胶体金试纸条快速检测技术操作简单，检测时间短，携带方便，价格经济。对胶体金试纸条快速检测技术进行探讨，为水产品氯霉素残留快速检测发展提供技术依据。

关键词：水产品；氯霉素；胶体金试纸条；快速检测

中图分类号：TS207.3 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2014）04-0087-02

氯霉素（Chloramphenicol，CAP）作为广谱抗生素，于2002年被禁止在我国水产品的养殖、保鲜、加工和运输等生产环节中使用，美国、欧盟等国家也严格规定水产品中氯霉素不得检出（检出限为1 μg/kg）。药物残留问题给我国水产品出口贸易带来巨大影响。同时，近年来食品安全已成为我国百姓最关心的话题之一，随着水产品消费量的日益增长，其质量安全问题也受到广泛关注。因此，建立简便、快速、有效的检测技术十分必要。本文对氯霉素胶体金试纸条快速检测技术进行探讨，以期为快速检测技术的进一步发展提供参考。

1 氯霉素的应用与危害

氯霉素（CAP）为白色或微带黄绿色的结晶性粉末，味极苦，易溶于甲醇、丙酮等有机溶剂，微溶于水。CAP能有效抑制炭疽杆菌、链球菌及衣原体等多种病原微生物。CAP因其对水产品病害的预防和治疗都有良好的效果，且价格低廉，在20世纪80年开始被广泛应用于水产品的养殖和加工中。

CAP在水产品中代谢慢，残留时间长，会通过食物链的富集作用对人体构成危害。曹巧玲等人认为，CAP可导致人体骨髓造血功能紊乱、胃肠道不适、婴儿灰婴综合征等多种不良反应。CAP不仅对人体有副作用，对动植物也有不同程度的影响。因此，许多国家制订了动物源性食品中CAP的使用限量和检出标准，我国也规定其在水产品中禁止使用。

2 水产品氯霉素快速检测概况

目前，水产品中CAP常用的检测方法有酶联免疫法、胶体金免疫层析法和色谱分析法等。色谱分析法灵敏度高、准确性好，但是前处理过程复杂，且仪器设备成本较高，不易普及，也不适合日常的监管工作。酶联免疫法和胶体金免疫层析法操作简单、用时较短，但易出现假阳性，可用于大批量样品的初筛工作。张晓辉等人的研究结果表明，胶体金免疫层析法比酶联免疫法操作更简便、使用更快捷、价格更经济，适于现场筛选工作。胶体金试纸条是在胶体金免疫层析技术基础上研制而成的，其便于携带，操作时间短，可在现场经肉眼判断得到检测结果。

我国水产行业规模越来越大，但分布较为零散，难以集中管理，而水产品中的CPA并不能通过肉眼辨别出来，检测程序繁杂，给基层监管人员带来大量的工作。如果先用胶体金试纸条在现场进行快速初筛，然后将疑似样品通过色谱技术进行进一步检测，可以大大缩短检测周期，提高工作效率，更加及时有效地进行监管工作。

3 胶体金试纸条快速检测技术

3.1 胶体金试纸条快速检测技术的原理

胶体金试纸条是采用胶体金标记技术，以胶体金作为示踪物，应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。若样品溶液中含有CAP（抗原物质），则CAP与金标抗体相结合，进而封闭金标抗体上CAP的抗原结合点，阻止金标抗体与纤维素膜上的CAP偶联物结合，使T线显色较弱、甚至不显色，结果为阳性；若样品溶液中没有CAP，则不能阻止金标抗体与纤维素膜上的CAP偶联物结合，从而T线显色较强，呈红褐色，结果为阴性。具体如图1所示。

3.2 胶体金试纸条快速检测技术的应用

胶体金试纸条具有快速、简便、安全、适用于现场筛选和快速检测工作等优点。张晓辉等人的研究结果表明，采用胶体金试纸条快速检测法，可在5～10 min可测得虾中残留的CAP，检测限为1.000 μg/kg，与酶联免疫法进行比较，检测结果总符合率为92.5%，说明该法特异性强、重复性好，适于现场检测。肖治理等人采用柠檬酸钠还原法制备胶体金，可在5～8 min完成CPA检测，方法稳定，检测限为2 ng/mL，检测结果肉眼可判断。但是，胶体金试纸条用于水产品快速检测的时日尚短，需要进一步观察和完善，而且目前市面上的胶体金试纸条快速检测产品品种繁多、质量参差不齐。刘欢等人研究报道，国内市面上销售的4种胶体金试纸条快速检测产品，仅有1种产品能100%准确地检测出68个样品中是否残留CAP，有1种产品的假阳性率达35%，2种产品的最低检测浓度值与商标标识最低检出限不相符。所以，在使用胶体金试纸条快速检测产品前，应该先进行产品信息验证，确保该产品符合标准后方能用于批量样品检测工作。

参考文献

[1] 肖乐.氯霉素风波[J].中国水产，2002（7）：12-17.

[2] 郭根和，潘葳，苏德森，等.高效液相色谱法测定对虾中五种磺胺类药物残留[J].现代科学仪器，2005（1）：70-72.

[3] 汤轶伟，励建荣，孟良玉.水产品中氯霉素药物残留检测方法研究进展[J].食品科学，2013，34（11）：333-337.

[4] 曹巧玲，杨凯，吴泽新，等.氯霉素的毒性作用和检测方法研究进展[J].职业与健康，2013，29（16）：2 095-2 097.

[5] 刘曦薇，吴玲玲.氯霉素对斑马鱼早期发育的毒性效应[J].环境科学学报，2010，30（8）：1 649-1 657.

[6] 吕顺，钱鑫萍，范远景，等.氯霉素细胞毒性研究[J].安徽农业科学，2008，36（20）：8 472-8 474.

[7] 张晓辉，李余动，孔蕾，等.ELISA和GICA快速检测水产品中氯霉素残留的比较[J].浙江农业学报，2005，17（4）：216-218.

[8] 肖治理，曾文亮，王弘，等.氯霉素胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制[J].食品与机械，2013，29（4）：54-62.

[9] 刘欢，孙伟红，马兵，等.水产品中氯霉素残留快速检测产品的质量分析和评价[J].中国渔业质量与标准，2012，2（3）：55-61.

Abstract： Chloramphenicol residues in aquatic products affect human health through enrichment of the food chain， so a rapid， simple， and effective technology is necessary. Colloidal gold test strip is a testing technology with such advantages as easy operation， short detection time， being convenient to carry and favorite price. In this paper， the colloidal gold test strip for rapid detection technology is discussed to provide the technical basis for the development of rapid detection of chloramphenicol residues in aquatic products.

Key words： aquatic products； chloramphenicol； colloidal gold test strip； rapid detection

摘要：水产品中氯霉素残留会通过食物链富集作用对人体健康构成危害，建立快速、简便、有效的检测技术十分必要。胶体金试纸条快速检测技术操作简单，检测时间短，携带方便，价格经济。对胶体金试纸条快速检测技术进行探讨，为水产品氯霉素残留快速检测发展提供技术依据。

关键词：水产品；氯霉素；胶体金试纸条；快速检测

中图分类号：TS207.3 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2014）04-0087-02

氯霉素（Chloramphenicol，CAP）作为广谱抗生素，于2002年被禁止在我国水产品的养殖、保鲜、加工和运输等生产环节中使用，美国、欧盟等国家也严格规定水产品中氯霉素不得检出（检出限为1 μg/kg）。药物残留问题给我国水产品出口贸易带来巨大影响。同时，近年来食品安全已成为我国百姓最关心的话题之一，随着水产品消费量的日益增长，其质量安全问题也受到广泛关注。因此，建立简便、快速、有效的检测技术十分必要。本文对氯霉素胶体金试纸条快速检测技术进行探讨，以期为快速检测技术的进一步发展提供参考。

1 氯霉素的应用与危害

氯霉素（CAP）为白色或微带黄绿色的结晶性粉末，味极苦，易溶于甲醇、丙酮等有机溶剂，微溶于水。CAP能有效抑制炭疽杆菌、链球菌及衣原体等多种病原微生物。CAP因其对水产品病害的预防和治疗都有良好的效果，且价格低廉，在20世纪80年开始被广泛应用于水产品的养殖和加工中。

CAP在水产品中代谢慢，残留时间长，会通过食物链的富集作用对人体构成危害。曹巧玲等人认为，CAP可导致人体骨髓造血功能紊乱、胃肠道不适、婴儿灰婴综合征等多种不良反应。CAP不仅对人体有副作用，对动植物也有不同程度的影响。因此，许多国家制订了动物源性食品中CAP的使用限量和检出标准，我国也规定其在水产品中禁止使用。

2 水产品氯霉素快速检测概况

目前，水产品中CAP常用的检测方法有酶联免疫法、胶体金免疫层析法和色谱分析法等。色谱分析法灵敏度高、准确性好，但是前处理过程复杂，且仪器设备成本较高，不易普及，也不适合日常的监管工作。酶联免疫法和胶体金免疫层析法操作简单、用时较短，但易出现假阳性，可用于大批量样品的初筛工作。张晓辉等人的研究结果表明，胶体金免疫层析法比酶联免疫法操作更简便、使用更快捷、价格更经济，适于现场筛选工作。胶体金试纸条是在胶体金免疫层析技术基础上研制而成的，其便于携带，操作时间短，可在现场经肉眼判断得到检测结果。

我国水产行业规模越来越大，但分布较为零散，难以集中管理，而水产品中的CPA并不能通过肉眼辨别出来，检测程序繁杂，给基层监管人员带来大量的工作。如果先用胶体金试纸条在现场进行快速初筛，然后将疑似样品通过色谱技术进行进一步检测，可以大大缩短检测周期，提高工作效率，更加及时有效地进行监管工作。

3 胶体金试纸条快速检测技术

3.1 胶体金试纸条快速检测技术的原理

胶体金试纸条是采用胶体金标记技术，以胶体金作为示踪物，应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。若样品溶液中含有CAP（抗原物质），则CAP与金标抗体相结合，进而封闭金标抗体上CAP的抗原结合点，阻止金标抗体与纤维素膜上的CAP偶联物结合，使T线显色较弱、甚至不显色，结果为阳性；若样品溶液中没有CAP，则不能阻止金标抗体与纤维素膜上的CAP偶联物结合，从而T线显色较强，呈红褐色，结果为阴性。具体如图1所示。

3.2 胶体金试纸条快速检测技术的应用

胶体金试纸条具有快速、简便、安全、适用于现场筛选和快速检测工作等优点。张晓辉等人的研究结果表明，采用胶体金试纸条快速检测法，可在5～10 min可测得虾中残留的CAP，检测限为1.000 μg/kg，与酶联免疫法进行比较，检测结果总符合率为92.5%，说明该法特异性强、重复性好，适于现场检测。肖治理等人采用柠檬酸钠还原法制备胶体金，可在5～8 min完成CPA检测，方法稳定，检测限为2 ng/mL，检测结果肉眼可判断。但是，胶体金试纸条用于水产品快速检测的时日尚短，需要进一步观察和完善，而且目前市面上的胶体金试纸条快速检测产品品种繁多、质量参差不齐。刘欢等人研究报道，国内市面上销售的4种胶体金试纸条快速检测产品，仅有1种产品能100%准确地检测出68个样品中是否残留CAP，有1种产品的假阳性率达35%，2种产品的最低检测浓度值与商标标识最低检出限不相符。所以，在使用胶体金试纸条快速检测产品前，应该先进行产品信息验证，确保该产品符合标准后方能用于批量样品检测工作。

参考文献

[1] 肖乐.氯霉素风波[J].中国水产，2002（7）：12-17.

[2] 郭根和，潘葳，苏德森，等.高效液相色谱法测定对虾中五种磺胺类药物残留[J].现代科学仪器，2005（1）：70-72.

[3] 汤轶伟，励建荣，孟良玉.水产品中氯霉素药物残留检测方法研究进展[J].食品科学，2013，34（11）：333-337.

[4] 曹巧玲，杨凯，吴泽新，等.氯霉素的毒性作用和检测方法研究进展[J].职业与健康，2013，29（16）：2 095-2 097.

[5] 刘曦薇，吴玲玲.氯霉素对斑马鱼早期发育的毒性效应[J].环境科学学报，2010，30（8）：1 649-1 657.

[6] 吕顺，钱鑫萍，范远景，等.氯霉素细胞毒性研究[J].安徽农业科学，2008，36（20）：8 472-8 474.

[7] 张晓辉，李余动，孔蕾，等.ELISA和GICA快速检测水产品中氯霉素残留的比较[J].浙江农业学报，2005，17（4）：216-218.

[8] 肖治理，曾文亮，王弘，等.氯霉素胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制[J].食品与机械，2013，29（4）：54-62.

[9] 刘欢，孙伟红，马兵，等.水产品中氯霉素残留快速检测产品的质量分析和评价[J].中国渔业质量与标准，2012，2（3）：55-61.

Abstract： Chloramphenicol residues in aquatic products affect human health through enrichment of the food chain， so a rapid， simple， and effective technology is necessary. Colloidal gold test strip is a testing technology with such advantages as easy operation， short detection time， being convenient to carry and favorite price. In this paper， the colloidal gold test strip for rapid detection technology is discussed to provide the technical basis for the development of rapid detection of chloramphenicol residues in aquatic products.

Key words： aquatic products； chloramphenicol； colloidal gold test strip； rapid detection

摘要：水产品中氯霉素残留会通过食物链富集作用对人体健康构成危害，建立快速、简便、有效的检测技术十分必要。胶体金试纸条快速检测技术操作简单，检测时间短，携带方便，价格经济。对胶体金试纸条快速检测技术进行探讨，为水产品氯霉素残留快速检测发展提供技术依据。

关键词：水产品；氯霉素；胶体金试纸条；快速检测

中图分类号：TS207.3 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2014）04-0087-02

氯霉素（Chloramphenicol，CAP）作为广谱抗生素，于2002年被禁止在我国水产品的养殖、保鲜、加工和运输等生产环节中使用，美国、欧盟等国家也严格规定水产品中氯霉素不得检出（检出限为1 μg/kg）。药物残留问题给我国水产品出口贸易带来巨大影响。同时，近年来食品安全已成为我国百姓最关心的话题之一，随着水产品消费量的日益增长，其质量安全问题也受到广泛关注。因此，建立简便、快速、有效的检测技术十分必要。本文对氯霉素胶体金试纸条快速检测技术进行探讨，以期为快速检测技术的进一步发展提供参考。

1 氯霉素的应用与危害

氯霉素（CAP）为白色或微带黄绿色的结晶性粉末，味极苦，易溶于甲醇、丙酮等有机溶剂，微溶于水。CAP能有效抑制炭疽杆菌、链球菌及衣原体等多种病原微生物。CAP因其对水产品病害的预防和治疗都有良好的效果，且价格低廉，在20世纪80年开始被广泛应用于水产品的养殖和加工中。

CAP在水产品中代谢慢，残留时间长，会通过食物链的富集作用对人体构成危害。曹巧玲等人认为，CAP可导致人体骨髓造血功能紊乱、胃肠道不适、婴儿灰婴综合征等多种不良反应。CAP不仅对人体有副作用，对动植物也有不同程度的影响。因此，许多国家制订了动物源性食品中CAP的使用限量和检出标准，我国也规定其在水产品中禁止使用。

2 水产品氯霉素快速检测概况

目前，水产品中CAP常用的检测方法有酶联免疫法、胶体金免疫层析法和色谱分析法等。色谱分析法灵敏度高、准确性好，但是前处理过程复杂，且仪器设备成本较高，不易普及，也不适合日常的监管工作。酶联免疫法和胶体金免疫层析法操作简单、用时较短，但易出现假阳性，可用于大批量样品的初筛工作。张晓辉等人的研究结果表明，胶体金免疫层析法比酶联免疫法操作更简便、使用更快捷、价格更经济，适于现场筛选工作。胶体金试纸条是在胶体金免疫层析技术基础上研制而成的，其便于携带，操作时间短，可在现场经肉眼判断得到检测结果。

我国水产行业规模越来越大，但分布较为零散，难以集中管理，而水产品中的CPA并不能通过肉眼辨别出来，检测程序繁杂，给基层监管人员带来大量的工作。如果先用胶体金试纸条在现场进行快速初筛，然后将疑似样品通过色谱技术进行进一步检测，可以大大缩短检测周期，提高工作效率，更加及时有效地进行监管工作。

3 胶体金试纸条快速检测技术

3.1 胶体金试纸条快速检测技术的原理

胶体金试纸条是采用胶体金标记技术，以胶体金作为示踪物，应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。若样品溶液中含有CAP（抗原物质），则CAP与金标抗体相结合，进而封闭金标抗体上CAP的抗原结合点，阻止金标抗体与纤维素膜上的CAP偶联物结合，使T线显色较弱、甚至不显色，结果为阳性；若样品溶液中没有CAP，则不能阻止金标抗体与纤维素膜上的CAP偶联物结合，从而T线显色较强，呈红褐色，结果为阴性。具体如图1所示。

3.2 胶体金试纸条快速检测技术的应用

胶体金试纸条具有快速、简便、安全、适用于现场筛选和快速检测工作等优点。张晓辉等人的研究结果表明，采用胶体金试纸条快速检测法，可在5～10 min可测得虾中残留的CAP，检测限为1.000 μg/kg，与酶联免疫法进行比较，检测结果总符合率为92.5%，说明该法特异性强、重复性好，适于现场检测。肖治理等人采用柠檬酸钠还原法制备胶体金，可在5～8 min完成CPA检测，方法稳定，检测限为2 ng/mL，检测结果肉眼可判断。但是，胶体金试纸条用于水产品快速检测的时日尚短，需要进一步观察和完善，而且目前市面上的胶体金试纸条快速检测产品品种繁多、质量参差不齐。刘欢等人研究报道，国内市面上销售的4种胶体金试纸条快速检测产品，仅有1种产品能100%准确地检测出68个样品中是否残留CAP，有1种产品的假阳性率达35%，2种产品的最低检测浓度值与商标标识最低检出限不相符。所以，在使用胶体金试纸条快速检测产品前，应该先进行产品信息验证，确保该产品符合标准后方能用于批量样品检测工作。

参考文献

[1] 肖乐.氯霉素风波[J].中国水产，2002（7）：12-17.

[2] 郭根和，潘葳，苏德森，等.高效液相色谱法测定对虾中五种磺胺类药物残留[J].现代科学仪器，2005（1）：70-72.

[3] 汤轶伟，励建荣，孟良玉.水产品中氯霉素药物残留检测方法研究进展[J].食品科学，2013，34（11）：333-337.

[4] 曹巧玲，杨凯，吴泽新，等.氯霉素的毒性作用和检测方法研究进展[J].职业与健康，2013，29（16）：2 095-2 097.

[5] 刘曦薇，吴玲玲.氯霉素对斑马鱼早期发育的毒性效应[J].环境科学学报，2010，30（8）：1 649-1 657.

[6] 吕顺，钱鑫萍，范远景，等.氯霉素细胞毒性研究[J].安徽农业科学，2008，36（20）：8 472-8 474.

[7] 张晓辉，李余动，孔蕾，等.ELISA和GICA快速检测水产品中氯霉素残留的比较[J].浙江农业学报，2005，17（4）：216-218.

[8] 肖治理，曾文亮，王弘，等.氯霉素胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制[J].食品与机械，2013，29（4）：54-62.

[9] 刘欢，孙伟红，马兵，等.水产品中氯霉素残留快速检测产品的质量分析和评价[J].中国渔业质量与标准，2012，2（3）：55-61.

Abstract： Chloramphenicol residues in aquatic products affect human health through enrichment of the food chain， so a rapid， simple， and effective technology is necessary. Colloidal gold test strip is a testing technology with such advantages as easy operation， short detection time， being convenient to carry and favorite price. In this paper， the colloidal gold test strip for rapid detection technology is discussed to provide the technical basis for the development of rapid detection of chloramphenicol residues in aquatic products.

Key words： aquatic products； chloramphenicol； colloidal gold test strip； rapid detection