ADSCs辅助脂肪移植在面部软组织填充中的应用

杨志宏　上官守琴　田诗政　陆华★

·诊治分析·

ADSCs辅助脂肪移植在面部软组织填充中的应用

杨志宏上官守琴田诗政陆华★

目的 探讨自体脂肪源性干细胞（ADSCs）辅助脂肪移植在面部软组织填充中的临床应用。方法 在下腹部抽吸脂肪，将获得的脂肪采用标准分离、纯化程序提取ADSCs，将其与颗粒脂肪均匀混合后填充面部软组织缺损。结果 35例患者，随访3～24月，34例1次填充，1例2次填充，效果满意。所有患者术后填充区丰满柔和，面部恢复其软组织量，形态质感与周围组织一致，面部轮廓弧度自然流畅，形态自然，效果满意。结论 采用ADSCs辅助脂肪移植填充面部软组织缺损创伤小，手术效果明显，是一种较为理想的治疗面部单纯软组织缺失的方法。

脂肪源性干细胞 移植 脂肪 面部软组织

自体脂肪移植用于面部软组织填充，在整形手术中的应用越来越广泛，但移植的脂肪组织存在高吸收率和低存活率的问题［1］，限制了其在临床上的应用。因此，如何提高脂肪移植后的成活率具有重要临床意义。研究［2］表明脂肪来源干细胞（ADSCs）可改善局部血流、促进脂肪成活。在临床上得到应用，并取得理想的效果。作者自2011年10月至2014年2月采用ADSCs辅助脂肪颗粒移植填充面部软组织缺损35例，效果满意。现报道如下。

1　临床资料

1.1一般资料 本组共35例患者，男2例，女33例；年龄22～54岁，平均（36.2±7.1）岁。其中，鼻唇沟7例，薄唇3例，眼睑术后凹陷和粘连畸形3例，泪沟畸形9例，面部发育不对称2例，颞部凹陷畸形5例，颊部凹陷畸形3例，眉间纹3例，脂肪填充剂量因填充部位、面积及深度而异。除1例面部发育不对称致移植2次外，其余患者均移植1次。一次注射脂肪量1～18ml，平均7.4ml。

1.2手术方法 （1）术前准备：行血常规、心电图等检查，摄面部正侧位照片，患者于站立位，在光线充足的情况下用美兰标记出面部需要充填的部位和脂肪抽吸部位。确认填充部位的范围及凹陷程度，估计所需脂肪量。签署知情同意书。（2）颗粒脂肪的取材与处理：选择下腹部作为脂肪供区，局部肿胀麻醉下用20ml注射器连接2～3mm钝头吸脂管轻柔抽吸脂肪，将吸出的脂肪静置洗涤纯化。（3）ADSCs的提取：将100ml脂肪组织分装至50ml离心管中送细胞分离室，由专业人员负责提取。1000r/min离心5 min；离心后弃上层油脂，将脂肪层重新收集至离心管中，加入无菌胶原酶液，充分振荡混匀，恒温振荡箱内消化，1200r/min离心10 min；离心后将各个离心管内沉淀层装入同一离心管内，以70μm筛网过滤，滤过液再经1000r/min离心和重悬2次，调整细胞浓度至合适浓度备用。取活细胞计数仪计数［通常细胞浓度为（1.0～20）×109/L，每例患者获取的细胞总数≥2×107］。取少量细胞进行细菌培养排除细菌污染。将提取的ADSCs与离心后获取的20ml颗粒脂肪组织充分混合，静置30min，使ADSCs能与脂肪颗粒细胞充分附着，形成细胞辅助脂肪移植（CAL）混合物。

1.3CAL移植 面部常规消毒铺巾，局部浸润麻醉或局部神经阻滞麻醉成功后，用10ml注射器针头于相对隐蔽部位作皮肤穿刺，用16号单孔针头沿穿刺点进行脂肪注射。回抽无血后，在标记范围内作多隧道、多层次、多点、少量的注射，避免路线重复，边退针边注射脂肪颗粒。注射完成后进行局部按摩塑形，使脂肪颗粒均匀分布于整个受区并与周围自然衔接。注射层次一般在皮下组织深层、SMAS筋膜浅层，注射量以填充部位稍高于周围组织为宜，泪沟一般每侧填充量2～3ml，眼睑1～2ml，唇部2～4ml，鼻唇沟2～3ml，颊部、颞部凹陷情况充填量因人而异。应避免损伤局部神经和血管。

1.4术后处理及评价 术后仅包扎注射针孔处，嘱患者术后24h内间断性的冰敷。移植后减少或避免移植区周围肌肉的活动1周，防止移植脂肪中新生血管的损伤。术后定期随访、照相，与术前进行对比。评价结果的标准：表情是否自然；局部皮肤有无凹凸不平；局部是否有硬块和囊肿；患者和医师是否满意等。

2　结果

本组共35例患者，通过术前后照片的比较，所有患者在术后3个月外观基本稳定。术后第1周常能见到轻微的青紫和肿胀。在长期随访中未发现皮肤表面凹凸不平。对所有患者随访3～24个月，平均随访14个月。34例患者经1次填充即达到预期的临床效果；1例经第2次手术填充，达到满意的临床效果。所有患者均无硬结、感染、脂肪液化、纤维囊性化、钙化及脂肪栓塞等并发症发生。所有患者术后填充区丰满柔和，面部恢复其软组织量，形态质感与周围组织一致，面部轮廓弧度自然流畅，得到明显改善。典型病例如图1、2。

图1　上睑凹陷畸形治疗前后对比

图2　薄唇治疗前后对比

3　讨论

自体脂肪颗粒移植在美容整形中的应用范围越来越广泛，包括凹陷畸形的修复、皱纹的填充、面部轮廓的调整、乳房修复重建等［3～4］，但由于颗粒脂肪移植后吸收率高，常需多次移植才能达到满意的效果。因此研究如何提高脂肪成活率具有重要的临床意义。

应用各种生长因子，减少脂肪的吸收、提高脂肪细胞的存活已成为一个重要的策略。研究表明：局部应用碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）、白介素-8（IL-8）等能促进血管生成，提高脂肪成活［5］。ADSCs能分泌多种细胞因子，具有多向分化的潜能，已成为治疗许多疾病的研究热点［6，7］。ADSCs辅助脂肪颗粒移植与传统的单纯自体脂肪颗粒移植比较术后效果有明显的提高。其机制可能为：（1）可直接分化为成熟脂肪细胞，是维持移植物体积、保证移植后长期疗效的关键。（2）可分化成血管内皮细胞和血管壁细胞，促进脂肪组织内的血管再生［8］。有助于移植脂肪组织的存活。（3）ADSCs在缺氧刺激和其他条件下释放血管生长因子，诱导移植脂肪周围的组织血管发生。（4） ADSCs以旁分泌形式分泌细胞因子和生长因子至损伤区域，调节组织局部微环境，使内源性干细胞聚集，并使其向特定组织细胞定向分化［9］。（5）提高移植脂肪的ADSCs比例，避免移植脂肪组织萎缩，有研究表明［10］，吸脂获取的脂肪组织由于一部分ADSCs 保留在大血管周围，一部分ADSCs 释放入吸脂脂肪液体成分中，导致其ADSCs 数量只有完整脂肪组织的一半。这种低ADSCs比例可能是移植的脂肪组织萎缩的主要原因之一［11］。 （6）在CAL中，脂肪组织可作为有活力的生物支架。

本资料总结了近3年来使用ADSCs和脂肪颗粒移植改善面部轮廓的情况，结果表明，ADSCs辅助脂肪移植治疗效果显著。作者发现注射层次与自体脂肪移植后吸收率有关，如眉部、泪沟等活动部位，以往此类治疗需多次注射提高疗效，丰富的面部表情和咀嚼运动可能减少移植脂肪的成活。因此在这些部位脂肪注射的层次主要以骨膜浅层为主，减少因面部活动导致脂肪吸收，提高脂肪成活率。

综上所述，ADSCs辅助的自体脂肪细胞移植具有成本低、操作简单、无免疫排斥反应，术后形体自然，无手术瘢痕等优点，它能够达到良好持久的临床效果，为整形外科及修复重建外科领域提供了新的研究方向，但由于本资料样本量少，提取患者的脂肪来源干细胞浓度差异大，需进一步探ADSCs最佳治疗浓度。

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湖北省教育厅科研项目（B20112101）

442000 湖北医药学院附属人民医院整形美容外科