辽宁省部分地区种猪氟烷基因检测统计与分析

王春艳，郑旭，高月，宋恒元

（辽宁省畜牧科学研究院，辽宁辽阳111000）

辽宁省部分地区种猪氟烷基因检测统计与分析

王春艳，郑旭，高月，宋恒元

（辽宁省畜牧科学研究院，辽宁辽阳111000）

为消灭种猪氟烷敏感基因，减少其对养猪业的危害，降低劣质肉造成的经济损失，本文对2011～2013年辽宁部分地区种猪氟烷敏感基因进行检测。本试验采用PCR-RFLP法，共检测样品14 392个，检测出的阳性种猪1 518全部淘汰。经统计，长白、大白、杜洛克氟烷基因阳性率分别为9.11%、10.15%、10.78%，其中种公猪氟烷基因阳性率分别为13.62%、11.19%、12.61%，种公猪的阳性率都比大群猪的氟烷基因阳性率高。

氟烷基因；辽宁地区；统计与分析

随着人们生活水平的不断提高,猪肉品质受到了市民广泛的关注，养猪生产者不仅需要增加猪肉的产量，还必须不断提高猪肉的品质,才能获得较好的经济效益，氟烷敏感基因是目前世界公认的影响猪肉品质的主效基因之一。

氟烷基因有三种基因型：即显性纯合子（HalN HalN）、杂合子（HalN Haln）和隐性纯合子（Haln Haln），显性纯合子和杂合子表现为氟烷阴性，隐性纯合子（nn基因型）表现为氟烷阳性。隐性纯合子是导致猪应激综合征发生的主要原因，猪应激综合征也称为恶性高热综合征，它是指在非特异性的应激因子（如运输、转栏、高温、预防注射、配种等）作用下，猪发生呼吸急促、心跳亢进、体温升高、肌肉僵直、后肢呈现痉挛性收缩，并伴随突然死亡的一种征候群。这种猪死后往往出现PSE肉，PSE（pale,soft,exudative）肉是指肉色苍白、质地柔软、表面渗水的猪肉，这种基因的出现给养猪生产、销售和加工造成了巨大的经济损失[1]。氟烷基因杂合子猪在生产性能和体形外貌上具有杂合优势，在种猪选育时，由于氟烷敏感基因阳性猪体型好、瘦肉率高，很容易被留作种用[2]。随着我国高瘦肉率猪种的引进和使用，并且猪的品种选育把胴体瘦肉率作为一项主要经济指标进行选择时，这必然会导致Haln基因频率的上升。

因此，在种猪品种选育中如何消除氟烷有害基因是一个必须考虑的问题。现代分子生物学技术的发展，可以使得从分子水平直接测定猪的氟烷基因型成为可能[3]。为消灭种猪氟烷敏感基因，减少其对养猪业的危害，降低劣质肉造成的经济损失，本试验采用PCR-RFLP法检测氟烷敏感基因，检测出的杂合子（HalN Haln）和纯合子（Haln Haln）种猪全部淘汰。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验样本辽宁省畜牧科学研究院氟烷基因检测实验室接收的各种猪场送检的猪耳组织样本。

1.1.2 试验试剂北京百泰克生物技术有限公司生产的细胞/组织基因组DNA提取试剂盒（离心柱型）、蛋白酶K、2×Power Taq PCR MasterMix，TaKaRa生产的上下游引物、琼脂糖；其他为国产分析纯试剂。

1.1.3 试验设备美国EPPENDOF生产的5430R冷冻离心机，美国ABI生产的2720PCR仪，上海培清生产的JS-680D凝胶成像仪，北京六一生产的DYY-6C电泳仪。

1.2 试验方法PCR-RFLP技术检测法，DNA提取采用试剂盒提取法。

2 氟烷敏感基因的检测结果统计与分析

2.1 所有样品检测结果统计2011～2013年共收到7个市/县107个种猪场或种公猪站送检的14 392个样品，经检测，氟烷基因杂合猪1 456头，占10.12%，氟烷基因阳性纯合猪58头，占0.40%，氟烷基因阳性猪占送检猪总数的10.52%。

2.2 重点种猪场氟烷基因阳性率的统计结果见表1。

表1 50头以上种猪场氟烷基因阳性率分布Table1 More than 50 head of a pig halothane gene distribution of positive rate

由表1可知，三年中检测50头以上重点种猪场共79家，各家种猪场氟烷基因阳性率相差很大。有的种猪场氟烷基因阳性率非常高，其中氟烷基因阳性猪占送检猪百分率达20%以上的猪场有13家。有的种猪场氟烷基因猪阳性率很低，低于5%的有40家，其中无氟烷基因阳性猪场有27家。

2.3 不同品种氟烷基因阳性率统计结果见表2。

由表2可知，辽宁省种猪品种主要有长白、大白和杜洛克，经进一步统计，送检样品为纯种猪且品种明确的样品9 982个，其中氟烷基因阳性猪978头，阳性率9.80%。种公猪845头，氟烷基因阳性猪105头，阳性率12.43%。长白、大白、杜洛克氟烷基因阳性率分别为9.11%、10.15%、10.78%，种公猪氟烷基因阳性率分别为13.62%、11.19%、12.61%。

3 讨论及建议

3.1 氟烷基因阳性种公猪是种猪阳性率高的主要原因经统计分析，氟烷基因阳性率高的猪场多数有氟烷基因阳性种公猪存在，其阳性率高的原因主要在于自繁。

3.2 品种间阳性率相差不大，但种公猪阳性率高长白、大白和杜洛克猪的氟烷基因猪阳性率相差不大，但都比较高，而种公猪的阳性率都比大群猪（包括种公猪）的阳性率还高。因此，剔除氟烷基因阳性种公猪是重中之重的工作。

3.3 提高种猪生产者对清除氟烷基因的积极性①提高种猪生产者对氟烷敏感基因危害认识；②树立辽宁种猪和商品猪质量品牌，切实调动企业选育应激抵抗猪的积极性；③推动全国开展此项工作，为实现消灭目标创造条件。

3.4 种猪氟烷基因型检测工作应常抓不懈虽然辽宁省近几年已对省内所有纯种猪进行了检测，并对检出的氟烷基因阳性（Nn、nn）种猪做到全部淘汰[4]。全省生猪种源环节氟烷敏感基因得到有效控制，商品猪应激死亡率大幅度下降。但由于我国其他省份还没有做氟烷敏感基因的清除工作，国外引入的种猪也没有完全清除氟烷敏感基因，因此，提高对外来引入种猪检测的时效性，以降低阳性种猪在辽宁省繁育机率，辽宁地区种猪氟烷基因检测应是一项长期性的技术工作。

[1]Eikelenboom G,MinkemaD.Predietion of Pale, soft and exudative musele with a non-lethal test for halothane indueed Porcine malignant hyPerthmiasyndrome[J].Neth.J.Vet.Sei., 1974,99∶421-426.

[2]FujiiJ,OtsuK,ZorzatoFetal.IdentifieationofamutationinPorcineryanodine recePtor assoeiated with malignant hyterthermia[J].SCIENCE,1991,253∶448-451.

[3]何志平，吕学斌，陈晓辉，等.利用PCR-RFLP技术测定种猪的氟烷基因型[J].西北农林科技大学学报，2002，30（2）：48-50.

[4]李铭兴，郑丽杰，姜畔.辽宁省种猪氟烷敏感基因清除工作实施进展及对策研究[J].现代畜牧兽医，2013，2：15-17.

Detection of Swine Halothane Gene in Some Areas of Liaoning Province Statistics and Analysis

Wang Chunyan,Zheng Xu,Gao Yue,Song Hengyuan

（Animal Husbandry Institute of Liaoning Province,LiaoningLiaoyang111000）

In this paper,from 2011 to 2013 in parts of Liaoning pig halothane sensitive genes were detected，to eliminate the swine sensitive halothane gene,reduce the harm to pig industry, reduce economic losses caused by the bad meat.The experiment detected 14 392 samples,using the method of PCR-RFLP,and eliminate all 1518 positive swine.After the statistics,landrace,Large white and duroc positive rate of halothane gene were 9.11%,10.15%,10.78%respectively.The boars were 13.62%,11.19%,12.61%,which was higher than that of herd of swine.

Halothane gene;Liaoning area;Statistics and analysis

S828

B

1672-9692(2015)03-0035-03

2015-02-02

王春艳（1973-），女，大学本科，硕士学位，高级兽医师，主要从事氟烷基因检测、肉质测定、种猪精液质量检测、种猪生产性能测定等工作。