蒙药5 味铁屑胶囊剂型改进工艺研究

伊丽娜 哈斯祈鲁

(1.内蒙古医科大学蒙医药学院，内蒙古 呼和浩特 010050 2.甘肃省肃北县蒙医院，甘肃 肃北 736000)

5 味铁屑汤又称为扎格切-5 味汤［1］。此方铁屑为主的五味药组成，所以称之为5 味铁屑汤。该方剂记载于《后序医典》［2］，后传用蒙古地区，在《观者之喜》中清楚记载了成分剂量。苦、涩、辛味为主的制铁屑150g、黄柏100g、诃子150g、川楝子50g、栀子150g 配合组成，具有清热、明目等功效。主治目红肿、多眵、结膜炎、翳障、肝热引起的眼病等血希拉性眼疾、头痛等病，本方性凉，为血希拉性眼病之主方。方中铁屑性凉以清肝热、明目，为主;黄柏味苦性凉以清热，为辅;配以栀子以清血热，川楝子以止痛，诃子以调理体素、解毒。各药合用，对肝热引起的眼疼、血希拉性眼病均有良效［3］。

5 味铁屑汤治疗眼睛疾病的精选配方［4］。铁屑为蒙医常用药物之一，须将其锉削成屑末或取煅打铁时锤落的屑片，生铁屑不溶于水，经诃子汤制后则生成易溶于水的Fe2+盐，便于人体吸收［5］。黄柏为芸香科植物黄皮树Phellodendron chinense Schneid.或黄檗P.amurense Rupr.的干燥树皮。诃子为使君子科植物诃子Terminalia chebula Retz.或毛诃子Terminalia chebula Retz.Var.tomentella Kurt.的干燥成熟果实［5］。川楝子为楝科落叶禾木植物川楝Melia toosendan Sieb.et Zucc.的成熟果实［7］。栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoiaes Ellis.的干燥成熟果实［6］。

1 材料

1.1 药材：铁屑、黄柏、诃子、川楝子、栀子等由内蒙古医药公司提供，经内蒙古药品检验所蒙药科鉴定，结果均为合格。

1.2 药物及试剂：硫酸亚铁胺(A.R)，0.1%的邻二氮匪水溶液(临用新制)，1%的盐酸羟胺水溶液(临用新制)，pH=4 的醋酸—醋酸钠缓冲液，异丙醇(分析纯)，盐酸小檗碱标准品(批号：110713 -200208)，羧甲基纤维素钠(分析纯)，阿斯匹林，无水乙醇，冰醋酸，95%乙醇，盐酸，硫酸，伊文思蓝。

1.3 动物：昆明种小白鼠，体重18 ～22g，由内蒙古大学动物室提供。Wistar 种大鼠，体重180 ～200g，由内蒙古动物室提供。

1.4 仪器：760CRT 双波长紫外可见分光光度计，ZDHW 型电热套，DZTW 型电热套，RE-52A 旋转蒸发仪，电子天平，恒温水浴锅，烘干箱，离心机，动物体温计，DZTW 型调温电炉等。

2 实验方法与结果

5 味铁屑胶囊有效成分提取工艺路线设计。

2.1 炮制铁屑：诃子汤煎煮法：①制诃子汤：是子科植物诃子成熟果实粉碎后加适量水煎煮，弃去药渣的淡黄色透明液体叫诃子汤。诃子主要含鞣质(果实中含21% ～37%)，鞣质是一种复杂的多元酚类化合物，广泛地存在于植物中，在医疗上常作为收敛剂。用于止血，止泻，烧伤等，也用作生物碱及重金属中毒的解毒剂。②传统炮制方法的基础上，每100g 铁屑用诃子50g 煎取汤液300mL 煮制120min，制备后的成品呈稠糊状，无须滤干，直接取出凉干即可，以免Fe2 +随滤液遗失，影响成品质量［7］。根据上述四味药的有效成分及物理化学性质，设计3 种提取工艺路线。

工艺1：根据药材有效成分的醇溶性，黄柏、诃子、川楝子、栀子分别醇提物回收乙醇，浓缩后放置烘干箱中烘干。

工艺2：传统5 味铁屑汤的剂型是汤剂。汤剂只利用了药材的水溶性部分，假如新剂型中增加药材的醇溶性成分，药物的利用率增加，所以，设计出了4 味药，即黄柏、诃子、川楝子、栀子用乙醇提取后再用水提取更多的有效成分。把2 次的浓缩液合并后加制铁屑，制铁屑用于收膏，在烘干箱中烘干。

工艺3。工艺1 的基础上，粉碎部分黄柏(占全配方的3/4)直接加入胶囊内，这是为了充分保留黄柏的有效成分。

2.1.1 工艺1。传统炮制方法的基础上，每100g 铁屑用诃子50g，煎取汤液300mL，煮制120min，凉干后粉碎成细粉备用。把4 味药，即黄柏、诃子、川楝子、栀子按照配方称量，根据醇溶性，加10 倍量85%的乙醇回流法提取2 次，每次2h，回收乙醇，在浓缩液中加80 目筛的制铁屑细粉收膏，60℃干燥粉碎装胶囊。实验步骤如图1：

图1

2.1.2 工艺2。铁屑炮制过程同工艺一，把4 味药先醇提后水提。即黄柏、诃子、川楝子、栀子按照配方称量，根据醇溶性，加10 倍量85%的乙醇回流法提取2 次，每次2h，药渣再用蒸馏水10 倍量提取2 次，每次1.5h。醇提溶液回收乙醇，水溶液浓缩到相对密度1.0 ～1.1 之间，加乙醇使含醇量达到45%醇沉放置24h，滤液浓缩，将醇提浓缩物与水提醇沉浓缩物合并，加80 目筛的制铁屑细粉收膏，60℃干燥粉碎装胶囊。实验步骤如图2：

图2

2.1.3 工艺3：铁屑炮制过程同工艺1，其余4 味药在工艺1 的基础上，即诃子、川楝子、栀子按照配方称量，黄柏按照配方量的3/4 称量，10 倍量回流法85%乙醇提取2 次，每次2h。醇提溶液回收乙醇，浓缩成相对密度1.0 ～1.1 之间，加80 目筛配方量1/4 黄柏及制铁屑细粉收膏，60℃干燥粉碎装胶囊。实验步骤如图3：

图3

2.2 5 味铁屑胶囊工艺的药效学比较

2.2.1 5 味铁屑胶囊工艺对干酵母所致大鼠发热的解热作用。酵母混悬液制备：称取干酵母10g 置于乳钵中，逐渐加入蒸馏水磨为均匀的悬液，最后定溶为50mL(20%)，此液须于临用前配制。

大鼠于实验室环境适应3 ～4d，每日用体温计从肛内测体温1 ～2 次，实验当日每小时测体温1 次，连续2 ～3次，选取体温变化不超过0.3℃的动物供实验用。

将合格大鼠随机均分6 组，分别灌服5 味铁屑胶囊3种工艺，连续给药5d，最后1 次给药后各鼠立即于背部皮下注入20%酵母悬液10mL/kg，然后于0.5，1，2，4，6，8，10及12h 各测大鼠体温1 次，进行组间t 检验，结果如表1。

表1 5 味铁屑胶囊3 种工艺对干酵母所致大鼠发热的解热作用

图4 五味铁屑对于酵母所致大鼠体温变化的影响

5 味铁屑胶囊工艺1、2、3 对干酵母所致大鼠的解热作用实验表明，工艺1、2、3 组和阿斯匹林组及原汤剂组均有对大鼠解热作用。与空白对照组比较，阿斯匹林组有明显性差异(p＜0.001)。工艺1、2、3 组和原汤剂组有显著性差异(P＜0.05)，其中工艺三组对大鼠解热时间相对长一些。

2.2.2 5 味铁屑胶囊3 种工艺对醋酸(HAc)所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进的影响

0.6%醋酸生理盐水溶液的配制：准确吸取纯冰醋酸0.3mL，溶于生理盐水50mL 中。2.1%伊文思蓝生理盐水溶液的配制：精确称取伊文思蓝1g，溶解于生理盐水中成100mL。

3 实验

小鼠60 只均分6 组，分别灌服3 种工艺，给药7d，最后1 次给药1h 后各鼠均静脉注射1%伊文思蓝生理盐水溶液0.1mL/10kg 体重，随即腹腔注射0.6% 醋酸0.2mL/只，30min 后脱颈椎处死，剪开腹部皮肤肌肉，用6mL 生理盐水数次洗涤腹腔，吸管吸出洗涤液5mL，3000r/min 离心15min，取上清夜于590nm 波长处比色测定吸光度，进行组间t 检验。实验结果见表2、图5。

表2 5 味铁屑胶囊3 种工艺对醋酸(HAc)所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进的影响

图5 五味铁屑胶囊对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进的影响

工艺1、2、3 组和阿斯匹林组及原汤剂组均有对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性明显抑制作用。与空白对照组比较，阿斯匹林组、工艺3 组和工艺2 组有明显性差异(p＜0.001)。工艺1 组和原汤剂组有显著性差异(p＜0.05)。根据平均吸光度所知，工艺3 对醋酸(HAc)所致小鼠腹腔毛细血管通透性抑制作用比工艺2 明显。

4 5 味铁屑胶囊工艺3 提取条件的优选

4.1 5 味铁屑胶囊工艺3 的正交设计L9(34)及测定结果。铁屑炮制：每100g 铁屑用金色诃子50g，煎取汤300mL，煮制120min。处方量14 黄柏皮粉碎成细粉过80 目筛，备用。

4.2 5 味铁屑胶囊醇提部分由黄柏(3/4)、诃子、川楝子、栀子组成，其醇提溶液的出膏量受乙醇加入量、乙醇浓度、提取时间、提取次数的影响，所以正交实验设计，从3 个水平，4 个因素进行分析，共得出9 个样品。以盐酸小檗碱为测定指标进行分析，得出样品中得小檗碱含量。

表3 正交试验因素水平

4.3 提取方法。诃子6g、川楝子2g、栀子6g、黄柏3g，共计17g，按正交设计表的方案提取，将提取溶液过滤后把滤液倒入蒸发皿，在恒温水浴锅上蒸干。完全干燥后称重量，然后加入制铁屑6g 黄柏1g 均匀搅拌。

4.4 标准曲线的绘制：精密称取60℃干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品适量，加适量的无水乙醇在60℃水浴锅上加热溶解，并稀释成100ug/mL 的溶液，精密量取上述溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL 分别置25mL 容量瓶中，加0.05mol/L 硫酸溶液稀释至刻度，摇均。以0.05mol/L 硫酸溶液作参比液在375nm 波长处测定吸光度，将测得数据进行直线回归，得回归方程：结果表明溶液浓度在4 ～28ug/mL范围内，吸收度与浓度呈良好得线性关系。

图6 盐酸小檗碱标准曲线

4.5 样品含量测定。精密称取各样品0.5g，置100mL 容量瓶中，加适量无水乙醇，60℃恒温水浴锅上加热溶解10min，无水乙醇稀释至刻度，摇均。再精密吸取0.5mL 置于25mL量瓶中，加0.05mol/L 硫酸溶液稀释至刻度，摇均。以0.05mol/L 硫酸溶液作参比液在375nm 波长处测定吸光度，参照盐酸碱标准曲线算出小檗碱含量值。每个样品测3 次取均值，实验结果表明，总工艺路线为：①每100g 铁屑用金色诃子50g，煎取汤300mL，煮制120min;②处方量34 黄柏皮和处方量诃子、川楝子、栀子加12 倍量75%的乙醇提取2 次，每次2h;③处方量1/4 黄柏皮粉碎成细粉直接加入胶囊。

5 中试

按上述条件生产5 味铁屑胶囊3 批号(20070309、20070311、20070313)，休止角平均为35.5℃，崩解时限为11.9min，装量差异为0.5 ±10%g。各项指标达到了《中华人民共和国典》(2005年版)胶囊剂通则项下的各有关要求。

6 讨论

5 味铁屑汤历史悠久，且蒙医治疗“血、希拉”热引起眼病的首选方之一，临床上多用于治疗眼肿痛、血热赤眼、昏朦、眼翳等。在剂型的选择中，因从方中5 味的性味以及理化性质考虑，选择了硬胶囊剂。在选择制备工艺路线上，主要以抗炎和清热解毒两项指标，做简单药效学比较，得出5味铁屑胶囊工艺一、二都没有显著性差异，但是工艺一有许多不足之处，首先侵膏量多、一次服用量过多，有效成分较完全提取了，但是也随之增加了蛋白质、淀粉、黏液质、糖类等无效成分;其二粘性过大，不易干燥;其三、易吸潮，影响工艺的稳定性等原因排除了工艺一，因选择了工艺三。工艺条件分别用分光光度法测定醇提取部分以小檗碱为含量指标，做正交设计试验表L9(34)，结果分析，总工艺路线为：①每100g 铁屑用金色诃子50g 煎取汤300mL，煮制120min;②处方量34 黄柏皮和处方量诃子、川楝子、栀子加12 倍量75%的乙醇提取2 次，每次2h;③处方量14 黄柏皮粉碎成细粉直接加入胶囊。

5 味铁屑汤历史悠久，且蒙医治疗“血、希拉”热引起眼病的首选方之一，但传统剂型是汤剂，有较多不足之处，因此改变剂型制成胶囊剂，制定出初步的工艺指标，这不仅对其它配伍及加味方的剂型改革奠定了基础，也为广泛应用于临床开创了道路。

［1］罗布桑，吉格木德，等.蒙医方剂学［M］.呼和浩特：内蒙古人民出版社，1986，274.

［2］宇妥·元丹贡布.四部医典［M］.呼和浩特：内蒙古人民出版社，1978，1003.

［3］吉格木德丹金扎木苏.通瓦吸吉德［M］.呼和浩特：内蒙古人民出版社，1999.

［4］蒙古学百科全书.医学卷［M］.内蒙古人民出版社，2002：702，637.

［5］罗布桑.蒙药炮制学［M］.内蒙古人民出版社，1989：17，157，32.

［6］罗布桑.蒙药学［M］.民族出版社.

［7］白明纲，等.正交试验法研究蒙药铁屑炮制工艺［J］.中药材，1991，14(2).