阿德福韦酯片联合聚乙二醇干扰素对乙型肝炎患者血清Th1/Th2型细胞因子及IgM与IgG抗体影响研究

刘建涛，张旭

(迁安市传染病医院 肝内科，河北 唐山 064400)



阿德福韦酯片联合聚乙二醇干扰素对乙型肝炎患者血清Th1/Th2型细胞因子及IgM与IgG抗体影响研究

刘建涛Δ，张旭

(迁安市传染病医院 肝内科，河北 唐山 064400)

目的 探讨阿德福韦酯片联合聚乙二醇干扰素对乙型肝炎患者血清Th1/Th2型细胞因子及IgM与IgG抗体的影响。方法 收集迁安市传染病医院收治的慢性乙型肝炎患者52例，随机分为对照组和实验组，每组各26例，对照组患者单纯给予阿德福韦酯片治疗，实验组在对照组基础上给予聚乙二醇干扰素治疗，治疗结束后，对所有患者的血清IFN-γ、IL-4、IgM及IgG水平进行检测。结果 治疗后，与对照组比较，实验组患者的血清IFN-γ水平较高 (P<0.05)；实验组患者的血清IL-4水平明显较低(P<0.05)；实验组患者的血清IgM、IgG水平较低(P<0.05)。结论 阿德福韦酯片联合聚乙二醇干扰素能够显著降低乙型肝炎患者血清IL-4、IgM及IgG水平，提高血清IFN-γ水平，扭转Th1/Th2失衡状态。

阿德福韦酯片；聚乙二醇干扰素；乙型肝炎；Th1/Th2型细胞因子；IgM；IgG

乙型病毒性肝炎是由于乙肝病毒感染引起的肝脏炎症性病变以及多器官损害。本病的传播途径包括母婴传播、血液及体液传播、医源性传播、性传播和日常生活的密切接触传播等[1]。乙型肝炎是一种世界性疾病，资料显示，球约20亿人曾感染过乙型肝炎病毒，其中3.5～4亿人为慢性乙肝病毒感染者，每年因相关疾病死亡者达120万，而我国感染过乙肝病毒的约有7～8亿人， 其中10%的感染者发展为慢性乙型肝炎，每年因HBV导致的肝硬化和肝癌死亡患者约30万例[2-3]。慢性乙型肝炎具有病程长、病情复杂性高、传染性强、易反复、恶变率高等特点[4]，因此，采取合理有效的治疗控制病情发展尤为重要。对于乙型肝炎，目前尚无根治方法，临床上主要采用对症治疗及药物抗病毒治疗，通过杀灭乙肝病毒、减轻肝脏炎症、纤维化过程，来达到控制病情发展的目的。核苷酸类似物和干扰素属于主要的抗病毒药物，阿德福韦酯片属于核苷酸类似物，有研究显示，阿德福韦酯片在治疗慢性乙肝方面具有显著效果[5]。但是，核苷酸类似物容易产生耐药性，还容易使得病毒变异，所以为达到更好的治疗效果，需配合其他药物使用，干扰素是一种很好的选择。因此，本研究通过观察治疗前后患者血清辅助性T细胞1(helper T cell 1,Th1)/辅助性T细胞2(helper T cell 2，Th2)型细胞因子及免疫球蛋白M(immunoglobulin M，IgM)与免疫球蛋白G(immunoglobulin G，IgG)抗体的变化，探讨阿德福韦酯片联合聚乙二醇干扰素对乙型肝炎患者的影响。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集迁安市传染病医院肝内科2014年3月～2015年3月的确诊为慢性乙型肝炎的患者52例。其中男性34例；女性18例。平均病程(9.7±2.1)年。诊断标准：诊断依据根据《2015年世界卫生组织慢性乙型肝炎病毒感染预防、关怀和治疗指南》关于慢性乙型肝炎的诊断标准[6]，实验室检查HbsAg(+)、HbeAb(+)，HBV-DNA≥1.0×105拷贝/mL；本研究患者知情同意，获本院伦理委员会批准。排除标准：①合并肝硬化失代偿、自身免疫性肝炎等；②近3个月内使用任何剂量或类型的糖皮质激素、抗生素、免疫抑制剂等对免疫功能有影响的药物；③合并恶性肿瘤；④合并严重的心脑血管疾病、肝、肾功能异常等；⑤妊娠及哺乳期妇女；⑥对研究中所涉及药物过敏。

1.2 方法

1.2.1 治疗及分组方法：所有患者随机分为实验组和对照组，各26例患者，对照组男性17例，女性9例，年龄16～69岁，平均年龄(37.8±8.4)岁，病程4～15年，平均病程(9.4±2.0)年；实验组男性17例，女性9例，年龄17～70岁，平均年龄(38.1±8.5)岁，病程4～16年，平均病程(9.9±1.6)年。2组患者的性别组成、年龄分布等一般资料差异无统计学意义。对照组患者给予阿德福韦酯片(江苏天士力帝益药业有限公司，国药准字H20080365)10 mg，1次/天口服；实验组患者在对照组治疗的基础上给予聚乙二醇干扰素α-2a注射液(商品名：派罗欣，瑞士 Roche Pharma (Schweiz) Ltd.，S20120047)1.0 mg/kg皮下注射，1次/周。2组患者均治疗24周。

1.2.2 血清指标采集：治疗前后，所有研究对象均采集空腹12小时后静脉血5 mL，然后通过离心机分离血清，采用普朗DNM-9606酶标分析仪，检测波长：450 nm，通过酶联免疫吸附试验测定血清中干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4，IL-4)水平，严格按照试剂盒说明书进行操作(试剂盒均购于上海广锐生物科技有限公司)；采用全自动生化分析仪(OLYMPUSAU5400)，通过免疫比浊法检测血清中免疫球蛋白M(IgM)及免疫球蛋白G(IgG)水平。

2 结果

2.1 治疗前后2组患者血清IFN-γ、IL-4水平水平比较 治疗后2组患者的血清IFN-γ水平与治疗前比较均明显升高，与对照组比较，实验组患者的血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05)。治疗后实验组患者的血清IL-4水平与治疗前比较明显降低，与对照组比较，实验组患者的血清IL-4水平明显较低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 2组患者IFN-γ、IL-4水平比较Tab.

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

2.2 治疗前后2组患者血清IgM、IgG水平比较 治疗后实验组患者的血清IgM、IgG水平与治疗前比较明显降低，与对照组比较，实验组患者的血清IgM、IgG水平明显降低(P<0.05)。见表2。

表2 2组患者IgM、IgG水平比较Tab.2 Comparison of level of IgM, IgG in serum between two ±s，g/L)

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

3 讨论

近年来，随着我国对于乙肝疫苗接种的不断普及，虽然乙型肝炎的发病率在一定程度上得到控制，但仍处于较高水平，给患者带来很大的痛苦。慢性乙肝表现为全身乏力、食欲不振、恶心等消化道表现，严重者出现黄疸、肝区疼痛、肝脾肿大，最终引发肝源性糖尿病、脂肪肝、肝炎后高胆红素血症、肝硬化等并发症的出现，危及生命。抗病毒是临床上治疗慢性乙肝最主要的治疗方式，目前国际公认有效的抗乙肝病毒药物主要包括干扰素类和核苷(酸)类似物2大类[7]。阿德福韦酯属单磷酸腺苷磷酸核苷酸类似物，是阿德福韦的前药[8]，能够与脱氧腺苷三磷酸竞争性的整合到病毒DNA上，引起DNA链延长终止，从而发挥抗病毒作用。聚乙二醇干扰素是重组人干扰素α-2b与单甲氧基聚乙二醇的结合物，能够与细胞表面特异性细胞膜受体结合，诱导相关酶的表达，抑制细胞内的病毒复制、病毒感染细胞的增殖，同时促进巨噬细胞对于病毒的吞噬作用，发挥抗病毒和防止病毒传播的功能。但是，阿德福韦酯单独使用容易产生耐药性且易复发，干扰素单独使用的副作用较大。有研究显示，聚乙二醇干扰素α-2a与阿德福韦酯联合治疗慢性乙型肝炎的临床疗效显著[9]。所以，在本实验中，通过对患者治疗前后血清IFN-γ、IL-4、IgM及IgG水平的研究分析，来探索阿德福韦酯片联合聚乙二醇干扰素治疗乙型肝炎患者的效果和作用机理。

本研究结果发现，实验组患者的血清IFN-γ水平与对照组比较明显升高(P<0.05)，实验组患者的血清IL-4水与对照组比较平明显较低(P<0.05)，证实了阿德福韦酯片联合聚乙二醇干扰素能够促进Th1相关细胞因子的表达，抑制Th2相关细胞因的表达，扭转Th1/ Th2失衡状态，增强机体抗病毒的能力。辅助性T细胞是机体机体的特异性免疫和非特异性免疫的重要部分，分为Th1细胞和Th2细胞2种类型。Th1和Th2产生不同的具有相互作用的细胞因子，正常情况下，Th1/Th2的动态平衡维持机体正常的免疫功能，而受到抗原刺激时，会出现Th1/Th2飘移现象，即Th1和Th2细胞中某一亚群功能升高，另一亚群功能降低[10]。IFN-γ由Th1分泌，能够增强NK细胞对于病毒的杀伤作用，促进细胞免疫；而IL-4主要由Th2分泌，能够促进B淋巴细胞释放免疫球蛋白，增强体液免疫。曾有报道认为，Th1型细胞因子水平升高，Th2型细胞因子水平下降，机体的免疫反应以细胞免疫为主，利于乙肝病毒的清除[11]。

IgM和IgG是免疫球蛋白的2种类型，属于免疫活性分子的一类，当机体受到细菌、病毒等抗原刺激时，免疫球蛋白的合成水平明显增加。IgM是初次体液免疫应答中最早出现的抗体，而IgG是血清主要的抗体成分，能够抗菌、抗病毒，在机体免疫中起保护作用。有研究表明，慢性乙型肝炎患者的血清免疫球蛋白水平与患者的病情发展程度具有一定的正相关[12]。本研究结果显示，实验组患者的血清IgM、IgG水平与对照组比较明显降低(P<0.05)，表明阿德福韦酯片联合聚乙二醇干扰素能够降低血清IgM、IgG水平，减轻肝细胞损伤，改善患者预后。

本实验通过对慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ、IL-4、IgM及IgG水平的检测结果进行分析，证实了阿德福韦酯片联合聚乙二醇干扰素能够显著降低乙型肝炎患者血清IL-4、IgM及IgG水平，提高血清IFN-γ水平，扭转Th1/Th2失衡状态，改善预后，对临床有指导意义，下一步研究将进行分子机制方面研究，为本实验所反映的现象做出进一步论证和分析。

[1] 贺爱秋，焉涛.浅谈乙型病毒性肝炎的免疫预防方法及工作体会[J].中国保健营养(下旬刊)，2013，23(6)：3391-3391.

[2] 崔富强，王富珍，郑徽，等. 中国2005～2007年乙型病毒性肝炎发病分析[J]. 中国疫苗和免疫，2008，14(5)：413-417.

[3] 崔富强，王富珍，吴振华，等. 中国2005～2010年报告乙型病毒性肝炎发病分析[J]. 中国疫苗和免疫，2011，17(6)：483-486，559.

[4] 李萍，赵玉军.126例慢性乙型病毒性肝炎的临床护理体会[J].中国医药指南，2011，9(32)：428-429.

[5] 丁晋彪，李跃旗，李琳，等.阿德福韦酯片治疗慢性乙型肝炎临床研究[J].传染病信息，2010，23(1)：36-39.

[6] 胡晓云，刘智泓，孙剑，等.《2015年世界卫生组织慢性乙型肝炎病毒感染预防、关怀和治疗指南》解读：无创肝纤维化评估、抗病毒治疗策略和国家防治计划实施[J].临床肝胆病杂志，2015，31(6)：829-832.

[7] 谢雯，吴璐.干扰素-α在慢性乙型肝炎抗病毒治疗中的应用[J].中国临床医生，2012，40(4)：13-16.

[8] 颜春晖.阿德福韦酯联合补肾丸治疗慢性乙型病毒性肝炎疗效及其对肾功能的影响[J].浙江中西医结合杂志，2014，24(2)：164-165，179.

[9] 崔冬冬，牛侨，李建国，等.聚乙二醇干扰素α-2a 联合阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎的疗效观察[J].临床合理用药杂志，2014(26)：61-62.

[10] 刘元元，马振华，牛俊奇，等.阿德福韦酯治疗前后慢性乙型肝炎患者血清中Th1/2型细胞因子水平的变化及其意义[J].吉林大学学报(医学版)，2010，36(4)：691-694.

[11] 曾志励，吴健林，吴继周等.乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群比例和Th1/Th2细胞因子水平检测及其临床意义[J].吉林大学学报(医学版)，2012，38(3)：555-558.

[12] 陈满红.慢性乙型肝炎患者血清免疫球蛋白的变化及临床意义[J].中国医学创新，2013，10(36)：160-162.

(编校：谭玲)

Effect of adefovir dipivoxil combined with pegylated interferon on serum Th1/Th2 type cytokines and IgM and IgG antibodies in patients with hepatitis B

LIU Jian-taoΔ, ZHANG Xu

(Department of Internal Medicine Liver, Qian’an Infectious Disease Hospital, Tangshan 064400, China)

ObjectiveTo analyse effect of adefovir dipivoxil combined with pegylated interferon on serum Th1/Th2 type cytokines and IgM and IgG antibodies in patients with hepatitis B.Methods52 patients who were diagnosed with chronic hepatitis B in Qian’an Infectious Disease Hospital were collected. All patients were randomly divided into experimental group and control group,26 cases in each group. Patients in control group received treatment with adefovir dipivoxil, patients in experimental group were given pegylated interferon treatment on the basis of control group treatment, after treatment, the serum levels of IFN-γ,IL-4,IgM and IgG were detected in all patients.ResultsAfter treatment, compared with control group, the serum level of IFN-γ was higher in experimental group(P<0.05); the serum level of IL-4 was lower in experimental group(P<0.05); the serum level of IgM and IgG were lower in experimental group(P<0.05).ConclusionAdefovir dipivoxil combined with pegylated interferon can significantly reduce the serum levels of IL-4,IgM and IgG, and improve the serum level of IFN-γ in patients with hepatitis B, reverse Th1/Th2 imbalance.

adefovir dipivoxil; pegylated interferon; hepatitis B; Th1/Th2 type cytokines; IgM; IgG

河北省2014年度医学科学研究重点课题计划(ZD20140127)

刘建涛，通信作者，男，本科，主治医师，研究方向：慢性乙型肝炎的抗病毒治疗、重症肝炎的抢救治疗，E-mail：hebeiliujtao@163.com。

R512.6

A

1005-1678(2015)12-0073-03