高效液相色谱法测定蒙药巴木汤中栀子苷的含量

郭 君

(内蒙古自治区人民医院，内蒙古 呼和浩特 010017)

蒙药巴木汤(原名：巴玛音茶汤)，处方来自《蒙药验方》［1］，由诃子、毛诃子、栀子、紫草茸、茜草、紫草、香青兰、苦参、玫瑰花等9 味蒙药材组成，具有降琪素、协日，协日乌素，止痛效果的经典处方，尤其对下肢巴木病、类风湿关节炎等疗效显著。本文采用高效液相色谱法(HPLC 法)，参照中国药典2010 版一部［2］中栀子项下的含量测定方法，对本品中栀子苷的含量进行了测定，结果如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器：Alltech 426 泵uvis-200 检测器;电子天平。

1.2 试剂与试药：栀子苷对照品(110749-200410 供含量测定用)中国药品生物制品检定所提供;巴木汤(4 批样品)乌海市医院制剂室提供，批号分别为(20120708，20120712，20120715，20120718);乙腈、甲醇为色谱纯，水为高纯水，其它试剂均为分析纯。

2 实验方法及结果

2.1 色谱条件：采用Luna VP-ODS(250 ×4.6mm)柱，流动相：乙腈-水(12：88v/v)，检测波长为238nm，流速：1.0mL.min-1，柱温40℃，理论板数按栀子苷峰计算应不低于2000。

2.2 对照品溶液制备：精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1mL 含30μg 的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备：取本品粉末约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理(功率100W，频率40KHZ)20min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10mL，置25mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.4 线性关系考察：浓度为0.15mg. mL-1的栀子苷精密量取0.5、1、2、3、4 和5mL，用甲醇定容至10mL 后测定。面积对浓度进行回归分析。回归方程为：y =1437888.87x-41297.57，r=1.00，栀子苷在0.1496 ～1.4960μg 范围内与峰面积值之间呈良好线性关系，结果见表1。

表1 栀子苷的标准曲线数值表

2.5 稳定性试验：精密量取同一批供试品溶液(批号：20120708)，分别于0h、2h、4h、6h、8h、12h、24h 各进样10μL，进行测定峰面积积分值，数据分析结果表明，栀子苷RSD 值为0.61%，说明栀子苷在24h 内稳定性良好。

2.6 精密度试验：精密量取同一批供试品溶液(批号：20120708)各10μL，重复进样6 次，测定栀子苷的峰面积积分值，结果表明，栀子苷RSD 值为0.47%，说明供试品精密度良好。

2.7 重现性试验：取同一批号样品(批号：20120708)6 份，精密量取样品各1.5g，按“供试品溶液制备方法”进行操作，在上述色谱条件下分别进样，结果表明，栀子苷RSD 值为1.67%，表明供试品的重现性良好。

表2 栀子苷加样回收试验结果(n=9)

2.8 回收率试验：加样回收试验取供试品含9 份(各约0.75g)精密称定，分别精密加入浓度为0.169 mg. mL-1的栀子苷对照品3、6、9mL 用甲醇定容至25mL。测定峰面积积分值，数据分析结果表明，栀子苷回收率为101.95%，RSD值为1.14%，表明回收率很好。详见表2。

3 样品含量测定

取样品4 批(批号：20120708，20120712，20120715，20120718)，每个批号取3 份样品约1.5g，按2.3 供试品制备方法制备，分别按上述色谱条件测定含量，结果见表3。

表3 样品含量测定表

4 讨 论

4.1 线性关系考察中(r 值1.00)，栀子苷在0.1496 ～1.4960μg 范围内与峰面积值之间呈良好线性关系;精密度试验供试品峰面积积分值的RSD 为0.47%，表明供试品精密度良好;稳定性试验0、2、4、6、8、12、24h 峰面积积分值RSD 为0.61%，说明没食子酸在24h 内稳定性良好;重现性试验供试品峰面积积分值RSD 为1.67(n =6)，说明供试品重现性良好;加样回收试验9 份样品平均回收率为101.95%，RSD 值为1.14%，说明回收率很好。

4.2 此含量测定方法简便、快捷、准确度效、重现性好、回收率高，因此可以在各研究机构以后的蒙药标准化研究中广泛推广应用。

［1］内蒙古医药委员会. 蒙药验方［M］. 呼和浩特：内蒙古人民出版社，1971：253.

［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：231.