不同pH值饮用水对SD大鼠生长发育及血清生化的影响

2015-10-14陈文文王志远刘月环吴旧生

实验动物与比较医学 2015年1期

关键词：酸化脏器周龄

陈文文，余　强，王志远，刘月环，吴旧生

（1. 浙江大学动物科学学院，杭州 310058； 2. 浙江省医学科学院实验动物中心，杭州 310013）

不同pH值饮用水对SD大鼠生长发育及血清生化的影响

陈文文1，2，余强2，王志远2，刘月环2，吴旧生1

（1. 浙江大学动物科学学院，杭州 310058； 2. 浙江省医学科学院实验动物中心，杭州 310013）

目的观测不同pH值饮用水对大鼠生长发育的影响。方法选取3周龄SPF级SD大鼠，随机分为4组，分别给予不同pH值的饮用水，并于饲养后第4、6、8、10和12周，分别从每组取10只大鼠，雌雄各半，测定体质量，安死术后取心、肝、脾、肺、肾和肾上腺6个脏器称重，计算脏器系数，同时采集血样检测血糖、血脂、肝功能、肾功能等生化指标。结果不同pH值饮用水组SD大鼠体质量，与同周龄pH7.0饮用水组相比无显著性差异。不同pH值饮用水组SD大鼠脏器系数及生化指标亦在正常值范围内波动。结论不同pH值饮用水对3～15周龄大鼠体质量、脏器系数和生化指标基本上无显著影响。

饮用水；脏器系数pH值；脏器系数；血糖；血脂；肝功能

SD大鼠是常用的实验动物，具有适应性强、繁殖率高等优点，广泛应用于生物医药、药理学、遗传疾病等研究［1］。动物的生长发育性能是其遗传特性与所处环境共同作用的结果［2］。其中，饮用水对大鼠的生长发育起着至关重要的作用。国内外研究发现，采用高压灭菌（121 ℃，25～30 min）后，将水酸化至pH2.0～2.5的处理方法可有效抑制饮用水中细菌生长，以此解决实验动物饮用水储存期短的问题［3，4］。但长期饮用酸化水是否会导致实验动物敏感生理生化指标发生变化等问题尚少有报道。因此，本文进行了SD大鼠长期饮用不同pH值灭菌酸化水的饲养试验，旨在确定长期饮用酸化水对SD大鼠血液理化指标的影响。

1　材料与方法

1.1实验动物

3周龄SPF级SD大鼠200只，雌雄各半，由浙江省实验动物中心提供［SCXK（浙）2014-0001］。整个试验过程在屏障系统进行，饲养条件严格按照GB14925-2010实验动物环境及设施指标设置。

1.2主要仪器

BS-1500A电子天平，感量1 g，德国赛多利斯公司；AB204-E型电子天平，感量1 mg，瑞士梅特勒-托利多国际有限公司； 7020全自动生化仪，日本日立公司。

1.3方法

1.3.1分组与饲养3周龄大鼠随机分为4组，雌雄各半，分别饮用滴加0.1 mol/L的盐酸或氢氧化钠溶液调节至所需的pH浓度，并用pH计检测，制备得pH2.0、pH3.0、pH7.0和pH9.0灭菌过滤水。自由饮食。

1.3.2检测指标于实验后4、6、8、10和12周后（即7、9、11、13和15周龄），每组分别各取5只雄性和5只雌性大鼠，称重，用速眠新麻醉静脉采血后，颈椎脱臼处死。取心、肝、脾、肺、肾、肾上腺，除去上述器官周围的脂肪结缔组织，吸尽脏器表面血液，用电子天平称量，计算脏器系数。血样经3 000 r/min离心15 min，分离血清，采用全自动生化仪检测血清生化指标。血液生化指标包括谷氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、尿素（UREA）、肌酐（CREA）、空腹血糖（GLU）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLOB）、白蛋白与球蛋白比值（A/G）、总蛋白（TP）、总胆红素（T-BIL）、直接胆红素（DBIL）、间接胆红素（IBIL）、总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和免疫球蛋白G（IgG）。

1.4统计方法

2　结果

2.1不同pH值饮用水对SD大鼠体质量的影响

大鼠分别饮用pH2.0、pH3.0和pH9.0饮用水饲养4周、6周、8周、10周和12周，与同周龄pH7.0饮用水组SD大鼠的体质量比较无显著性差异（P＞0.05）（表1）。

2.2不同pH值饮用水对SD大鼠脏器系数的影响

如表1所示，分别给予不同pH值饮用水饲养4周～12周后，与同周龄pH7.0饮用水组SD大鼠相比，尽管心、肝、脾等个别脏器系数具有统计学差异，但其仍处于大鼠脏器系数正常值波动范围内。

2.3不同pH值饮用水对SD大鼠血清生化指标的影响

分别给予不同pH值饮用水饲养4周～12周后，与同周龄pH7.0饮用水组SD大鼠相比，尽管某些时间点GLU、CREA、UREA、LDL-C等个别生化指标具有统计学差异，但其仍处于大鼠生化指标正常值波动范围内（表2）。

表1　不同pH值饮用水对SD大鼠体质量及脏器系数的影响

表2　各组SD大鼠生化指标比较

（续表2）

2.4不同pH值饮用水对SD大鼠血清生化指标的影响

3　讨论

饮水是SPF级动物饲养中引起微生物污染的一个重要环节。一般饮水的pH值调到3.0时，可有效抑制细菌的增殖。研究表明，小鼠饮用pH2.5左右的酸化水能解决绿脓杆菌感染问题。国内一些学者也提出饮用pH2.0～2.5的酸化水以防止SPF小鼠绿脓杆菌感染［5］。樵星芳等［6，7］研究发现，高压灭菌水存放第2日即可长菌，而酸化灭菌水（pH2.5～3.0）存放7 d间，细菌检测均为阴性，说明小鼠饮水经过一定的酸化处理后利于存放，且随着酸度增加，饮水中可检出的细菌数亦随之减少，可检出细菌的时间亦延后，提示小鼠饮水经过一定程度酸化处理后，对抑制细菌的增殖有一定效果。同时研究表明，Wistar大鼠和ICR、KM小鼠长期饮用灭菌酸化水对其血液细胞学以及脾、胸腺等免疫脏器指标并无明显影响［7-10］。

本研究选取3周龄离乳大鼠，分别给予不同pH值（2.0～9.0）的饮用水，饲养4～12周，观察其对SD大鼠生长发育及生理功能的影响。结果表明，不同pH值饮用水组同周龄SD大鼠体质量之间无显著性差异。同时，各组大鼠心、肝、脾、肺、肾等主要脏器系数以及血糖、血脂、肝功能、肾功能等血液生化指标的变化亦在正常值范围内。由此说明，pH2.0～9.0饮用水对SD大鼠的脏器系数和生化指标无显著性影响。但不同pH值饮用水对动物的组织学、遗传学、免疫学和繁殖性能的影响尚有待进一步研究。

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Q95-33

1674-5817（2015）01-0061-04

10.3969/j.issn.1674-5817.2015.01.013

2014-08-29

浙江省科技厅院所专项（2012F30026）

陈文文（1982-），男，助理研究员，研究方向: 实验动物学， E-mail: cww0428@163.com

吴旧生（1969-），男，副教授，研究方向: 实验动物医学， E-mail: wujosh@zju.edu.cn