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转化生长因子β1和白细胞介素17与变应性结膜炎相关性研究

2015-07-16李雯霖何爱群卓晓等

中国现代医生 2015年11期
关键词:结膜炎变应性鼻炎

李雯霖 何爱群 卓晓等

[摘要] 目的 探讨过敏性结膜炎患者TGF-β1和IL-17的表达水平。 方法 对我院治疗的过敏性结膜炎患者和健康人群的TGF-β1和IL-17的表达水平进行检测,探讨在各型过敏性结膜炎患者中的表达强度。 结果 过敏性结膜炎患者TGF-β1和IL-17水平高于健康人群,差异有统计学意义(P<0.01),过敏性结膜炎四个临床亚型中TGF-β1和IL-17的表达水平不一,以春季角结膜炎表达水平最高,其次为常年性过敏性结膜炎和季节性过敏性结膜炎,特应性角结膜炎表达水平最低,但四个临床亚型组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 过敏性结膜炎患者TGF-β1和IL-17 表达水平高于正常健康人群。TGF-β1和IL-17在各型过敏性结膜炎患者中表达强度不同,在春季角结膜炎表达水平明显高于其他类型。

[关键词] TGF-β1;IL-17;过敏性结膜炎

[中图分类号] R276.7 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2015)11-0069-03

[Abstract] Objective To investigate the expression level of transforming growth factor β1 (TGF-β1) and interleukin 17 (IL-17) in patients with allergic conjunctivitis. Methods TGF-β1 and IL-17 expression levels in allergic conjunctivitis patients hospitalized in the authors hospital and a healthy population were detected to explore the expression level in all types of patients with allergic conjunctivitis. Results TGF-β1 and IL-17 levels were significantly higher in patients with allergic conjunctivitis than in healthy population (P<0.01). Among the four clinical subtypes of allergic conjunctivitis, vernal keratoconjunctivitis had the highest expression level of TGF-β1 and IL-17 in spring, followed by perennial allergic conjunctivitis and seasonal allergic conjunctivitis, and atopic keratoconjunctivitis had the lowest expression level. However, the differences among the four subtypes were not significant (P>0.05). Conclusion Patients with allergic conjunctivitis have higher TGF-β1 and IL-17 expression levels than normal healthy people. TGF-β1 and IL-17 expression level vary in different subtypes of allergic conjunctivitis, vernal keratoconjunctivitis has higher expression level than other types in spring.

[Key words] TGF-β1; IL-17; Allergic conjunctivitis

变应性结膜炎是眼科门诊患者中常见的引起眼部不适的疾病,且反复发作,给患者带来极大的痛苦。因此,对此病的防治已引起眼科同仁的高度重视,但目前其发病机制仍不十分清楚,为从根本上治愈变应性结膜炎, 揭示其发生机制已成为目前眼科医师需要迫切解决的问题。转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)在炎症和组织修复等方面都具有重要的调节作用。IL-17(Interleukin-17)可以通过促进释放促炎细胞因子来放大炎症反应,从而诱导自身免疫性疾病及引起慢性变应性疾病的发生。本课题拟研究变应性结膜炎患者血清中TGF-β1和IL-17的水平,从而初步探讨TGF-β1和IL-17在其发病过程中的作用,有望为变应性结膜炎的防治开辟新的途径。

1 对象与方法

1.1研究对象

实验组200例,均为2013年6月~2014年6 月我院眼科门诊收集的变应性结膜炎患者,年龄11~46 岁,其中男78例,女122例。其中季节性变应性结膜炎、常年性变应性结膜炎、春季角结膜炎、特应性角结膜炎均为50例,分别设为实验组1、实验组2、实验组3和实验组4,另选健康人群50例为对照组,年龄15~42岁,男21例,女29例。实验组临床症状和体征符合各临床亚型的诊断标准。具有眼部奇痒、畏光、流泪、眼睑水肿、睑结膜乳头与滤泡增生、球结膜充血水肿等临床表现,并有明确的过敏原接触史,或过敏原虽不明确,但在某一特定的环境下容易发病,常伴有哮喘、鼻炎和湿疹等病史。健康对照组均为社会健康志愿者,眼部均无上述症状,检查眼病无异常,无变应性疾病家族史。因巨乳头性结膜炎多有配戴软性角膜接触镜史,临床上少见,未纳入研究对象。所有入组的研究对象近1个月内无药物应用史,全身各系统体检无异常。实验组与对照组性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05)。本文涉及的所有实验都经过患者或家属同意,并签署知情同意书。

1.2 仪器与试剂

TGF-β1和 IL-17均采用酶联免疫吸附法(ELISA)进行检测。ELISA 检测试剂盒购置于晶美生物公司。严格按照试剂盒说明书进行操作。细胞因子单位为pg/mL。

1.3 方法

1.3.1 标本采集 实验组和对照组均常规采集外周静脉血8 mL,其中2 mL用于分离血清,-80℃冻存备用。6 mL用肝素抗凝,用于分离外周血单个核细胞。

1.3.2 TGF-β1和 IL-17检测方法 使用细胞裂解仪裂解实验组和对照组细胞后,将裂解液低温高速离心,分装上清液,-20℃保存。ELISA法检测血中TGF-β1和IL-17含量。具体操作按试剂盒说明书进行,具体步骤如下:①包被:每个反应孔中加0.1 mL用包被缓冲液稀释的抗体(该抗体的蛋白质含量为1~10 μg/mL),4℃过夜,次日用洗涤缓冲液洗涤3遍,每遍3 min。②加样:在上述已包被的反应孔中加一定稀释的上清液0.1 mL置37℃孵育1 h,然后洗涤,同时做对照组。③加酶标抗体:将稀释的酶标抗体0.1 mL加入各反应孔中,37℃孵育1 h,然后洗涤。④加底物液显色:将临时配置的TMB底物溶液0.1 mL加入各反应孔中,37℃孵育30 min。⑤终止反应:将2M硫酸0.05 mL加入各反应孔中终止反应。⑥检测结果:在ELISA检测仪上波长450 nm处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值2.1倍,即为阳性。

1.4统计学处理

应用SPSS 16.0 统计学软件建立数据库进行统计分析。计量资料以均数±标准差(x±s)表示,行t检验和方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

血中TGF-β1和IL-17的表达:与对照组比较,各实验组患者血中TGF-β1和IL-17的表达均明显高于对照组,差异具有显著性(P<0.01)。四个实验组中TGF-β1和IL-17的表达水平不一,以实验组3表达水平最高,其次为实验组2 和实验组1,实验组4表达水平最低,但四个临床亚型组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

3 讨论

变应性结膜炎是一类常见的眼表过敏性疾病,其发病率高达20%[1]。该病最主要的症状是眼痒,常有结膜充血、水肿、乳头和滤泡等体征。临床多见季节性变应性结膜炎、春季角结膜炎、特应性结膜炎和常年性变应性结膜炎,而巨乳头状结膜炎因常与戴角膜接触镜史有关,在临床较为罕见。

TGF-β家族包括TGF-β的3个亚型(TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3),其中TGF-β1是调节多种细胞生长、分化和细胞周围基质环境的多功能细胞因子,存在于气道上皮、黏膜下层和平滑肌层。TGF-β1 可诱导大量炎性细胞趋化,还可延长某些免疫炎性细胞,如T淋巴细胞、巨噬细胞和中性粒细胞的存活期,同时在某些情况下TGF-β可诱导B淋巴细胞、T淋巴细胞和巨噬细胞的增殖。TGF-β对调节细胞外基质的形成起着关键作用,TGF-β的持续产生可致细胞外基质的无序沉积,从而导致组织重塑。研究发现TGF-β1 在气道重塑中起重要作用,是气道重塑中的重要细胞因子[2,3],可促进其发生及发展,从而参与哮喘的发生,其可能的发病机制是在气道损伤的修复过程,如果抗原反复刺激气道引起持续的慢性炎症,可导致TGF-β1持续过度产生,引起组织纤维化、气道重建及气道慢性阻塞[4,5]。另有研究表明,过敏性鼻炎患者鼻黏膜上皮细胞TGF-β1的免疫活性明显升高,提示TGF-β1在过敏性鼻炎的发生发展过程可能起着重要作用[6,7]。

IL-17是Th17 细胞的主要效应因子[8,9]。目前越来越多的研究证实IL-17与过敏性哮喘、过敏性鼻炎及特应性皮炎等变应性疾病的免疫炎症反应有关。有动物实验发现,在急性气道炎症中,IL-17 可以诱导气道内平滑肌细胞产生IL-8和嗜酸细胞活化趋化因子-1(eotaxin-1),这些趋化因子的大量分泌促使中性粒细胞广泛浸润。中性粒细胞在哮喘发病中扮演了重要的角色[10,11],IL-17能够分别活化NF-κB、p38促分裂原活化蛋白激酶和细胞外信号调节激酶等信号激酶,诱导大量的化学介质和炎症趋化因子产生,调节嗜酸粒细胞的功能,放大炎症反应[12]。在过敏性鼻炎组中Th17 细胞有明显的表达,IL-17 水平也明显增高。Ciprandi等[13]发现,在持续性花粉过敏鼻炎中,血清IL-17 表达水平与鼻炎严重程度呈正相关。Larsen等[14]研究证实,IL-17/Th17参与了特应性皮炎发病的免疫病理过程,包括接触过敏原时天然免疫及适应性免疫反应。总之,目前越来越多的研究证实IL-17与过敏性哮喘、过敏性鼻炎及特应性皮炎等变应性疾病的免疫炎症反应有关。

综上,本研究发现,与对照组比较,各型变应性结膜炎患者血中TGF-β1和IL-17的表达明显高于对照组,差异具有显著性(P<0.01)。因此我们推测TGF-β1和IL-17参与了变应性结膜炎的发生发展过程,但其作用机制有待我们进一步研究。

[参考文献]

[1] Gomes PJ. Trends in prevalence and treatment of ocular allergy[J]. Curr Opin Allergy Clin Immunol,2014,14(5):451-456.

[2] Halwani R,Al-Muhsen S,Al-Jahdali H,et al. Role of transforming growth factor β in airway remodeling in asthma[J]. Am J Respir Cell Mol Biol,2011,44(2):127-133.

[3] Ghanei M,Ghalejooghi NA,Nourani MR,et al. Effect of TGFβ1 and TIMP2 on disease activity in asthma and COPD[J]. Iran J Allergy Asthma Immunol,2010,9(2):79-86.

[4] Brown SD,Baxter KM,Stephenson ST,et al. Airway TGF-β1 and oxidant stress in children with severe asthma:Association with airflow limitation[J]. J Allergy Clin Immunol,2012,129(2):388-396.

[5] Yadav UC,Naura AS,Aguilera Aguirre L,et al. Aldose reductase inhibition prevents allergic airway remodeling through PI3K/AKT/GSK3β pathway in mice[J]. PLoS One,2013,8(2):e57442.

[6] Ouyang Y,Nakao A,Han D,et al. Transforming growth factor-β1 promotes nasal mucosal mast cell chemotaxis in murine experimental allergic rhinitis[J]. ORL J Otorhinolaryngol Relat Spec,2012,74(3):117-123.

[7] Jiang M,Wang Z,Wu J,et al. Changes of extracellular matrix of nasal mucosa in guinea pig model of prolonged allergic-induced rhinitis[J]. Lin Chung Er Bi Yan Hou Tou Jing Wai Ke Za Zhi,2013,27(5):255-258.

[8] Khader SA,Gaffen SL,Kolls JK. Th17 cells at the crossroads of innate and adaptive immunity against infectious diseases at the mucosa[J]. Mucosal immunology,2009,2(5):403-411.

[9] Hamada S,Umemura M,Shiono T,et al. IL-17A produced by gammadelta T cells plays a critical role in innate immunity against listeria monocytogenes infection in the liver[J]. J Immunol,2008,181(5):3456-3463.

[10] Alphonse MP,Saffar AS,Shan L,et al. Regulation of the high affinity IgE receptor (Fc epsilonRI) in human neutrophils:Role of seasonal allergen exposure and Th-2 cytokines[J]. PLoS ONE,2008,3(4):e1921.

[11] Bullens DM,Truyen E,Coteur L,et al. IL-17 mRNA in sputum of asthmatic patients:Linking T cell driven inflammation and granulocytic influx?[J]. Respir Res,2006, 7:135.

[12] Cheung PF,Wong CK,Lam CW. Molecular mechanisms of cytokine and chemokine release from eosinophils activated by IL-17A,IL-17F,and IL-23:Implication for Th17 lymphocytes-mediated allergic inflammation[J]. J Immunol,2008,180(8):5625-5635.

[13] Ciprandi G,De Amici M,Murdaca G,et al. Serum interleukin-17 levels are related to clinical severity in allergic rhinitis[J]. Allergy,2009,64(9):1375-1378.

[14] Larsen JM,Bonefeld CM,Poulsen SS,et al. IL-23 and T(H) 17-mediated inflammation in human allergic contact dermatitis[J]. J Allergy Clin Immunol,2009,123(2):486-492.

(收稿日期:2014-12-16)

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