急性冠脉综合征患者IL-35与hs-CRP、IL-18相关性研究

陈恩平，杜丽根，邱 健，张 园

（1.龙岗区第二人民医院，深圳 518112;2.广州军区广州总医院，广州 510010）

急性冠脉综合征患者IL-35与hs-CRP、IL-18相关性研究

陈恩平1，杜丽根1，邱 健2*，张 园2

（1.龙岗区第二人民医院，深圳 518112;2.广州军区广州总医院，广州 510010）

目的 通过对入选患者行IL-35、hs-CRP、IL-18指标的检测，评价这些指标在急性冠脉综合征（ACS）患者中的变化及相关性。方法 对入选的128例行冠脉造影患者，根据冠脉造影结果及临床类型分为对照组、稳定心绞痛组（SAP），不稳定心绞痛组（UAP）和急性心肌梗死（AMI）组。酶联免疫法检测IL-35、hs-CRP、IL-18指标。结果 与对照组和SAP组比较，UAP、AMI组IL-35水平明显下降，hs-CRP、IL-18水平明显升高;与UAP组比较，AMI组IL-35水平明显下降，hs-CRP、IL-18明显升高，差异均有统计学意义（P＜0.05）。IL-35与Hs-CRP、IL-18进行相关性分析发现，校正多种危险因素后，ACS组中血浆IL-35表达水平仍与hs-CRP、IL-18呈负相关（r1'=－0.482，r2'=－0.365＜0.01）。结论 IL-35与hs-CRP、IL-18密切相关，提示促炎和抗炎失衡促进了ACS的发生发展，联合多指标检测有利于早期对ACS进行危险分层，减少冠脉事件的发生。

急性冠脉综合征;白介素-35;超敏C反应蛋白;白介素-18

急性冠脉综合征（acute coronary syndromes，ACS）严重威胁人类的健康，炎症在其发生发展过程中发挥着重要作用。近年来，抗炎细胞功能失调、抗炎因子不足在冠心病的发病机制中成为研究的热点之一。IL-35是一种新型抗炎因子，Kempe等［1］研究发现，IL-35在颈动脉的不稳定斑块中强阳性表达，提示IL-35也参与了ACS的发病过程。超敏C反应蛋白（hs-CRP）是经典的炎症指标，与冠脉事件的发生密切相关［2-3］。Ragino Y I等［4］研究发现IL-18是良好的促炎介质，参与了动脉粥样硬化的发生发展。因此，本文研究的目的是探讨IL-35、hs-CRP、IL-18在急性冠脉综合征患者中的变化及相关性，旨在探讨炎症和抗炎失衡在急性冠脉综合征中的发病机理，为临床诊疗提供临床依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 纳入对象是2007年10月—2008年9月在心内科行冠脉造影患者128例，平均年龄（62.02±8.96）岁。所有患者在行冠脉造影前均接受hs-CRP、IL-18及IL-35的检测。根据冠脉造影的结果:冠状动脉狭窄≥50%的患者诊断为冠心病（coronary heart disease，CHD）组;冠脉无狭窄为冠脉对照组。根据患者临床表现、连续心电图改变、心肌酶谱及冠状动脉造影结果，128例患者中不稳定型心绞痛（UAP）34例、急性心肌梗死（AMI）32例、稳定型心绞痛（SA）32例，冠脉造影正常者30例作为对照组。根据WHO分型标准，不稳定型心绞痛包括以下亚型:初发劳力型心绞痛，恶化劳力型心绞痛，静息心绞痛，梗死后心绞痛，变异型心绞痛。急性心肌梗死的诊断标准:1）典型的心肌缺血性胸痛。2）心电图相邻2个或多导联ST段抬高，在肢体导联≥0.1 mV，胸部导联≥0.2 mV。3）心肌酶升高。符合上述3个条件中的2个条件，即诊断为急性心肌梗死。稳定型心绞痛诊断标准:持续时间短暂（一般＜30 min），休息或予硝酸酯制剂后缓解，病程稳定，慢性稳定性心绞痛1个月以上。排除甲状腺功能异常、自身免疫性及炎症性疾病、肿瘤、肝肾疾病、急慢性感染、贫血和手术创伤及其他代谢异常疾病。

1.2 治疗方法 详细收集记录每一研究对象的临床资料，包括患者的一般情况，如入院时收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、脉压（PP）、年龄、性别、吸烟史、确诊的高血压病史、糖尿病史。高血压标准为收缩压≥140 mmHg，或舒张压≥90 mmHg，或服用降压药者;糖尿病标准为空腹血糖≥7.0 mmol/L，或餐后血糖≥11.1 mmol/L，或服用降糖药物。吸烟史为每天至少吸1支，并持续1年以上。

1.3 观察指标 生化指标检测:所有患者在行冠状动脉造影前采集空腹血标本，应用标准方法测量。血液指标:血糖、三酰甘油（TG）、胆固醇（CHO）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）等。生化标志物指标检测:入院后第2天清晨空腹抽患者静脉血2 mL，EDTA抗凝，3 000 r/min离心15 min，－70 ℃保存，ELISA 测定IL-35、hs-CRP、IL-18。

1.4 统计学方法 采用SPSS 17.0分析软件，计数资料采用χ2检验;计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用t检验或方差分析。各组间差异采用单因素方差分析及多个样本均数间的两两比较，采用q检验。相关性分析采用Spearman相关分析，双侧P＜0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 各组一般资料比较 见表1。

表1 各组一般资料比较（±s）

表1 各组一般资料比较（±s）

注:与对照组比较，#P＜0.05

项 目 对照组（n=30） SAP（n=32） UA（n=34） AMI（n=32）年龄/岁 60.90 ±8.20 62.13 ±10.23 62.75 ±7.02 62.85 ±7.52吸烟/n（%） 7（22.2） 15（46.8）# 18（52.9）# 18（56.3）#高血压/n（%） 14（45.7） 17（53.1） 17（50.0） 17（53.1）糖尿病/n（%） 9（30.6） 11（34.4） 12（35.3） 15（46.8）SBP/mmHg 135.42 ±10.21 143.27 ±10.17 146.81 ±11.31 147.80 ±9.25 DMP/mmHg 70.23 ±6.23 74.25 ±12.56 74.21 ±8.65 74.56 ±8.64 TG/（mmol/L） 2.13 ±0.82 2.83 ±1.52 2.93 ±1.03 2.98 ±1.02 CHO/（mmol/L） 3.94 ±1.02 4.58 ±1.25 5.28 ±1.23 5.82 ±1.05 LDL-C/（mmol/L） 3.28 ±0.85 4.28 ±1.12 4.90 ±0.86 5.12 ±0.78 HDL-C/（mmol/L）1.32 ±0.25 1.20 ±0.26 1.07 ±0.18 1.05 ±0.12

2.2 各组生化标志物指标比较 见表2。

表2 各组生化标志物指标比较（±s）

表2 各组生化标志物指标比较（±s）

注:与对照组比较，#P＜0.05;与对照组及SAP组比较，△P＜0.05;与UAP组比较，▲P＜0.05

组 别 例数 IL-35/（mmol/L）hs-CRP/（mg/L） IL-18/（ng/L）对照组 30 108.32 ±31.02 3.26 ±1.05 162.23 ±70.22 SAP 组 32 82.26 ±32.09# 3.53 ±1.12# 229.20 ±82.00#UAP 组 34 64.73 ±31.23#△ 8.76 ±1.23#△ 302.25 ±79.23#△AMI组 32 36.03 ±29.84#△▲ 12.56 ±2.03#△▲ 369.52 ±72.26#△▲

2.3 直线相关分析 将选入的患者IL-35与hs-CRP、IL-18做直线相关分析，结果呈相关性（R分别为R1= －0.523，R2= －0.415，P ＜0.01）。在控制了吸烟、高血压病史、糖尿病史等多种动脉粥样硬化危险因素后，这种相关性仍然存在（r1'=－0.482，r2'= －0.365，P ＜0.01）。见表3。

表3 IL-35相关性分析

3 讨论

ACS是一种以急性心肌缺血、斑块的破裂为主要表现的临床综合征。Virmani等［5］研究发现:约60%的猝死病人是由于斑块破裂血栓闭塞血管所引起。目前文献报道，IL-35［6-7］作为一种新型抗炎因子，参与了ACS的作用机制。本文通过观察IL-35与hs-CRP、IL-18在不同冠脉病变程度的变化及相关性，探讨炎症反应和抗炎失衡在冠心病的发病机制，为临床诊疗提供依据。

炎症反应与心血管事件密切相关，其在心血管诊疗中的作用日益受到重视［8-9］。Ridker等［10］报道，hs-CRP是新的冠心病独立的预测指标，其每增加5 ms/L，发生ACS概率即增加1.7倍，hs-CRP水平持续升高且＞200 ms/L者，其AMI后心脏破裂的发生率非常高。本研究发现，与对照组和SAP组比较，UAP组和AMI组hs-CRP、IL-18明显升高，差异有统计学意义，提示hs-CRP、IL-18可能与ACS中斑块的不稳定性密切相关，促进了易损斑块的形成与破裂，机制可能是ACS期hs-CRP能激活经典的补体途径，释放炎症介质，促进炎症细胞的黏附聚集，同时启动外源性凝血途径，加强局部血栓的形成［11］。IL-18是一种重要的促炎介质，能促进巨噬细胞产生IL-6、TNF等炎症因子，同时还能抑制血管内皮细胞增殖，诱导细胞间黏附分子表达，介导炎症反应，促进动脉粥样硬化发生发展［12-13］。两者相互作用，共同参与了ACS的发生与发展。

炎症反应中大量炎症细胞产生，炎症介质的释放促进了动脉粥样硬化的发展，而抗炎细胞数量减少和抗炎因子水平的下降可能进一步加剧了ACS的进展。IL-35是一种新型的细胞因子，是由一个α链（IL-12a）p35和β链Ebi 3组成的异源二聚体蛋白，由T细胞（treg细胞）分泌，具有调节免疫功能，能抑制IL-17等炎症因子的表达，抑制炎症反应［14-15］。Lin Y等［16］研究发现，血浆IL-35水平降低与冠状动脉疾病的左心室射血分数密切相关。本研究发现，与对照组和SAP组比较，UAP、AMI组IL-35水平明显下降;与UAP组比较，AMI组IL-35水平明显下降，差异均有统计学意义（P＜0.05），结果提示，IL-35水平的下降，抗炎功能减弱，促进了ACS的发展。本研究对IL-35与Hs-CRP、IL-18相关性分析发现，校正多种危险因素后，ACS组中血浆IL-35表达水平仍与hs-CRP、IL-18呈负相关。提示当ACS在各种危险因素作用下，可使血管内皮功能受损，单核细胞黏附聚集，吞噬脂质，形成泡沫细胞。同时血管内单核巨噬细胞等各种炎症细胞浸润，可释放基质蛋白酶，降解细胞基质，破坏内弹力膜，同时降解血管基底膜，加速炎症细胞的跨膜转移，破坏斑块的稳定性。ACS患者机体内大量炎症因子存在，Treg功能细胞减少，IL-35分泌减少，促炎和抗炎失衡，促进了ACS的进展。

本研究提示，IL-35、hs-CRP、IL-18与ACS关系密切，联合这些指标的检测，有利于早期发现ACS及进行危险分层，减少冠脉事件的发生。本研究样本量相对较少，有待于更大样本量进行证实。

:

［1］KEMPE S，HEINZ P，KOKAI E，et al.Epstein-Barr Virus-Induced gene-3 is expressed in human atheroma plaques［J］.A-merican Journal of Pathology，2009，175（1）:440-447.

［2］ASERI Z A，HABIB S S，ALHOMIDA A S，et al.Relationship of high sensitivity C-reactive proteinwith cardiac biomarkers in patients presenting with acute coronary syndrome［J］.Journal of the College of Physicians and Surgeons-Pakistan:JCPSP，2014，24（6）:387-391.

［3］MLAKAR P，SALOBIR B，COBO N，et al.The effect of Short-Term cardiac rehabilitation after acute myocardial infarction on High-Sensitivity C-Reactive protein［J］.Metabolic Syndrome and Related Disorders，2014，12（2）:149-155.

［4］RAGINO Y I，CHERNYAVSKI A M，POLONSKAYA Y V，et al.Activity of the inflammatory process in different types of unstable atherosclerotic plaques［J］.Bulletin of Experimental Biology and Medicine，2012，153（2）:186-189.

［5］VIRAMANI R，KOLODGIE F D，BURKE A P，et al.Lessons from sudden coronary death:a copprehensive morphological classification scheme for atherosclerotic lesions［J］.Arteriosclerosis，Thrombosis，and Vascular Biology，2000，20（5）:1262-1275.

［6］BETTINI M，CASTELLAW A H，LENNON G P，et al.Prevention of autoimmune diabetes by ectopic pancreatic beta-Cell expression of interleukin-35［J］.Diabetes，2012，61（6）:1519-1526.

［7］JIN Erhui，WANG Chenfang，HU Qianqian，et al.The regular distribution and expression pattern of immunosuppressive cytokine IL-35 in mouse uterus during early pregnancy［J］.Romanian Journal of Morphology and Embryology，2014，55（4）:1353-1361.

［8］KATZ P，LEITER L A，MELLBIN L，et al.The clinical burden of type 2 diabetes in patients with acute coronary syndromes:Prognosis and implications for short and long-term management［J］.Diabetes＆ Vascular Disease Research:Official Journal of the International Society of Diabetes and Vascular Disease，2014，11（6）:395-409.

［9］WEHLING M.Non-steroidal anti-inflammatory drug use in chronic pain conditions with special emphasis on the elderly and patients with relevant comorbidities:management and mitigation of risks and adverse effects［J］.European Journal of Clinical Pharmacology，2014，70（10）:1159-1172.

［10］RIDKER P M，HENNEKENS C H，BUFING J E，et al.C-reacllve protein and other nlRrkers of inflammation is the prediction of cardiovascular disease in women［J］.N EngI J Med，2000，342（12）:836-843.

［11］ZHANG Yachen，TANG Yong，CHEN Yu，et al.Oxidized Low-Density lipoprotein and C-Reactive protein have combined utility for better predicting prognosis after acute coronary syndrome［J］.Cell Biochemistry and Biophysics，2014，68（2）:379-385.

［12］SHIMIZU K，SHIMOMURA K，TOKUYAMA Y，et al.Association between Inflammatory Biomarkers and Progression of Intracranial Large Artery Stenosis after Ischemic Stroke［J］.Journal of Stroke ＆ Cerebrovascular Diseases，2013，22（3）:211-217.

［13］KAPOOR D，TRIKHA D，VIJAYVERGIYA R，et al.Conventional therapies fail to target inflammation and immune imbalance in subjects with stable coronary artery disease:A systembased approach［J］.Atherosclerosis，2014，237（2）:623-631.

［14］CHATURVEDI V，COLLISON L W，GUY C S，et al.Cutting edge:Human regulatory T cells require IL-35 to mediate suppression and infectious tolerance［J］.Journal of Immunology，2011，186（12）:6661-6666.

［15］CHEN Chen，DENG Yanhan，CHEN Huilong，et al.Decreased concentration of IL-35 in plasma of patients with asthma and COPD［J］.Asian Pacific Journal of Allergy and Immunology，2014，32（3）:211-217.

［16］LIN Y，HUANG Y，LU ZS，et al.Decreased plasma IL-35 levels are related tothe left entricular ejection fraction in coronary artery diseases［J］.PLoS one，2012，7（12）:e52490.

Correlation Research on the changes of patients with Acute Coronary Syndrome between IL-35，hs-CRP and IL-18

CHEN Enping1，DU Ligen1，QIU Jian2*，ZHANG Yuan2
（1.The Second people's Hospital of Longgang Distric in Shenzhen Department of Cardiology，Shenzhen 518112，China;2.Guanzhou General Hospital of Guangzhou Military Command，Guangzhou 510010，China）

ObjectiveBy investigating the changes of IL-35，hs-CRP，IL-18 in patients with selected patients，to evaluae the changes and correlation of the indexes and discuss the 1mechanism in the development of ACS.MethodsOne hundred and twentty-eight patients given coronary angiography and clinical diagnosis were divided into four groups:control group，stable angina group，unstable angina group and the acute myocardial infarction.detection of IL-35、hs-CRP、IL-18 index were detected by Enzyme linked immunosorbent assay.ResultsThe level of IL-35 were significantly lower than that in control group and SAP group，however，hs-CRP，IL-18were significantly higher.Compared with SAPgroup，The level of the IL-35 were lower in the group of UAPgroup and AMI group.hower，the level of the hs-CRP，IL-18 were higher.The level of the hs-CRP，IL-18 in the AMI group.were higher The differences were statistically significant（P ＜0.05）.Partial correlation analysis adjusted for sex，age，diabetes mellitus，high blood pressure and smoking factors，the expression of IL-35 in plasma in coronary heart disease group level still negative correlated with hs-CRP and IL-18（r1'=－0.482，r2'= －0.365，P ＜0.01）.ConclusionIL-35 and hs-CRP，IL-18 are closely related，suggesting that the imbalance between proinflammatory and anti-inflammatory and promote the occurrence and development of ACS，the joint detection of multiple indicators is beneficial for early risk stratification of ACS，reduce the incidence of coronary events.

acute coronary syndrome;interleukin-35;high sensitivity C reactive protein;interleukin-18

R256.22

A

2095－6258（2015）04－0841－03

10.13463/j.cnki.cczyy.2015.04.069

广东省科技计划项目（2012B031800418）;深圳市龙岗区科技项目（201406083001019）。

陈恩平（1972－），男，副主任医师，主要从事冠心病的发病机制与诊疗研究。

邱 健，主任医师，博士研究生导师，电子信箱－754488242@qq.com

2014－12－31）