普伐他汀对动脉粥样硬化斑块稳定性和Lp-PLA2表达的影响

梁景岩，王英歌

（扬州大学医学院，江苏扬州225001）

普伐他汀对动脉粥样硬化斑块稳定性和Lp-PLA2表达的影响

梁景岩，王英歌

（扬州大学医学院，江苏扬州225001）

目的探讨普伐他汀对兔动脉粥样硬化（AS）斑块稳定性及血清脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）表达的影响。方法取大白兔24只，随机分为甲、乙、丙三组，每组8只。甲组不造模，乙、丙组采用球囊拉伤法制造AS模型，丙组给予普伐他汀干预，然后观察其病理改变及血清Lp-PLA2表达情况。结果与甲组比较，第5、10周乙、丙组大白兔血清Lp-PLA2水平显著增高，差异均有统计学意义（P＜0.05），且第10周乙组大白兔血清Lp-PLA2水平增高更为明显。与乙组比较，第5、10周丙组大白兔血清Lp-PLA2水平均明显下降，差异均有统计学意义（P＜0.05）。第5、10周乙组大白兔血清Lp-PLA2水平均显著高于实验前，差异均有统计学意义（P＜0.01）。第5、10周丙组大白兔血清Lp-PLA2水平略高于实验前。普伐他汀干预后AS斑块的病理学形态、结构均发生改变，斑块结构更加趋于稳定。结论普伐他汀能降低AS动物的Lp-PLA2水平，促进斑块稳定。

普伐他丁；动脉粥样硬化；磷脂酶A2；脂蛋白类

动脉粥样硬化（AS）为临床常见疾病，是导致临床缺血性心、脑血管事件发生的主要原因[1]。大量研究表明，在AS斑块形成过程中血管新生现象是其重要的病理学特征，这种现象进一步可导致AS斑块的不稳定性，继而引发斑块破裂、出血，最终出现严重临床症状。有研究发现，与对照组比较，发生缺血性血管事件患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2（lipoproteinassociatedphospholipase A2，Lp-PLA2）水平显著升高，Lp-PLA2是心血管疾病新的独立危险因子，与AS斑块的形成及稳定性关系密切[2]。本研究采用普伐他汀对AS动物模型进行早期干预，通过检测动物血清Lp-PLA2水平变化，旨在探讨普伐他汀对AS及粥样硬化斑块稳定性的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 取雄性新西兰大白兔24只，由山东鲁抗医药股份有限公司实验动物室提供[生产许可证号：SCXK（鲁）20130001]。采用随机数字分组法分为甲、乙、丙三组，每组8只，其中甲组为正常对照组，体质量2.4～3.7 kg；乙组为模型组，体质量2.6～3.8 kg；丙组为普伐他汀给药组，体质量2.5～3.8 kg。三组大白兔体质量比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。甲组给予正常饲料，乙、丙组均给予高脂饲料（内含1%胆固醇）。饲养14d后对乙、丙组进行球囊拉伤造模。本实验经动物伦理审查委员会审查通过。

1.2 方法

1.2.1 造模 采用球囊拉伤法制备AS动物模型[3]。采用10%水合氯醛麻醉，在腹股沟区确认股动脉搏动后纵向切开大白兔皮肤，分离皮下组织，钝性分离动、静脉及股神经，用桡动脉穿刺针成功穿刺股动脉后在血管造影仪透视下送入导管，沿导管将4 F球囊插入家兔股动脉后上行插入30 cm左右，再向球囊内注入0.2 mL生理盐水，使球囊直径膨胀约0.5 cm，向下拖拉球囊至骼总动脉分叉处，反复牵拉损伤内皮，共进行3次。最后撤出球囊导管，结扎股动脉，依次对大白兔组织及皮肤创口进行缝合。术后每天肌内注射青霉素80 U，并连续抗感染治疗3 d。

1.2.2 AS斑块稳定性观察 将上述各组动物处死，选择腹主动脉AS斑块进行肉眼观察，并取材制作病理切片，光镜下观察斑块的基本构成，以判断其稳定性。

1.2.3 血清Lp-PLA2水平检测 分别于实验前，实验第5、10周采集大白兔静脉血，检测各组大白兔血清Lp-PLA2水平。

1.3 统计学处理 应用SPSS19.0统计软件进行数据分析，计量资料以±s表示，采用t检验；计数资料以率或构成比表示，采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 三组大白兔不同时间点Lp-PLA2水平比较 与甲组比较，第5、10周乙、丙组大白兔血清Lp-PLA2水平均增高，差异均有统计学意义（P＜0.05），第10周乙组大白兔血清Lp-PLA2水平增高更为明显。与乙组比较，第5、10周丙组大白兔血清Lp-PLA2水平均明显下降，差异均有统计学意义（P＜0.05）。第5、10周乙组大白兔血清Lp-PLA2水平显著高于实验前，第10周血清Lp-PLA2水平较第5周明显增高，差异均有统计学意义（P＜0.01）。第5、10周丙组大白兔血清Lp-PLA2水平略高于实验前，见表1。

表1 三组大白兔不同时间点Lp-PLA2水平比较（±s，μg/L）

表1 三组大白兔不同时间点Lp-PLA2水平比较（±s，μg/L）

注：与甲组同时间点比较，aP＜0.05；与乙组同时间点比较，bP＜0.05；与同组实验前比较，cP＜0.01；与同组第5周比较，dP＜0.05。

组别甲组乙组丙组n 实验前 第5周 第10周8 8 8 28.78±8.34 26.46±7.73 29.75±3.76 26.65±7.13 48.43±4.58ac38.69±8.42ab25.69±5.37 68.35±9.58acd35.76±8.79ab

2.2 三组大白兔AS斑块稳定性观察 甲组大白兔腹主动脉管壁厚薄均匀，内膜较光滑，未见到泡沫细胞及脂质沉积。乙组大白兔腹主动脉壁增厚，且薄厚不均匀，已出现明显AS斑块，斑块深层可见泡沫细胞、脂质沉积及胆固醇结晶，斑块突入血管腔致管腔狭窄。丙组大白兔斑块较小、胶原成分较多，泡沫细胞及脂质沉积较乙组减少，见图1。

图1 三组大白兔AS斑块稳定性观察（苏木精-伊红染色，20×）

3 讨 论

21世纪以来，AS已成为严重威胁人类健康的疾病[4]，AS是一种慢性、增殖性、退行性、进展性的全程性炎症过程，是导致冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）等心、脑血管疾病的病理学基础。近年来研究发现[5]，AS斑块内的炎性反应，由Lp-PLA2水解的促炎症介质介导，引起血管内皮细胞损伤，出现单核细胞浸润，导致泡沫细胞沉积，最终促进粥样斑块形成及使粥样斑块不稳定。因此，抑制斑块内炎症介质的连锁反应对稳定斑块、防止急性血管事件的发生意义重大。Lp-PLA2是目前较新发现的促进动脉硬化斑块炎性反应的独立因子[6]，是磷脂酶A2家族成员，主要由巨噬细胞、单核细胞、T淋巴细胞和肥大细胞分泌产生，能特异性促进血管内相关炎症细胞增殖分裂、促进斑块纤维分解，机体中的Lp-PLA2主要与脂蛋白颗粒结合，其中2/3与低密度脂蛋白结合，其余1/3与极低密度脂蛋白和高密度脂蛋白结合。Lp-PLA2能水解氧化低密度脂蛋白，将其水解生成卵磷脂及氧化游离脂肪酸等促炎症介质，后二者可促进细胞黏附因子、表皮生长因子和血小板源性生长因子的表达，引起内皮功能障碍，促进单核细胞向内膜聚集衍生成巨噬细胞，从而促进动脉粥样硬化的发生和发展。大量研究表明，Lp-PLA2为血管炎性反应特异性标志物，可反映AS斑块的严重程度，而且在急性冠状动脉综合征患者中Lp-PLA2水平也显著升高。最新研究表明，血清Lp-PLA2水平也与支架植入后再狭窄呈正相关。大量实验证明，在急性冠状动脉综合征患者中降低循环中Lp-PLA2水平有利于冠状动脉斑块的消退。有研究证实，其在AS斑块中的表达明显增加，并对斑块的发生、发展具有促进作用[7]。大量研究表明，普伐他汀能有效降低冠心病发病率及病死率，降低低密度脂蛋白胆固醇，抑制斑块进展[8]。另外普伐他汀还能改善内皮功能、稳定斑块、抗炎、抗氧化、免疫调节、抑制血栓形成等[9]。有研究证实，普伐他汀可减少Lp-PLA2表达，减少泡沫细胞的沉积，从而使斑块更趋于稳定，并且这些作用均与其降脂作用无关[10]。本研究结果表明，普伐他汀可在一定程度抑制Lp-PLA2的表达。病理学检查结果显示，普伐他汀干预后动脉粥样硬化斑块的病理学形态、结构均发生改变，斑块结构更趋于稳定，表明普伐他汀对稳定AS斑块具有一定作用。

综上所述，在实验性动脉粥样硬化斑块形成过程中Lp-PLA2水平升高，提示Lp-PLA2有促进AS斑块形成的作用。丙组大白兔血清Lp-PLA2水平明显下降，斑块较为稳定，提示普伐他汀具有稳定斑块、抑制Lp-PLA2表达的作用。然而由于本研究样本量有限，尚有待于后期进一步深入研究。

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[2]罗美蓉，王正伟，安志星.人血管内皮生长因子研究进展[J].中国老年学杂志，2012，32（17）：3835-3837.

[3]吕云波，钟金鹏.兔动脉粥样硬化斑块稳定性与趋化因子的相关性研究[J].临床心血管病杂志，2012，28（9）：663-667.

[4]陈莉，刘玲.米诺环素对5-LOX通路及动脉粥样硬化中炎症反应的抑制作用[J].中国现代应用药学，2015，32（4）：415-419.

[5]李建军.炎症与动脉粥样硬化[J].中国医学前沿杂志，2011，3（5）：4-6.

[6]赵振强，胡兰，蔡美华，等.脂蛋白相关磷脂酶A2和C反应蛋白与短暂性脑缺血发作患者风险分层的研究[J].中华老年心脑血管病杂志，2015，17（4）：365-368.

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[10]郭水连，卓晓青，刘建立，等.普伐他汀对鼠动脉粥样硬化及炎症因子的影响[J].临床合理用药杂志，2014，7（11）：11-12.

Influence of pravastatin on atherosclerotic plaque stability and Lp-PLA2 expression

Liang Jingyan，Wang Yingge
（Medical College of Yangzhou University，Yangzhou，Jiangsu 225001，China）

ObjectiveTo investigate the influence of pravastatin on the atherosclerotic plaque（AS）stability and serum Lp-PLA2 expression in rabbit．Methods24 rabbits were randomly divided into the group A，B and C，8 cases in each group.The group A was non-model.The group B and C adopted the balloon pulling injury method for establishing the AS model.Then the pathological changes and serum Lp-PLA2 expression were observed.ResultsCompared with the group A，serum Lp-PLA2 levels at 5，10 weeks in the group B and C were increased significantly，the differences were statistically significant（P＜0.05），moreover the increase of serum Lp-PLA2 level at 10 weeks in the group B was more obvious.Compared with the group B，the serum Lp-PLA2 levels at 5，10 weeks in the group C was significantly decreased，the difference was statistically significant（P＜0.05）.The serum Lp-PLA2 levels at 5，10 weeks in the group B were significantly higher than those before experiment，the difference was statistically significant（P＜0.01）.The serum Lp-PLA2 levels at 5，10 weeks in the group C were slightly higher than those before experiment.The pathological morphology and structure of AS plaque after pravastatin intervention were changed and the plaque structure trended to be more stable.ResultsPravastatin can reduce Lp-PLA2 level in the AS animal and promotes the AS plaque stability.

Pravastatin；Atherosclerosis；Phospholipases A2；Apolipoproteins

10.3969/j.issn.1009-5519.2015.17.005

A

1009-5519（2015）17-2583-02

2015-06-01）

梁景岩（1977-），男，黑龙江黑河人，博士研究生，讲师，主要从事动脉粥样硬化方向的研究；E-mail：342459198@qq.com。