青叶绿萝组培快繁体系的研究

马艳丽 冯豹

摘 要 以青叶绿萝顶芽、茎段为材料，通过优化影响不定芽形成的因素。试验表明，MS+BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基对不定芽的诱导最好，形成的愈伤较少；在1/2MS+ 0.5%活性炭+IBA0.1 mg/L生根培养基上生根最快，根数最多。基于此，为实现绿萝组培苗工厂化生产提供技术支撑。

关键词 绿萝；顶芽；茎段；组培快繁

中图分类号：S682.36 文献标志码：B 文章编号：1673-890X（2015）21--02

绿萝（Epipremnumaureum），属于天南星科大型常绿藤本植物，生长于热带地区，常攀援生长在雨林的岩石和树干上，其缠绕性强，气根发达，可以水培种植。近几年，随着大气污染严重，青叶绿萝成为净化空气的首选花卉。同时，价格也被大众所接受，深受市场欢迎。绿萝多采用扦插繁殖；但是扦插繁殖常受母本及扦插环境限制，阿拉尔地处塔克拉玛干沙漠南缘，气候干燥，更不适合扦插繁殖。因此，采用植物组织培养方法可以解决这一难题，以青叶绿萝顶芽、茎段为外植体，建立青叶绿萝植物组培养繁体系，提高不定芽增殖量，缩短繁殖时间，提高经济效益。

1 材料与方法

1.1 外植体的建立

温室内剪取10～15 cm长青叶绿萝茎段，去叶片并切成带一个叶片的茎段。用纱布蘸自来水擦洗表面，再在自来水下冲洗20 min，然后在超净台内用75%酒精消毒8 s。将酒精倒掉，用无菌水冲洗4遍。无菌水倒掉后加入1%的次氯酸钠溶液，使材料被淹没，放在超声振荡器中分别处理8、12、16 min。最后用无菌水冲洗4遍，切成0.5～1.0 cm的茎段，接种到初代培养基上。培养间温度设置在25 ℃，每天光照16 h。

1.2 不定芽的诱导

将由第一步诱导出的顶芽或腋芽转至添加了不同激素浓度的诱导培养基上，培养基中激素种类及浓度分别是：BA1.0 mg/L+NAA0.05、BA1.0 mg/L+NAA0.1、BA1.0 mg/L+NAA0.5。所配的培养基均以MS为基础，添加蔗糖30 g/L，琼脂7 g/L，pH5.8，121℃高压灭菌20 min。转接后分别置于黑暗（报纸遮光）和正常光照两种不同的光照条件下培养30 d。

1.3 生根培养

当绿萝试管苗高度达到2～4 cm时，转至生根培养基中进行诱导生根。生根培养基为1/2MS+0.5%活性炭的基础培养基，分别添加0.0、0.1、0.5 mg/LIBA。培养条件为先暗培养10 d，后转至正常光照条件，当根数量达到2根以上、长达3～4 cm时移至温室炼苗。

1.4 驯化、移栽

温室驯化7 d，用镊子取出苗子，将根上培养基洗干净，800倍多菌灵溶液浸泡5 min，种在基质上，基质成分及比例为草炭：珍珠岩：蛭石比例2∶1∶1，温度为温室一般温度即可，第1周每天上下午各喷水2次，目的事故保证足够的水分和湿度。同时，避免直射光照射。

2 结果分析

2.1 外植体消毒

消毒12 min效果最好，95%无感染；8 min，细菌和真菌感染率较高；16 min对腋芽伤害较大，成活率较低。

2.2 不同浓度激素对青叶绿萝不定芽诱导的结果

从表1中可以看出，在诱导培养基中添加1.0 mg/LBA和0.03mg/L的NAA所形成的不定芽效果较好，数量适中、需要的时间短，并且形成的愈伤较少。添加0.01 mg/L的NAA，虽形成不定芽的数量多，但愈伤较多，不定芽较小，不利于试管苗的生根。NAA过高，则更不利于不定芽的形成，形成时间也有多延长。

2.3 光照对青叶绿萝不定芽形成的影响

实验发现，将培养间的灯管关闭，组培苗进行7～10 d的暗培养，之后进行正常光照条件培养，同最初在正常光照条件下培养的组培苗所形成的不定芽沒有较大的差异。因此，为了降低成本，可将新继代增殖的组培苗先暗培养7 d。 （下转第页）

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2.4 生根培养基筛选

通过试验得知，如表2所示，组培苗在1/2MS+IBA0.1 mg/L+0.5%活性炭生根培养基中5 d已有根形成，且根多而壮，效果最好。IBA浓度为0.5 mg/L时形成平均根数也较多，但是生根率及形成根时间较低、较长。

2.5 移栽成活率

经驯化后种植在筛选出适合的基质，草炭∶珍珠岩∶蛭石=2∶1∶1上，青叶绿萝成活率达到97%以上。

3 结语

在不定芽诱导这个时期，若短时间内获得大量且质量较好的不定芽，可选组合为BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L。当NAA浓度降低至0.05 mg/L时，不定芽的数量少且不定芽较小。NAA浓度增加至0.5 mg/L时，形成不定芽的时间较长，而且可能会影响不定芽的遗传稳定性，对保持母本的优良性状产生影响。

通过本实验发现，新继代的绿萝试管苗在无光照的暗培养状态培养7 d，与正常光照条件下试管苗增殖情况差异并不明显。南疆地区成本较大，本着降低成本的目的，可将培养间的灯管关闭，试管苗先暗培养7 d，然后再转入正常光照，同样可以达到相同的增殖效果。

虽经过一段时间的驯化，试管苗在移栽后生长仍需要保持较高的湿度，因此湿度一般控制在70%～80%，温度25℃左右。管理必须到位，每天上下午各喷2次水，这样成活率可达97%。

（责任编辑：赵中正）