18-β甘草酸苷对慢性荨麻疹患者血清中IL-4、IL-8、IL-17和IL-22的影响

张玉刚

（河北省唐山市丰润区中医医院皮肤科　河北　唐山　064000）

·基础研究·

18-β甘草酸苷对慢性荨麻疹患者血清中IL-4、IL-8、IL-17和IL-22的影响

张玉刚

（河北省唐山市丰润区中医医院皮肤科河北唐山064000）

目的：通过对18-β甘草酸苷治疗前后慢性荨麻疹患者血清中IL-4、IL-8、IL-17和IL-22的检测，探讨甘草酸苷治疗慢性荨麻疹的作用机制。方法：用Western blot检测法分别检测20例慢性荨麻疹患者经甘草酸苷治疗前、后及20例健康对照组血清中IL-4、IL-8、IL-17和IL-22的水平。结果：慢性荨麻疹患者经18-β甘草酸苷治疗前血清中IL-4浓度（22.75±6.87pg/ml）、IL-8浓度（20.26±4.52pg/ml）、IL-17浓度（24.62±7.28pg/ml）和IL-22浓度（23.26±9.04pg/ml）高于健康对照组（P＜0.05）。治疗后，IL-4浓度（14.44±4.29pg/ml）、IL-8浓度（12.24±3.32pg/ml）、IL-17浓度（13.32±1.61pg/ml）和IL-22浓度（14.32±1.59pg/ml）较治疗前显著降低（P＜0.05），与健康对照比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：慢性荨麻疹患者的血清中存在IL-4、IL-8、IL-17和IL-22水平异于正常，提示慢性荨麻疹患者的机体免疫功能紊乱；而18-β甘草酸苷治疗后血清中IL-4、IL-8、IL-17和IL-22明显降低，提示18-β甘草酸苷可能通过影响辅助T细胞相关因子来发挥治疗慢性荨麻疹的作用。

慢性荨麻疹；18-β甘草酸苷；IL-4；IL-8；IL-17；IL-22

慢性荨麻疹属于IgE介导的I型变态反应，其发病机制是多种致病因素引起患者的皮肤、黏膜小血管扩张及渗透性增加导致的一种皮肤局限性水肿性病理反应［1］。其临床体征以风团和瘙痒为主，症状每天或几乎每天出现，一般持续至少6周。患者各个部位皮肤都可不定时地出现风团、皮疹并伴有不同程度的瘙痒，临床治疗中习惯单独应用抗组胺药物缓解症状［2-4］。18-β甘草酸苷具有多途径调节自身免疫反应，抗炎抗过敏等药理作用，因此18-β甘草酸苷已经被临床广泛应用于慢性荨麻疹的治疗［5］。为了探讨18-β甘草酸苷在慢性荨麻疹患者体内作用机理，故进行该实验研究。

1　资料和方法

1.1一般资料

选择2012年5月-2014年4月在我院皮肤科门诊治疗的慢性荨麻疹患者20例组成实验组。其中男性11例，女性9例，年龄21～65岁。平均（42.3± 10.1）岁，病程2月～10年，平均病程11个月。实验组受试者入选标准［6］：①参与实验的所有受试者几乎每天出现风团，瘙痒症状，符合慢性荨麻疹的诊断标准；②排除寒冷性荨麻疹、胆碱能性荨麻疹、人工荨麻疹及荨麻疹性血管炎等其他类型荨麻疹；③参与研究前1个月内未曾使用过皮质类固醇激素及免疫调节剂；④参与研究前1周内未曾使用过抗组胺药物；⑤受试者签署知情同意书并能遵医嘱服药。受试者排除标准：①伴有严重的心、肺、肝、肾等基础疾病的患者；②确诊为其他类型荨麻疹的患者；③当前处于妊娠及哺乳期妇女；④目前正在接受皮质类固醇激素、大环内酯类及咪唑类药物者。选取本院体检科体检者组成健康对照组20例，男10例，女10例，平均年龄（31.31±12.4）岁（18～44岁）。均无严重心、肝、肾等器官疾病及过敏性疾病史。参与研究的实验组和对照组受试者的性别、年龄基础临床资料方面比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

图1　A　实验组治疗前Western blot检测结果

图1　B　实验组治疗后前Western blot检测结果

图1　C　对照组Western blot检测结果

1.2方法

实验组患者口服复方甘草酸苷片50mg/次，每天3次，连续用药4周。分别采集20例慢性荨麻疹患者治疗前、治疗后及20例健康对照组清晨空腹血浆5ml。选择EDTA作为抗凝剂，混合10～20min后，离心20min左右（2 000～3 000r/min）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，再次离心。BCA法测定上清蛋白浓度，每孔20μl上样。采用15%SDSPAGE凝胶电泳，采用硝酸纤维素膜转膜，3%BSA封闭1h，TPBS振洗，加入IL-4、IL-8、IL-17和IL-22多克隆抗体（1:8 000），内参照加入鼠源抗β-微管蛋白单克隆抗体（1:5 000），4℃摇床孵育过夜。辣根过氧化物酶标记鼠抗（1:10 000）孵育1h后，底物化学发光试剂盒显色，扫描曝光滤膜。每组实验重复3次。采用Image-pro-plus软件分析蛋白条带灰度值，以灰度值比作为蛋白水平的定量指标。

1.3统计学方法

实验数据采用SPSS 13.0统计软件进行处理，计量数据以均数±标准差（x±s）表示，P＜0.05认为差异有统计学意义。治疗前后组间比较采用配对t检验。治疗前后与对照组比较采用独立样本t检验。

2　结果

2.1Western blot检测法结果见图1

2.2采用Image-pro-plus软件分析蛋白条带灰度值结果见表1

表1　甘草酸苷治疗慢性荨麻疹患者前后血清细胞因子变化　（例，pg/ml）

由表1可见：①治疗前IL-4水平明显高于健康对照组（P＜0.05），给予口服复方甘草酸苷片治疗后IL-4水平明显下降；治疗后IL-4水平明与健康对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；②治疗前IL-8水平明显高于健康对照组（P＜0.05），给予口服复方甘草酸苷片治疗后IL-8水平明显下降；治疗后IL-8水平明与健康对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；③治疗前IL-17水平明显高于健康对照组（P＜0.05），给予口服复方甘草酸苷片治疗后IL-17水平明显下降；治疗后IL-17水平明与健康对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；④治疗前IL-22水平明显高于健康对照组（P＜0.05），给予口服复方甘草酸苷片治疗后IL-22水平明显下降；治疗后IL-22水平明与健康对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

3　讨论

研究认为机体内T辅助细胞高通过分泌IL-17 和IL-22等细胞因子引起机体免疫功能紊乱造成患者免疫水平失衡是慢性荨麻疹发病机制的一个关键环节［7-9］。研究发现IL-4和IL-8等细胞因子表达水平升高在慢性荨麻疹过敏性疾病中起到非常关键的作用［10］。进一步的研究认为机体中多种细胞因子促使外周血IgE水平高于正常，诱发机体免疫功能紊乱从而导致机体产生一系列超敏反应的病理生理现象［11］。本次研究中发现慢性荨麻疹患者治疗前血清中IL-4、IL-8、IL-17和IL-22水平高于健康对照组。提示慢性荨麻疹患者发病期外周血中T辅助细胞高表达，导致IL-4、IL-8、IL-17和IL-22水平同时升高。所以从本实验研究提示慢性荨麻疹患者机体存在免疫紊乱导致的超敏反应。在皮肤科的临床诊疗中为了增加慢性荨麻疹的治疗效果并减少不良发应，多以抗组胺的基础上联合多种调节免疫的药物进行联合治疗，联合用药治疗方法的近期治疗效果有一定程度的提高，但是临床远期疗效还是差强人意［12-14］。因此本次研究提示治疗慢性荨麻疹应以调节免疫水平为首选治疗方案，其他抗组胺药物只用于缓解症状。

药理学研究认为18-β甘草酸苷能显著抑制正常人外周血单一核淋巴细胞产生炎性细胞因子IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ和TNF-α［15-16］。在自身免疫性疾病治疗的研究中，也发现18-β甘草酸苷具有抑制初始T细胞向Thl、Th2、Thl7细胞分化，减少其相关细胞因子合成的作用［17］。研究报道称18-β甘草酸苷是一种非常有效的免疫调节剂，它具有多途径抗炎、抗过敏、免疫双向调节、止痒、保肝的作用［18-19］。本研究发现，实验组口服复方甘草酸苷片后明显降低外周静脉血中的IL-4、IL-8、IL-17和IL-22浓度水平与健康对照组无差别。提示甘草酸苷片可以改善慢性荨麻疹患者机体的免疫紊乱抑制超敏反应的发生。

综上所述，慢性荨麻疹患者机体免疫功能紊乱为基础导致的系列超敏反应的临床病症，临床治疗宜采取口服甘草酸苷片调节慢性荨麻疹患者免疫功能至平衡状态治本，再配合抗组胺改善症状，进而提高慢性荨麻疹的治愈率，改善患者生活质量。

［1］李慧.荨麻疹及其亚型的诊断和治疗进展［J］.中国美容医学，2014，23（07）:594-597.

［2］王敏.卡介菌多糖核酸和抗组胺药物联合治疗慢性特发性荨麻疹的临床疗效观察［J］.中国美容医学，2013，22（20）: 2031-2033.

［3］梁碧华，李润祥，林路洋，等.慢性荨麻疹发作期与缓解期凝血状态、补体以及炎症标志物水平的改变［J］.中华皮肤科杂志，2014，47（1）:30-32.

［4］李朝阳，孙仁山，李菁，等.慢性荨麻疹血清中组胺释放因子（HRF）及HRF反应性IgE的检测［J］.中国皮肤性病学杂志，2014，28（5）:461-463.

［5］孙迎军.联合卡介菌多糖核酸治疗慢性荨麻疹疗效观察［J］.中国美容医学，2012，21（8下）:226-226.

［6］李玲玲，张玉杰，尹利莎，等.白介素25、33在慢性荨麻疹患者外周血中的表达及意义［J］.中华皮肤科杂志，2014，47（4）: 284-286.

［7］林慧，丁晓娟.针刺联合药物治疗慢性荨麻疹56例的临床观察［J］.中国美容医学，2011，20（z4）:124-124.

［8］谭少萍，廖家，吴昌辉，等.慢性荨麻疹患者外周血白介素17和白介素22的检测［J］.中国美容医学，2010，19（z1）:17-18.

［9］覃吉高.盐酸左西替利嗪胶囊、复方甘草酸苷联合治疗慢性荨麻疹临床疗效观察［J］.中国美容医学，2011，20（z5）: 285-285.

［10］王高峰，王雪连，刘芳，等.皮肤屏障相关免疫细胞的研究进展［J］.医学研究生学报，2012，25（2）:195-199.

［11］沈成龙，何宋兵，赵华，等.辅助性T细胞17相关细胞因子与结肠癌的研究进展［J］.医学研究生学报，2013（4）:402-406.

［12］鲍文华，梁建合，李树民，等.Th17细胞和IL-23/IL-17轴在肺纤维化大鼠肺组织动态表达的意义［J］.医学研究生学报，2014，27（3）:240-244.

［13］崔存柱.中西医结合治疗对慢性荨麻疹患者血清IL-8和IL-17的影响［J］.中国基层医药，2014，21（8）:1164-1166.

［14］唐路得，张沿君，高晓萌，等.幽门螺杆菌感染与慢性荨麻疹相关性的Meta分析［J］.中华流行病学杂志，2014，35（3）: 317-321.

［15］冯会兰，唐世清.依匹斯汀与西替利嗪联合雷尼替丁治疗老年慢性荨麻疹疗效比较［J］.中华老年医学杂志，2014，33 （1）:77-78.

［16］苏彤，陈宏，李璐，等.寻常性银屑病患者外周血白介素17、白介素23 mRNA的表达及与病情相关性研究［J］.中华皮肤科杂志，2014，47（4）:278-281.

［17］喻泸，王华，罗晓燕.他克莫司及金黄色葡萄球菌肠毒素B对特应性皮炎外周血Th17细胞的影响［J］.中华皮肤科杂志，2014，47（2）:120-123.

［18］马蕾，薛海波，管秀好，等.特应性皮炎患者外周血和皮损miR-155的表达及其与Th17细胞相关性研究［J］.中华皮肤科杂志，2014，47（1）:15-18.

［19］高宇，陈仕胜，马新华，等.特应性皮炎患儿外周血Th17细胞与CD4+CD25+T细胞失衡的研究［J］.中华皮肤科杂志，2012，45（6）:415-417.

编辑/张惠娟

Effect of glycyrrhizin on chronic urticaria patients in IL-4，IL-8，IL-17 and IL-22

ZHANG Yu-gang
（Department of Dermatology，Chinese Medicine Hospital of Fengrun District，Tangshan 064000，Hebei，Chinese）

Objective BasedonmeasurementofchronicurticariapatientsserumIL-4andIL-8，IL-17and IL-22 before and after 18 beta glycyrrhizin in the treatment of glycyrrhizin mechanism on treating chronic urticaria.Methods The levels of serum IL-22，IL-8，IL-17 and IL-4 in 20 cases of chronic urticaria were detectedbyblotWesternassayand20casesofhealthycontrols.Results Inpatientswithchronicurticaria by 18 beta glycyrrhizin treatment IL and serum concentrations of IL-4（22.75±6.87pg/ml），IL-8 concentration（20.26±4.52pg/ml），IL-17 concentration（24.62±7.28pg/ml）and IL-22 concentration （23.26±9.04pg/ml），higherthanthehealthycontrolgroup（P＜0.05）.Afterthetreatment，concentrationofIL-4was（14.44±4.29pg/ml），IL-8concentration（12.24±3.32pg/ml），IL-17concentration（13.32±1.61pg/ml），IL-22 concentration（14.32±1.59pg/ml），treatment significantly decreased（P＜0.05），and healthy control differencenostatisticalsignificance（P＞0.05）.Conclusion Theserumofpatientswithchronicurticariaof IL-4andIL-8，IL-17andIL-22levelsdifferentfromnormal，suggestingthatchronicurticariapatientswith thedisorderofimmunefunctioninthebody；and18betaglycyrrhizicacidglycosidestreatmentofserumIL-4 and IL-8，IL-17 and IL-22 reduced obviously，18 beta glycyrrhizin tips may through the influence of T helpercellrelatedcytokinestoplayaroleintreatmentofchronicurticaria.

chronic urticaria；glycyrrhizin；IL-4；IL-8；IL-17；IL-22

R758.24

A

1008-6455（2015）16-0029-03

2015-05-26

2015-07-21