川芎嗪在预防增殖性玻璃体视网膜病变中的作用及对肿瘤坏死因子水平的影响

邓亚玲　宋国祥　梁张翼

[摘要] 目的 分析川芎嗪对增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）的预防作用及对肿瘤坏死因子（TNF-α）浓度水平的影响。 方法 抽取本院2012年1月～2013年1月收治的42例PVR患者，均接受玻璃体手术，术后未给予药物干预20例（A组），行川芎嗪治疗22例（B组），抽取同期行健康体检的20例正常人群为对照组，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）对所有研究对象的TNF-α、血管内皮细胞生长因子（VEGF）进行测定并比较。比较三组细胞黏附分子-1（ICAM-1）及白细胞介素-1β（IL-1β）水平。 结果 B组患者TNF-α、VEGF分别为（157.90±53.04）、（81.24±40.23） pg/ml，明显低于A组患者的（658.81±190.56）、（108.18±74.26） pg/ml，差异有统计学意义（P<0.05）；B组与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；A、B组ICAM-1、IL-1β比较，差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 川芎嗪能明显降低TNF-α、VEGF水平，减少ICAM-1、IL-1β表达，能有效防治PVR。

[关键词] 增殖性玻璃体视网膜病变；川芎嗪；肿瘤坏死因子

[中图分类号] R971+.91 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2015）06（c）-0110-03

[Abstract] Objective To analyze the effects of ligustrazine on proliferative vitreoretinopathy（PVR） and the preventive effect of concentration level of the tumor necrosis factor （TNF-α）. Methods 42 patients with PVR in our hospital from January 2012 to January 2013 were selected，all patients underwent vitreous operation.20 cases didnt receive any drug intervention after surgery（group A），while other 22 cases were received the treatment of ligustrazine（group B）. At the same time，20 cases of normal healthy people for physical examination were chosen as control group.The TNF-α，VEGF（vascular endothelial growth factor） of all research objects were tested and compared by ELISA（enzyme linked immunosorbent assay）.In addition，compared the levels of ICAM-1（cell adhesion molecule -1） and IL-1β（Interleukin-1） of the patients among three groups. Results TNF-α and VEGF in group B were[（157.90±53.04），（81.24±40.23） pg/ml]，which were significantly lower than that [（658.81±190.56），（108.18±74.26）pg/ml] in group A，with statistical difference（P<0.05）.TNF-α and VEGF of group B compared with that of control group，with no statistical differenc（P>0.05）.The differences of ICAM-1 and IL-1β between group A and group B had statistical significance（P<0.05）. Conclusion Ligustrazine can significantly decrease the TNF-α and VEGF level，decrease ICAM-1 and IL-1 expression and can effectively prevent and treat proliferative vitreoretinopathy.

[Key words] Proliferative vitreoretinopathy；Ligustrazine；Tumor necrosis factor

增殖性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy，PVR）是指眼外伤、视网膜脱落等造成视网膜表面出现纤维细胞性增殖，多为糖尿病视网膜病变等并发症，是导致视网膜再脱离、视力减退（甚至丧失）的高危要素之一[1]。临床治疗PVR以玻璃体手术为主，虽然能有效清除病变增生组织，但难以根治PVR引起的细胞增生及发展，为此需联合药物防治[2]。动物实验表明，川芎嗪可使PVR大鼠玻璃体腔中VEGF mRNA及VEGF蛋白表达明显下降，且能有效抑制TNF-α。本文研究川芎嗪对PVR的预防作用及对TNF-α浓度水平的影响，旨在为川芎嗪治疗PVR提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

抽取本院2012年1月～2013年1月收治的42例PVR患者为研究对象，所有患者经病理、CT、眼科检查等确诊为PVR，排除严重肝肾功能障碍、精神异常、药物过敏等患者。其中术后未给予干预20例，为A组，男15例，女5例，年龄62～85岁，平均（70.3±1.4）岁。病变分级：C35例，D16例，D24例，D35例。行川芎嗪治疗22例，为B组，男16例，女6例，年龄61～86岁，平均（70.1±1.5）岁。病变分级：C36例，D17例，D24例，D35例。两组患者在年龄、病变分级等方面比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。另外选择同期行健康体检的20例正常人群为对照组，男16例，女4例，年龄60～85岁，平均（70.0±1.6）岁。

1.2 方法

本研究42例患者均接受玻璃体手术，A组患者术后未给予任何药物干预，B组患者术后行川芎嗪（大连华立德泽药业有限公司，批号20031184）治疗，40～80 mg川芎嗪+250 ml葡萄糖注射液（5%）（山西恒大制药有限公司，批号14022481）静脉滴注，1次/d，治疗7～10 d。

1.3 观察指标

采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对三组研究对象TNF-α、VEGF、细胞黏附分子-1（ICAM-1）及白细胞介素-1β（IL-1β）水平进行测定，严格按照ELISA试剂盒及其检测仪使用说明书操作。具体操作方法：清晨抽取三组研究对象3 ml静脉血，5000 r/min离心分离血清，时间为5 min，将分离的血清保存在-20℃冰箱中，待检。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0统计软件对数据进行分析，计量资料以x±s表示，采用t检验，计数资料用百分率（%）表示，采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组TNF-α、VEGF检测结果的比较

A组患者TNF-α、VEGF与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；B组患者TNF-α、VEGF与A组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；B组与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。

2.2 三组ICAM-1、IL-1β的比较

B组患者ICAM-1、IL-1β与A组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；A组患者ICAM-1、IL-1β与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）（表2）。

3 讨论

增殖性玻璃体视网膜病变发生、发展机制尚未明确，其形成主要包括炎症期、细胞增殖期及纤维化瘢痕期，其中炎症期时成纤维细胞等各细胞因子分泌的炎性因子进入玻璃体，而玻璃体中的细胞于细胞因子作用下增殖，形成膜，随后粘连增殖膜及视网膜，且收缩牵拉视网膜，最终导致牵引性视网膜脱离，形成PVR。目前临床关于该疾病研究较多，有学者认为，PVR与细胞增殖、炎症反应有关，免疫组织化学表明，PVR包括胶质细胞、视网膜色素上皮细胞（RPE）、成纤维细胞等，其中RPE从Bruch膜正常位置脱离到玻璃体、视网膜下液是PVR病理过程中的一个关键所在[3]。且PRE细胞体外培养研究发现，RPE细胞分泌的细胞因子在PRE细胞生长调节中起参与作用，提高RPE细胞自身反应性，可增强创伤愈合度[4]。

近年相关研究发现，PVR视网膜前膜中存在VEGF受体mRNA表达。实验研究表明，外伤性PVR、孔源性视网膜脱离PVR玻璃体中VEGF水平明显高于正常人群，且PVR中的VEGF表达呈上调机制，提示VEGF可能参与PVR发生、发展过程。TNF-α是一种常见有效有丝分裂因子，其浓度上升会导致胶原发生及成纤维细胞增生[5]，在组织重建中有着不可或缺的作用，是人RPE细胞低密度培养过程中最有效的有丝分裂因子。动物实验发现，TNF-α能在DNA转录上调节RPE细胞增生，主要是通过诱导c-mycDNA表达刺激RPE细胞增生[6]。李会娟等[7]通过糖尿病大鼠视网膜病变模型实验表明，川芎嗪通过降低ICAM-1、IL-1β表达，起延缓糖尿病视网膜病变病程的作用。其中IL-1β主要是通过诱导自由基释放、黏附分子表达，达到加重视网膜病变的目的；ICAM-1是免疫球蛋白家族的一名成员，通过刺激血管内皮细胞导致自由基活化、炎症反应，且血管更加通透，加重视网膜损伤。

川芎嗪作为一种常见钙离子拮抗剂，属于生物碱单体，主要从川芎中提炼而成，具有扩张血管、改善局部微循环、抑制平滑肌增生及血小板聚集等作用，在脑血管等疾病中得到广泛的应用[8-12]。临床实践表明[13-15]，川芎嗪不仅可作为心血管疾病治疗重要药物，而且在肺纤维化病变中有较强的治疗作用（钙离子拮抗）。近年相关研究表明，PVR发病机制之一可能是钙离子的变化，钙离子参与细胞活动，其在细胞内游离水平可刺激引发相关反应。川芎嗪对ADP引起的血小板聚集有良好的抑制作用，可能与膜上钙离子置换有关。动物实践表明，川芎嗪可能是通过抑制血小板活性或聚集，抑制RPE等细胞在细胞外基质黏附及细胞增生，达到防治PVR的目的。近年较多实验表明，川芎嗪能有效抑制大鼠腹腔巨噬细胞VEGF，且于大鼠腹腔黏连组腹腔内注射川芎嗪后发现，该药物能抑制组织中TNF-α表达，以减轻大鼠腹膜黏连程度。本研究B组患者治疗后TNF-α、VEGF、ICAM-1、IL-1β明显低于A组，差异有统计学意义（P<0.05），且B组与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。提示川芎嗪可能是通过抑制TNF-α、IL-1β以防治PVR，但其具体作用机制需进一步研究。

综上所述，川芎嗪主要通过降低TNF-α、VEGF、ICAM-1、IL-1β表达，达到防治PVR的目的。

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（收稿日期：2015-01-22 本文编辑：王红双）