鼠神经生长因子对危重型小儿手足口病患者体液免疫的影响

韩传映，蒋刚健，陈鑫

(1.漯河医学高等专科学校第一附属医院儿，河南 漯河 462000；2.漯河市医学高等专科学校第一附属医院 检验科，河南 漯河 462000)



鼠神经生长因子对危重型小儿手足口病患者体液免疫的影响

韩传映1，蒋刚健1，陈鑫2

(1.漯河医学高等专科学校第一附属医院儿，河南 漯河 462000；2.漯河市医学高等专科学校第一附属医院 检验科，河南 漯河 462000)

目的 探讨鼠神经生长因子对危重型小儿手足口病患者体液免疫影响。方法 随机抽取漯河医学高等专科学校第一附属医院感染科2010年6月～2012年9月收治的危重型小儿手足口病患者92例，随机数字表法分为对照组和观察组，每组46例。对照组采用常规对症治疗，观察组在对照组治疗基础上联合应用注射用鼠神经生长因子。治疗14d后比较2组患者血细胞分析、体液免疫、细胞因子以及T淋巴细胞亚群各指标。结果 治疗后，与对照组比较，观察组白细胞、中性粒细胞与淋巴细胞水平较低(P<0.05)，观察组IgM、IgG、IgA水平较高(P<0.05)，IL-1、IL-6、IL-10水平较低(P<0.05)，CD4+、CD8+水平较高(P<0.05)。结论 鼠神经生长因子能够明显改善小儿手足口病患者的体液免疫、细胞因子以及T淋巴细胞亚群各指标的水平，对临床具有指导意义。

鼠神经生长因子；危重型手足口病；体液免疫；病情转归

手足口病(hand foot mouth disease，HFMD)是临床上常见的一种婴幼儿传染性疾病，多发生在5岁以下儿童。常见的临床症状主要有手、足、口腔等部位出现疱疹或者破溃性溃疡等。少数手足口病患儿可引发脑膜炎、肺水肿、心肌炎等严重并发症的出现[1-2]。危重型手足口病的临床表现为持续性高热(体温>39.0 ℃)，持续时间约为2～7 d，伴有频繁抽搐以及有严重意识障碍等症状，病情危重，亦可影响循环、呼吸系统[3]。本病是由肠道病毒71型和柯萨奇A16病毒引起的传染性疾病。鉴于近几年本病的发病率逐年升高，所以对重症患儿危险性给予及时评估、干预并且改善患儿病情预后，成为临床研究的重点[4]。研究发现[5]，鼠神经生长因子治疗危重症手足口病患儿，在改善体液免疫方面取得较好疗效，能够促进疾病转归。本文通过比较观察组与对照组免疫球蛋白IgM、IgG、IgA水平，来探究鼠神经生长因子的治疗效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010年6月～2012年9月于漯河医学高等专科学校第一附属医院感染科以手足口病为诊断而收入院患儿92例，年龄6个月～7岁，平均年龄(3.6±1.1)岁，患者病程均为2～5 d，按照我国卫生部颁布的《手足口病诊疗指南》(2010年版)[3]分型为危重型的患者。采用随机数字表法将患者分为观察组和对照组。对照组46例患儿，男21 例，女25例，年龄6个月～6岁，平均年龄(3.6±0.9)岁；观察组46例患儿，男24例，女22例，年龄6个月～7岁，平均年龄(3.8±1.2)岁。2组患者的一般资料相仿，具有可比性。诊断标准及排除标准：根据《手足口病预防控制指南》确定诊断标准[6]：①临床表现为口痛、厌食、低热、手、足、口腔等部位出现小疱疹或小溃疡；②自咽拭子、粪便、脑脊液、疱疹液、血清检测到人肠道病毒；③自咽拭子、粪便、脑脊液、疱疹液、血清检测到人肠道病毒核酸；④血清中人肠道病毒中和抗体滴度为1:256以上。病程为2～7 d，并均在发病48 h内入院；入院前2月内未行激素、丙种球蛋白等药物治疗。排除临床未确诊的HFMD患儿；排除心、肝、肾、肺严重疾病者；排除临床检验提示合并细菌或支原体感染的患儿。本研究获得患者知情同意。

1.2 治疗方法 根据国际临床用药指南[6]，对照组入院后予以双黄连口服液(哈尔滨中药四厂有限公司，国药准字Z10910024)10 mL/次，每天3次抗病毒治疗，布洛芬混悬液(上海强生制药有限公司，国药准字H20000359)0.1 g退热、有颅内压增高者可给予20%甘露醇注射液(四川美大康华康药业有限公司，国药准字H51023254)50 mL静脉滴注，常规补液以纠正酸碱平衡和离子紊乱等；观察组在常规对症治疗的基础上联合应用注射用鼠神经生长因子(武汉海特生物制药股份有限公司，国药准字S20060051)20 μg肌肉注射，每天1次，2周为1疗程，治疗1个疗程。

1.3 检测指标 患者入组后第1天清晨及最后1天清晨抽取空腹静脉血5 mL，3000 r/min离心后取上清备用。应用全自动生化分析仪检测C反应蛋白(C-reactionprotein，CRP)、谷氨酰胺(glutarnine，Glu)、WBC水平。应用流式细胞仪检测患者血清CD4+、CD8+相对含量。采用免疫比浊法检测2组患者血清中免疫球蛋白IgM、IgG、IgA水平。采用化学发光法，检测血清中IL-1、IL-6、IL-8、IL-10水平。试剂盒由赛驰生物公司提供，严格按照试剂盒的说明书操作。

2 结果

2.1 血细胞分析比较 治疗前患者血细胞分析指标差异无统计学意义，具有可比性。经治疗，2组患者血细胞分析指标均下降(P<0.05)。与对照组比较，观察组白细胞、中性粒细胞与淋巴细胞水平较低(P<0.05)，单核细胞比较差异无统计学意义。见表1。

表1 2组患者血细胞分析指标比较Tab.1 Comparison of blood cell analysis between two ±s，×109/L)

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group before treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group after treatment

2.2 体液免疫指标比较 治疗前2组患者IgM、IgG、IgA水平比较差异无统计学意义。经治疗，患者IgM、IgG、IgA水平上升(P<0.05)。与对照组相比，观察组IgM、IgG、IgA水平较高(P<0.05)。见表2。

表2 2组患者IgM、IgG、IgA水平比较Tab.2 Comparison of IgM，IgG and IgA levels between two ±s)

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group before treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group after treatment

2.3 IL-1、IL-6、IL-8、IL-10水平比较 治疗前患者IL-1、IL-6、IL-8、IL-10水平比较差异无统计学意义。治疗后，2组患者的IL-1、IL-6、IL-8、IL-10水平均下降(P<0.05)。与对照组相比，观察组患者的IL-1、IL-6、IL-10水平较低(P<0.05)。见表3。

表3 2组患者IL-1、IL-6、IL-8、IL-10水平比较Tab.

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group before treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group after treatment

2.4 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比较 治疗前患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比较差异无统计学意义。经治疗，2组患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平升高(P<0.05)。与对照组相比，观察组患者的CD4+、CD8+水平较高(P<0.05)，CD4+/CD8+比较差异无统计学意义。

组别 例数时间CD4+CD8+CD4+/CD8+对照组46治疗前0.81±0.1314.32±2.120.83±0.13治疗后28.77±4.68*22.18±3.34*1.23±0.19*观察组46治疗前0.83±0.1214.55±2.210.85±0.11治疗后33.84±4.63*#26.36±3.86*#1.25±0.18*

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group before treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group after treatment

3 讨论

手足口病是因感染人肠道病毒引起的手、足、口腔出现疱疹伴发热为表现的急性传染病，该病主要的病原体为柯萨奇病毒A16型和肠道病毒71型，好发于每年的5～6月，以消化道、呼吸道及接触传播为主要传播途径，多发于儿童[7]。手足口病具有较强的传染性，能够在短期内发生大量儿童感染，病毒能够随着血液侵入大脑及脊髓中，引起脑炎、脑脊髓炎严重的神经系统性疾病，严重威胁患儿生命。研究表明[8]，人肠道病毒侵袭机体后，病毒本身及分泌毒素能够直接侵入组织而损伤细胞，引起异常的免疫反应，手、足及口周出现疱疹。

本实验结果显示，入院手足口病患儿血中体液免疫各项指标均较低，经治疗方案治疗后，各项指标恢复，与对照组比较，观察组各项免疫指标较高。提示患儿感染人肠道病毒后，导致机体免疫水平紊乱，免疫球蛋白处于低水平状态，导致无法清除体内病毒，导致病毒对组织的损伤[9]。免疫球蛋白IgA[10]是由气管黏膜、鼻黏膜、肺黏膜等分泌的抗体，能够敏感监测和防御呼吸系统局部感染，若呼吸系统出现病毒或细菌感染时，黏膜分泌水平下降，无法正常分泌IgA抗体，导致机体免疫力下降，出现口腔黏膜皮疹。IgM是体液免疫中出现最早、生存时间最短的免疫球蛋白，当患儿感染人肠道病毒时，机体免疫紊乱，免疫水平低下，从而严重影响IgM的形成和分泌[11]。IgG是下呼吸道保护性抗体，能够敏感的反映呼吸道黏膜防御病毒及细菌感染的水平。

本实验结果表明，经治疗后，2组患者的IL-1、IL-6、IL-8、IL-10水平上升，与对照组相比，观察组IL-1、IL-6、IL-10水平较低。IL-1是炎症反应早期的重要介质之一，主要存在于循环系统中。IL-1在低浓度下可特异性作用于单核巨噬细胞和血管内皮细胞；大量分泌时，IL-1进入血液，引起全身性的炎症反应[12]。本实验中IL-1参与炎症反应，与患者的病情轻重密切相关。大多数IL-6由单核细胞产生。当机体发生炎症时，巨噬细胞和单核细胞产生IL-6的反应细胞，使炎症部位及全身的IL-6水平升高。在机体的作用与IL-1相似。通过IL-1激活[13]。本实验患者IL-6水平升高，提示其正在参与机体的炎症活动。IL-8是中性粒细胞的趋化因子，能够趋化并激活中性粒细胞，促进其脱颗粒，增强其吞噬作用。IL-10可由多种细胞分泌，具有免疫抑制和激活的双重作用[14]。

目前，临床通常采用检测T细胞亚群判断患者机体细胞免疫功能水平，本研究结果表明，经治疗后，2组患者的CD4+、CD8+水平均明显改善，与对照组相比，观察组患者的CD4+、CD8+水平明显升高。研究表明CD4+、CD8+能够调节人体的免疫功能，其中CD4+可以刺激产生抗体，CD8+对抗体合成具有抑制作用，2者的协调作用使机体的免疫功能维持正常，其比值提示了人体的免疫功能水平[15]。CD4+参与Th2细胞激活。CD8+激活细胞毒性T细胞，调节人体的免疫活动。

研究表明[16]，鼠神经生长因子主要成分系从小鼠颌下腺提取的神经生长因子，具有促进呼吸道黏膜的愈合和抗病毒的能力，从而恢复呼吸系统黏膜对免疫球蛋白的分泌，恢复机体的免疫水平。研究证实[17]，体内神经生长因子(NGF)是一种神经活性多肽，不仅具有中枢神经系统营养因子的作用，还能促进受损神经元的再生，改善神经元的病理状态对神经损伤具有重要的保护和修复作用。在胚胎时期，NGF分布广泛，含量较多，在出生后分布区域明显减少而且含量下降，至成年保持较低水平。本研究推断鼠神经生长因子作用机理，因神经损伤后NGF应激性表达水平上调，但内源性NGF表达增加时程很短，表达水平有限，难以对受损神经元起到全面而持久的保护作用，鼠神经生长因子弥补了这项不足。正常生理状态下，外源性NGF不易透过血脑屏障，但在颅内感染等导致血脑屏障受损伤时，NGF 可透过血脑屏障进入中枢神经系统发挥作用。

鼠神经生长因子能够明确增强患儿体液以及细胞免疫功能，进而促进患儿疾病转归，对临床具有指导意义。但本实验尚未大样本研究鼠神经生长因子与体液免疫功能及病情转归，也未做长远的预后分析，还需进一步深入研究。

[1] 常昭瑞，张静，孙军玲，等.中国2008-2009年手足口病报告病例流行病学特征分析[J].中华流行病学杂志，2011，32(7)：676-680.

[2] 靳妍，张静，孙军玲.2011年中国大陆手足口病流行特征分析[J].疾病监测，2012，27(9)：676-679.

[3] 茹维平，王彦霞，康锴，等.危重型手足口病临床症状及预警因素分析[J].郑州大学学报：医学版，2011，46(4)：608-610.

[4] 杨智宏，朱启镕，李秀珠.2002年上海儿童手足口病病例中肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型的调查[J].中华儿科杂志，2005，43(9)：648-652.

[5] 宋蕊，冯亮，李兴旺，等.鼠神经生长因子治疗手足口病合并中枢神经系统损害的研究[J].中华神经医学杂志，2011，10(7)：741-743.

[6] 卫生部.手足口病预防控制指南(2009版)[K].2009.

[7] 李锡太，王全意，黄芳.北京市2007-2010年手足口病流行特征分析[J].国际病毒学杂志，2011，18(1)：5-10.

[8] 张颖，盖中涛.手足口病研究进展[J].山东医药，2008，48(17)：113-114.

[9] 周涛，马力忠，付四毛，等.手足口病患者体液免疫与病情转归的相关性分析[J].广东医学，2010，31(18)：2434-2435.

[10] 陈大宇，黄献文.小儿手足口病免疫球蛋白与超敏C反应蛋白的检测分析[J].中国全科医学，2011，(5)：476-477.

[11] 刘亚敏，王春妍，宋立文，等.手足口病患儿体液免疫检测分析[J].临床和实验医学杂志，2009，8(8)：73-74.

[12] 李维春，武荣，张克昌.不同病情手足口病患儿血清IL-1β、IL-10和TNF-ɑ水平观察[J].中国实验诊断学，2011，15(3)：524-525.

[13] 王爽，赵艳，张欣.重症手足口病患儿血清细胞因子检测分析[J].北京医学，2012，34(3)：185-188.

[14] 刘炜，周崇臣，包丰昌，等.手足口病患儿血液免疫学改变及其临床意义[J].河南医学研究，2012，20(4)：406-409.

[15] 杨晓泉，叶晓明，农少云，等.手足口病患儿的免疫功能[J].实用儿科临床杂志，2011，26(22)：1764-1764.

[16] 张宏伟，张美，李侗曾，等.鼠神经生长因子治疗手足口病合并中枢神经系统损害临床观察[J].2012，6(1)：72-74.

[17] 宋蕊，冯亮，李兴旺，等.鼠神经生长因子治疗手足口病合并中枢神经系统损害的研究[J].中华神经医学杂志，2011，10(7)：741-743.

(编校：王俨俨)

Effect of mouse nerve growth factor on humoral immunity in children with severe hand foot mouth disease

HAN Chuan-ying1, JIANG Gang-jian1, CHEN Xin2

(1.Department of Pediatrics, The First Affiliated Hospital of Luohe Med & Cal College, Luohe 462000, China; 2.Department of Laboratory, The First Affiliated Hospital of Luohe Med & Cal College, Luohe 462000, China)

ObjectiveTo investigate the effect of mouse nerve growth factor on humoral immunity in children with severe hand foot mouth disease.Methods92 patients with severe hand foot mouth disease were selected from June 2010 to September 2012 in the hospital, and randomly divided into two groups.The indexes of blood cell analysis, humoral immunity, cytokines and T lymphocyte subsets were compared after treatment.ResultsAfter treatment, compared with control group, the numeration white blood cell, neutrophil and lymphocyte of observation group were lower (P<0.05), IgM, IgG and IgA were higher (P<0.05), IL-1, IL-6 and IL-10 were lower (P<0.05), CD4+and CD8+were higher (P<0.05).ConclusionMouse nerve growth factor can significantly improve the each index of humoral immunity cytokines and T lymphocyte subsets level in children with hand foot mouth disease, which has the great significance in clinical.

mouse nerve growth factor; severe hand foot mouth disease; humoral immunity; prognosis

韩传映，男，本科，副主任医师，研究方向：儿科，E-mail：okhcying@163.com。

R72

A

1005-1678(2015)05-0135-03