伪狂犬基因缺失疫苗滴鼻免疫对商品猪群gE抗体的影响

祖海涛　朱连德（勃林格殷格翰动物保健（中国）有限公司，北京100027）

猪病防控

伪狂犬基因缺失疫苗滴鼻免疫对商品猪群gE抗体的影响

祖海涛朱连德
（勃林格殷格翰动物保健（中国）有限公司，北京100027）

摘要：伪狂犬病是严重危害规模化养猪的重要疾病之一。猪只一旦感染伪狂犬病毒，将会终身带毒，成为猪场的隐患。通过本次试验可以发现，如果使用合适的疫苗，并按照正确的操作方法，滴鼻免疫伪狂犬gE基因缺失疫苗，可以有效阻止野毒对商品猪群的感染，降低商品猪群的野毒阳性率。

关键词：猪伪狂犬病；滴鼻免疫；gE基因缺失疫苗

猪伪狂犬病是由疱疹病毒I型猪伪狂犬病毒引起的一种急性传染病。可导致怀孕母猪流产、产木乃伊胎、弱仔；新生仔猪大批急性死亡，伴有呕吐、腹泻及发抖、震颤和运动失调等神经症状；中大猪发生呼吸道疾病，并继发严重的细菌感染；导致猪只免疫抑制，对其他疫病的易感性增加。

猪伪狂犬病是危害养猪业最严重的传染病之一，给养猪业造成了巨大的经济损失。西方发达国家在九十年代相继制定和启动了该病的根除计划，取得了很好的成效。该病在我国广泛存在并引发巨大损失，2010年以后，我国猪场的伪狂犬野毒阳性率明显增加，我国一些省区和部分高级别大型猪场正积极启动猪伪狂犬病根除计划。

由于猪一旦感染伪狂犬病毒，将会终生带毒，所以感染猪就像一颗定时炸弹，随时都有可能向外界排毒，使周围的易感猪感染发病。在一些饲养管理条件较差的猪场，就会造成猪伪狂犬病的持续反复流行，使商品猪的成活率维持在较低水平，而呼吸道病的发病率维持在较高水平。因此在伪狂犬病病毒阳性场选择一种既可以避免母源抗体的干扰又能预防伪狂犬病毒潜伏感染的免疫程序是大家追求的目标。为此，我们在种猪企业内进行了伪狂犬gE基因缺失疫苗滴鼻免疫试验，现报告有关试验结果供大家参考。

1材料和方法

1.1猪场的选择

某规模化种猪企业，共有5个猪场，每个猪场独立运营、生产，对其中两个猪场（猪场1、猪场2，均为伪狂犬野毒阳性猪场）做有关猪伪狂犬gE基因缺失疫苗的滴鼻免疫试验。

猪场1现存栏经产母猪600头，主要饲养纯种大白、杜洛克。单点式饲养管理，自繁自养，全进全出。仔猪在21日龄断奶，断奶当天转入保育舍，70日龄从保育舍转入育肥舍。随机抽取50头母猪，采样检测结果显示伪狂犬gE抗体阳性猪有50头，伪狂犬野毒抗体阳性率达100%。猪场远离养殖高密度区，自然防疫条件较好。

猪场2现存栏经产母猪1 000头，主要饲养纯种大白、长白、杜洛克。饲养模式和猪场1相同，随机抽取50头母猪，采样检测结果显示伪狂犬gE抗体阳性猪有38头，伪狂犬野毒抗体阳性率达76%。

两个猪场主要疫苗的免疫程序相同。其中母猪：高致病性蓝耳病活疫苗（JX株）在空怀期跟胎免疫；猪瘟高效细胞疫苗普免，3次/年；某国产猪伪狂犬弱毒疫苗普免，4次/年。仔猪：14日龄免疫高致病性蓝耳病活疫苗（JX株）；28日龄、63日龄免疫猪瘟高效细胞疫苗；55日龄、90日龄免疫猪伪狂犬基因缺失疫苗（Bartha-K61株，某国产公司）。

1.2分组和采样方案

在猪场1中将同一单元产房的猪群随机分为3组，第一组仔猪出生后3天内使用某进口伪狂犬gE基因缺失疫苗滴鼻；第二组仔猪出生后3天内使用某国产伪狂犬gE基因缺失疫苗滴鼻；第三组仔猪出生后不做滴鼻免疫，作为对照组。仔猪转入保育舍、转入育肥舍时均按照一对一转栏，并保证3组猪群饲养环境相同。仔猪在50日龄、90日龄均肌肉注射免疫某国产伪狂犬gE基因缺失疫苗，母猪也注射免疫该国产伪狂犬gE基因缺失疫苗，所用疫苗均为Bartha-K61株。

试验过程中，抽取55日龄、85日龄、145日龄猪群血液，分离血清，送合作实验室检测。

在猪场2中，按照同样的试验设计做重复试验。

1.3 gE-ELISA操作方法

检测试剂盒均为美国IDEXX公司生产，操作方法以及结果判定参照试剂盒说明书进行。S/N值≤0.6时，为阳性(+)；S/N值＞0.7时，为阴性(-)；0.6＜S/N值≤0.7时，为可疑(±)。在进行猪场结果判定和统计时，只要猪场有一个样品为阳性，则该场判定为伪狂犬病野毒阳性场。

2结果

猪伪狂犬gE抗体检测结果详见表1、表2、图1、图2。

图1猪场1 gE抗体检测结果

gE抗体阳性率

对检测结果进行详细对比，发现在母猪、商品猪群按照相同的免疫程序肌肉注射相同的伪狂犬疫苗情况下，如果增加滴鼻免疫，可降低商品猪群伪狂犬gE抗体阳性率。与对照组及滴鼻免疫国产伪狂犬疫苗组相比，使用某进口伪狂犬疫苗滴鼻免疫后，商品猪群的gE抗体阳性率最低。重复试验也均验证了试验的结果。

3讨论

近年来，由于生猪引种、频繁调运以及其他疾病的暴发，给猪伪狂犬病的控制带来了一定困难，加上引种时的隔离检疫措施抓得不严，猪伪狂犬病病毒的变异等导致猪伪狂犬病的传播很快。据有关资料统计，该病已在某些地区的一些规模化猪场流行，种猪的gE抗体阳性率达30%～60%，有的甚至超过90%；某些猪场的仔猪死亡率相当高，给生产造成巨大的经济损失。从该病流行的特点分析，猪群健康带毒的情况尤其值得重视，虽然经过免疫接种，但健康带毒的猪只仍可排毒，并引发下一轮感染，且难以清除病原，伪狂犬病毒的隐性感染是造成此现象的主要原因之一。病毒感染后，可在猪的神经系统中定植，造成猪只的终生潜伏感染。当猪只处于应激状况下，潜伏感染的伪狂犬病病毒会被激活，病毒大量复制，并导致猪只发病。

表1猪场1 gE抗体检测结果

表2猪场2 gE抗体检测结果

在控制猪伪狂犬病病毒的潜伏感染时，滴鼻免疫高质量的猪伪狂犬弱毒疫苗是最有效的防制方法之一。仔猪在出生后3日龄内滴鼻免疫猪伪狂犬弱毒疫苗，2小时即可建立起猪只的黏膜免疫，保护猪只不受伪狂犬野毒的感染。同时，疫苗毒通过鼻黏膜在猪只的神经系统尤其在三叉神经节中占位，阻止野毒感染后进入神经系统，从而起到预防猪只潜伏感染的目的。

滴鼻免疫在猪场净化伪狂犬野毒方面有着重要作用。据《猪病学》描述，母源抗体保护和基因缺失疫苗的应用，增加了感染所需病毒的剂量，但是不能有效阻止伪狂犬野毒在猪体内的脱衣壳和潜伏感染。可见，净化野毒的第一步，也是最重要的一步就是制止入侵，而滴鼻免疫是制止入侵的最佳手段之一。滴鼻免疫不受母源抗体干扰，刺激机体的黏膜免疫系统产生保护力。因为母源抗体主要游离于组织液、血清、淋巴液中，在黏膜表面只存在少量的分泌性抗体IgA，这些抗体中和不了疫苗毒，不会影响疫苗发挥作用。

滴鼻免疫时，疫苗需要满足以下几个方面的要求，否则会对疫苗滴鼻免疫效果产生不良影响。

⑴疫苗的佐剂类型：油性佐剂的伪狂犬疫苗会严重影响仔猪滴鼻免疫的效果；

⑵毒株的类型：猪伪狂犬疫苗的TK基因是嗜神经基因，如果TK基因缺失，会影响疫苗毒在神经系统内的占位能力，从而影响滴鼻免疫的效果，不能有效阻止野毒在神经系统内的占位潜伏感染；

⑶滴鼻免疫的方法：专用稀释液稀释疫苗后，使用专用滴鼻头，用连续注射器滴鼻，保证在足够的压力下疫苗均匀喷洒在仔猪鼻黏膜内；

⑷环境的稳定性：滴鼻免疫时，疫苗需均匀喷洒在鼻黏膜上，所以疫苗对环境的稳定性有较高的要求。

通过上述试验可以得出：在猪伪狂犬野毒阳性猪场内，使用高质量的猪伪狂犬弱毒疫苗滴鼻免疫，可以减轻商品猪群伪狂犬病毒的感染压力，降低感染比例，推迟野毒感染时间。

中图分类号：S858.28

文献标识码：A

文章编号：1673-4645(2015)12-0047-03

收稿日期：2015-08-26