双歧杆菌三联活菌散对感染性腹泻患者肠道菌群和炎症因子的影响

曹萍，于成功

(1.南京医科大学鼓楼临床医学院 消化内科，江苏 南京 210000；2.南京大学医学院附属鼓楼医院 消化内科，江苏 南京 210008)



双歧杆菌三联活菌散对感染性腹泻患者肠道菌群和炎症因子的影响

曹萍1，于成功2Δ

(1.南京医科大学鼓楼临床医学院 消化内科，江苏 南京 210000；2.南京大学医学院附属鼓楼医院 消化内科，江苏 南京 210008)

目的 研究双歧杆菌三联活菌散(小培菲康)对感染性腹泻患者肠道菌群和炎症因子的影响。方法 选取2010年10月～2014年10月期间收治120例急性腹泻患者作为研究对象，选取同一时期来进行健康查体的30例作为健康对照组，将患者分为2组：其中小培菲康组60例(小培菲康1 g/次，3次/d)，对照组60例(常规治疗)。比较患者治疗的临床疗效和治疗前后肠道菌群和血清炎症因子的变化。结果 小培菲康组治疗有效率100.00%，对照组有效率96.67%，2组患者的临床疗效比较，差异有统计学意义(χ2=5.52，P<0.05)。2组患者的腹泻、呕吐和发热消失时间比较，差异有统计学意义(P<0.05)，2组患者脱水症状的消失时间差异无统计学意义。与健康对照组相比，治疗前小培菲康组和对照组患者的双歧杆菌、乳杆菌、B/E值较低，肠杆菌计数较高(P<0.05)；治疗后，小培菲康组和对照组患者的双歧杆菌、乳杆菌、B/E值均较治疗前显著上升，肠杆菌计数显著下降(P<0.05)，小培菲康组患者肠杆菌、B/E改善较对照组显著(P<0.05)。治疗前小培菲康组和对照组患者的内毒素、IL-6、TNF-α和CRP水平显著高于健康对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05)；治疗后，2组患者治疗后的内毒素、IL-6、TNF-α和CRP水平显著下降(P<0.05)，其中小培菲康组下降程度较对照组显著(P<0.05)。结论 双歧杆菌三联活菌散可以通过调整肠道菌群和免疫调节作用而发挥作用，促进感染性腹泻患者的恢复。

感染性腹泻；双歧杆菌三联活菌散；肠道菌群；炎症因子

急性感染性腹泻是常见的消化内科疾病，临床上既往将控制感染、消灭病原体作为重要的治疗措施[1]。研究发现，急性感染性腹泻患者多存在肠道菌群的紊乱和细菌内毒素吸收，故微生态制剂在该疾病治疗中的应用价值引起了临床上的重视[2]。本次研究旨在研究双歧杆菌三联活菌散对感染性腹泻患者肠道菌群和炎症因子的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010年10月～2014年10月期间南京大学医学院附属鼓楼医院消化内科收治120例急性腹泻患者作为研究对象，所有患者均符合《中国腹泻病诊断治疗方案》[3]中的成人感染性腹泻诊断标准。所有患者均在腹泻48 h内入院，伴有不同程度的腹痛、发热、恶心呕吐等症状。根据就诊顺序对患者进行编号并采用随机数字表法将患者分为2组：小培菲康组60例，其中男性39例，女性21例，患者年龄21～49岁，平均(38.6±4.8)岁；对照组60例，其中男性41例，女性19例，患者年龄20～50岁，平均(39.7±5.5)岁。2组患者的年龄、性别和病情严重程度比较，差异无统计学意义。

选取同一时期来本院进行健康查体的30例作为健康对照组，其中男性19例，女性11例，年龄22～47岁，平均(38.8±5.1)岁。

1.2 治疗方法 2组患者均采取对症，根据病情给予抗炎、降温、止吐和补液治疗，注意维持患者的水电解质平衡。患者住院期间严格注意饮食卫生，禁止食用生冷、辛辣刺激和油腻食物，保证热量和蛋白质充足。

小培菲康组患者在上述治疗的基础上口服双歧杆菌三联活菌散(上海信谊药厂，批号：20100602)，每次1 g，3次/d，饭后温水冲服。上述治疗持续3 d。

1.3 观察指标

1.3.1 临床疗效：评价标准参照《中国腹泻病诊断治疗方案》[3]。显效：治疗72 h后粪便性能及次数恢复正常，全身症状消失；有效:治疗72 h粪便性能及次数明显好转，全身症状明显好转；无效：治疗72 h后，粪便性能及次数无明显改变或增多，全身症状无明显改善或加剧。总有效率=(显效+有效)/总病例数×100.00%。记录患者的腹泻、呕吐、发热及脱水等症状的消失时间。

1.3.2 肠道菌群的变化[4]：患者治疗前后均采用收集湿便样本置于无菌便盒内，保温后于30 min内送检。肠道菌群检测采用活菌平板计数法，将双歧杆菌、乳杆菌培养基置于厌氧罐中,放入厌氧发生剂然后封闭, 再放入37 ℃恒温培养箱培养48～72 h；肠杆菌、肠球菌培养基直接放入恒温培养箱中培养24～48 h。计数并记录每个平板上的菌落数，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查,以防遗漏。应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度,乘以稀释倍数。肠道定植抗力(colonization resistance, CR)计算采用B/E 值,即双歧杆菌与肠杆菌数值之比[5]。采用相同方法检测健康对照组患者的肠道菌群。

1.3.3 血清炎症因子水平的变化：所有患者入院时和治疗3 d后均抽取静脉血5 mL置于抗凝试管中，离心后分离血清并做好标记，于-80 ℃下保存样本，批量送检。血清内毒素水平检测采用光度测量法，试剂盒由湛江博康海洋生物有限公司(20100807)提供。采用ELISA方法检测大鼠的血清IL-6和TNF-α水平，试剂盒由郑州安塞生物科技有限公司提供(批号：20101007)。CRP测量采用免疫增强比浊法，试剂盒由南京诺尔曼生物技术有限公司提供(批号：20100902)。同时检测健康对照组患者血清炎症因子水平。上述操作由本院检验科协助完成。

2 结果

2.1 2组患者的临床疗效比较 治疗后，小培菲康组47例患者治疗显效，13例患者治疗有效，治疗有效率100.00%，对照组34例患者治疗有效，24例患者治疗显效，有效率96.67%，2组患者的临床疗效比较，差异有统计学意义(χ2=5.52，P<0.05)，见表1。

表1 2组患者的临床疗效比较 [n(%)]Tab.1 Comparison of clinical efficacy between the two groups [n(%)]

△P<0.05，与对照组相比，compared with control group after treatment

2.2 症状消失时间 2组患者的腹泻、呕吐和发热消失时间比较，差异有统计学意义(P<0.05)，脱水症状的消失时间差异无统计学意义，见表2。

表2 2组患者的症状消失时间±s，h)Tab.2 Comparison of symptom disappearance time between two groups ±s，h)

△P<0.05，与对照组相比，compared with control group after treatment

2.3 各组的肠道菌群比较

治疗前与健康对照组相比，小培菲康组和对照组患者的双歧杆菌、乳杆菌、B/E值较低，患者肠杆菌计数较高，差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后，小培菲康组和对照组患者的双歧杆菌、乳杆菌、B/E值均较治疗前显著上升，肠杆菌计数显著下降，差异有统计学意义(P<0.05)，小培菲康组患者肠杆菌、B/E改善较对照组显著，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表3 各组的肠道菌群比较湿便)Tab.3 Comparison of intestinal flora among different groups ±s，logCFU/g wet excrement)

#P<0.05，与健康对照组相比，compared with healthy control group；*P<0.05，与治疗前相比，compared with before treatment；△P<0.05，治疗后与对照组相比，compared with control group after treatment

2.4 各组血清炎症因子水平比较 治疗前与健康对照组相比，小培菲康组和对照组患者的内毒素、IL-6、TNF-α和CRP水平较高，差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后，2组患者治疗后的内毒素、IL-6、TNF-α和CRP水平较治疗前显著下降，差异有统计学意义(P<0.05)，其中小培菲康组下降程度较对照组显著，差异有统计学意义(P<0.05)， 见表4。

表4 各组血清炎症因子水平比较±s)Tab.4 Comparison of inflammation factors level among different ±s)

#P<0.05，与健康对照组相比，compared with healthy control group；*P<0.05，与治疗前相比，compared with before treatment；△P<0.05，治疗后与对照组相比，compared with control group after treatment

3 讨论

急性感染性腹泻是由病原微生物感染引起的腹泻，患者常存在严重的菌群失调，肠道内环境发生紊乱，肠道屏障功能下降[6]。本次研究中，旨在研究双歧杆菌三联活菌散对感染性腹泻患者肠道菌群和炎症因子的影响。

研究中，与健康人群相比，感染性腹泻患者的双歧杆菌和乳杆菌数量下降，而肠杆菌数量上升，患者B/E值下降。B/E值即为双歧杆菌和肠球菌的比值，可以反映内源性厌氧菌对致病菌的抑制能力，用以反映生物学屏障功能。B/E值小于1提示肠道的抗感染能力受损。感染性腹泻的患者肠道B/E值平均值明显降低，提示患者的肠道生物学屏障作用受损[7-8]。

研究结果显示，感染性腹泻患者血清中的内毒素水平和炎性因子水平明显上升。C反应蛋白是衡量炎症反应的重要指标，作为一种急性时相反应蛋白，它对感染，损伤等非特异性的炎症反应具有较高的诊断价值[9]。与健康人相比，感染性腹泻患者的CRP水平明显上升，说明患者体内存在严重的炎症反应。其原因如下：肠道内的微生物代谢持续产生内毒素，当机体防御功能下降时，病原体可以侵入肠道上皮刷状缘，在细胞外繁殖产生肠毒素。正常情况下，肠道黏膜的屏障功能可以阻止内毒素的吸收，但感染性患者存在肠道菌群紊乱，内毒素可以通过肠道黏膜上皮进入血液[10-11]。既往研究显示，内毒素是TNF-α产生的最强诱导因子。由于细菌、炎症反应和内毒素的共同刺激，机体巨噬细胞和T细胞活化，大量TNF释放入血。TNF-α在机体感染性疾病的发生和发展中发挥重要作用，可以促进机体释放IL-6、IL-8和血小板活化因子，而后者可以正反馈作用于单核巨噬系统，促进TNF的释放，放大机体炎症反应[12]。因此，纠正肠道菌群紊乱、清除内毒素和控制炎症反应在急性感染性腹泻的治疗中具有重要意义。

本次研究中，经过抗炎、降温、止吐和补液等治疗后，患者的病情明显好转，治疗具有一定的效果。与对照组相比，小培菲康组患者疗效更为明显，患者治疗后的肠杆菌计数、TNF-α、IL-6和CRP下降更为明显，而B/E值基本恢复至正常水平。小培菲康内含有双歧杆菌、乳杆菌和肠道粪球菌，上述菌群分口服后分别定植于肠道上、中、下部，改善肠道的屏障功能，从而抑制内毒素的吸收并减轻与内毒素相关的肠粘膜损伤[13]。同时，双歧杆菌、乳杆菌和肠道粪球菌等益生菌可以激活肠道局部的淋巴组织，增强腹腔内的巨噬细胞活性，发挥免疫调节作用，抑制机体的炎性反应[14]。综上所述，小培菲康可以通过调整肠道菌群和免疫调节作用而发挥作用，改善感染性腹泻患者的症状。

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(编校：谭玲)

Effect of triple viable bacterium of bacillus on intestinal microflora and inflammation factors in patients with infectious diarrhea

CAO Ping1, YU Cheng-gong2Δ

(1. Department of Gastroenterology, Drum Tower of Clinical Medicine, Nanjing Medical University, Nanjing 210000, China; 2. Department of Gastroenterology, The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School, Nanjing 210008, China)

ObjectiveTo study effect of triple viable bacterium of bacillus (small peifeikang) on the intestinal microflora and inflammation factors in patients with infectious diarrhea. MethodsFrom October 2010 to October 2014, 120 patients with infectious diarrhea were chosen as study objects, 30 cases of health examination were selected as healthy control group, All patients were divided into 2 groups: 60 patients in small peifeikang group and 60 patients in control group. The therapeutic effect and the change of intestinal microflora and inflammation factors were compared between two groups. ResultsThe effective rate of small peifeikang groupwas 100.00%, while that of control group was 96.67%,the difference had statistical significance(χ2=5.52,P<0.05). The symptom disappearance time of diarrhea, vomiting and fever had statistical difference between two groups (P<0.05), that of dehydration had no statistical significance. After treatment, in small peifeikang group and control group, the number of bifidobacterium, lactobacillus, and B/E value had decreased significantly (P<0.05), and the number of intestinal bacteriahad increased significantly(P<0.05).The distribution of intestinal flora in small peifeikang group was better than that of control group, and the difference had statistical significance(P<0.05).After treatment, in small peifeikang group and control group, the level of endotoxin, IL - 6, TNF-α and CRP had decreased significantly(P<0.05). The extent of decreasing in small peifeikang group was more significant than that of control group, and the difference had statistical significance(P<0.05).ConclusionThe triple viable bacterium of bacillus can promote the recurrence of patients with infectious diarrhea by adjusting the distribution of intestinal microflora, and by its immune regulation function.

infectious diarrhea; triple viable bacterium of bacillus;intestinalmicroflora; inflammation factors

曹萍，女，硕士，研究方向：炎症性肠病与肠道菌群的关系，E-mail： caoping0513@163.com；于成功，通讯作者，男，博士，教授，研究方向：炎症性肠病，E-mail：yuchenggong0110@163.com。

R574

A

1005-1678(2015)06-0062-04