HPLC法测定舒心安神胶囊中栀子苷的含量

王 丽，裴妙荣，李慧峰

（山西中医学院，山西太原030024）

舒心安神胶囊由栀子、生地黄、酸枣仁等10味中药组成，按一定比例粉碎成细粉，混匀，装胶囊，即得。本品为硬胶囊，内容物为浅黄棕色粉末，气微香，味微甘、稍苦。具有养心安神敛汗、泻火除烦养阴、滋阴润燥补血的作用，临床上用于健忘失眠、心烦易躁等症。本实验在文献［1-4］的基础上制定了胶囊中栀子苷含量测定的方法，为药品的生产和检验提供依据，保障临床用药的质量可控。

1 实验材料

Waters 2695（美国）高效液相色谱仪，色谱柱为Diamonsil C18柱（4.6 mm×150 mm）；2998紫外检测器。栀子苷对照品（含量测定用，批号：110749-200714）购自中国药品生物制品检定所；流动相所用甲醇为色谱纯，水为双蒸水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Diamonsil C18（4.6 mm×150 mm）；流动相：甲醇-水（19∶81）；流速：1 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：238 nm。在以上色谱条件下，栀子苷峰保留时间为20 min。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含50 μg的溶液，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品内容物0.8 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，称定重量，超声处理30 min，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。

2.2.3 阴性对照溶液的制备 取不含栀子的内容物0.8 g，按供试品溶液的制备方法制备，即得。

2.3 阴性对照试验

按处方药的比例取缺黄芪的阴性样品，按工艺制成空白制剂，再按供试品溶液制备方法制成空白溶液，测定。结果在栀子苷峰相应的保留时间处未显吸收峰，表明峰中其他成分对测定无干扰。

在上述条件下栀子苷与样品中其他组分能基线分离，阴性对照无干扰。栀子苷对照品溶液、供试品溶液和阴性对照液色谱图见图1～图3。

2.4 线性关系考察

精密称取栀子苷对照品1.34 mg，置10 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；再分别精密吸取0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.2 mL、1.6 mL、2.0 mL至2 mL量瓶中，得不同浓度对照品溶液，分别进样10 μL，测定峰面积积分值。以进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标作图，得一直线回归方程：Y=1567X-12685，r=0.9999，栀子苷进样量在 67 ng～1340 ng范围内与峰面积呈良好线性。

2.5 精密度试验

在上述色谱条件下，精密吸取栀子苷对照品溶液，连续进样 6次，进样量 10 μL，平均含量 53.7 μg/mL，RSD为0.84%。表明仪器的精密度较好。

2.6 稳定性试验

取同一供试品溶液（批号100526）在0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h 分别进样 10 μL，测得样品中栀子苷峰面积积分值，RSD为1.41%。表明供试品溶液在10 h内稳定。

2.7 重复性试验

按拟定的含量测定方法，对同一批样品（批号100526）分别制备6份供试品溶液，精密吸取10 μL，进样，测定峰面积积分值并计算栀子苷含量，RSD＝1.82%。表明该实验方法重复性良好。

2.8 加样回收率试验

采用加样回收法试验，精密称取已知含量的样品（批号：100526，1.48 mg/g）6 份，分别精密加入栀子苷对照品溶液（0.122 mg/mL）5.0 mL，再加甲醇20 mL按样品测定项下操作，平均回收率为99.42%，RSD为0.88%。结果见表1。实验结果表明，本方法回收率好，方法可行。

表1 加样回收率试验

3 讨 论

栀子中的栀子苷为环烯醚萜苷类化合物，具有亲水性，通常采用极性较大的甲醇、乙醇或其水溶液作为提取溶剂。本实验综合文献［5-7］所述并进行预实验，最终确定采用甲醇超声提取30 min作为提取方法，提取效率高，操作简便，保证了样品、对照品和阴性对照品的溶媒相同，减少了实验误差。

本实验通过调整流动相比例，最终确定采用流动相甲醇-水（19∶81），流速 1 mL/min，柱温 30 ℃，检测波长238 nm为色谱条件，经过线性范围、精密度、稳定性、重复性、加样回收率考察，方法简便、可行，可用于舒心安神胶囊的质量控制。

图1 栀子苷对照品色谱图

图2 供试品溶液色谱图

图3 阴性对照溶液色谱图

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