滁菊挥发油的抗炎实验研究

刘保华，汪冬庚，周国梁

(1.南通大学药学院，江苏南通 226001;2.安徽科技学院食品药品学院，安徽凤阳 233100)

滁菊挥发油的抗炎实验研究

刘保华1，汪冬庚1，周国梁2

(1.南通大学药学院，江苏南通 226001;2.安徽科技学院食品药品学院，安徽凤阳 233100)

为研究滁菊挥发油的抗炎作用，采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致大鼠足跖肿胀、大鼠纸片肉芽肿模型观察滁菊挥发油对急、慢性炎症的影响。结果表明，滁菊挥发油对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致大鼠足跖肿胀和大鼠纸片肉芽肿等急、慢性炎症均有明显的抑制作用。

滁菊挥发油;抗炎;耳廓肿胀;足跖肿胀;纸片肉芽肿

滁菊，菊科多年生草本菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的干燥头状花序［1］，为我国四大名菊(滁菊、杭菊、徽菊、亳菊)之一。滁菊性温和，气味清香，既可入药，又可作清凉饮料。作为清凉镇静剂及眼科用药，可辅助治疗多种疾病，具有发散风热、清肝明目、平抑肝阳、清热解毒等功效，临床主要用于外感风热、发热头痛、目疾、眩晕和疔疮肿毒的治疗。

滁菊的主要成分为挥发油、黄酮类化合物、氨基酸、微量元素等。国内外对菊花的分类、鉴定、有效成分、药理、临床等方面的研究较多。近年来，有关滁菊总黄酮的解热抗炎的研究较多，而关于挥发油的研究较少，尤其是挥发油的抗炎作用研究。鉴于此，作者从急性实验和慢性实验入手，采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致大鼠足跖肿胀、大鼠纸片肉芽肿模型对滁菊挥发油的抗炎作用进行研究。

1 实验

1.1 试剂与仪器

地塞米松磷酸钠(批号1007043)，江苏涟水制药有限公司;戊巴比妥钠(批号061206)，北京化学试剂公司;滁菊挥发油(VOCJ)注射液，自制;生理盐水，安徽丰原药业股份有限公司;二甲苯，淮南市化学试剂厂;80万单位注射用青霉素钠(批号1001247)，华北制药股份有限公司;10%新鲜蛋清，自制。

直径为6 mm的打孔器;PV-200型足跖容积测量仪，成都泰盟科技有限公司;DHG-718型电热恒温培养箱，黄石市医疗器械厂;FA21048型电子天平，上海民桥精密科学仪器有限公司。

1.2 实验动物

Waster大鼠，雄性，体重150～190 g，80只;昆明种小鼠，雄性，体重18～22 g，40只，均购自安徽长临河医药有限公司。

1.3 滁菊挥发油的提取

取80～100目的滁菊50 g，精密称量后，置于1 000 mL圆底烧瓶中［2］，加入700 mL饱和氯化钠溶液浸泡10 h。振荡，充分混合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管，自冷凝管上端加水充满挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止［2-3］。将烧瓶置于电炉上加热至沸，调温并保持微沸13 h。停止加热，放置片刻，开启测定器下端活塞将水缓缓放出，收集挥发油，无水硫酸钠脱水，得到绿色的滁菊挥发油［4］。

1.4 滁菊挥发油注射液的制备及剂量确定

向滁菊挥发油中加0.5%的吐温80助溶，根据其在生理盐水中的最大溶解度配成注射液。然后以2倍稀释配制成系列浓度药液，分别得到2%、1%、0.5%、0.25%、0.125%的滁菊挥发油注射液。

选择健康小鼠，每组10只，按0.2 mL·(10 g)-1剂量腹腔注射给药，观察小鼠的中毒症状。发现在滁菊挥发油注射液浓度为2%时，小鼠仍然不会致死，而浓度低于0.25%时效果不明显，表明滁菊挥发油注射液应用安全可靠［5］。综合考虑，选择滁菊挥发油注射液浓度为1%。

1.5 抗炎实验

1.5.1 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验

分组:选择健康小鼠40只，随机分为4组，即滁菊挥发油高剂量组、滁菊挥发油低剂量组、阴性对照组、阳性对照组，每组10只。均为腹腔注射给药，阳性对照组按每10 g体重0.1 mL量给地塞米松磷酸钠溶液;阴性对照组给等量的生理盐水溶液，每日1次，连续3 d。

末次给药后1 h，分别于每只小鼠左耳均匀涂抹二甲苯50μL，右耳作对照。1 h后颈椎脱臼处死小鼠，沿耳廓剪下两耳，用6 mm直径的打孔器在同一部位打下耳片［6］，电子天平称量，按式(1)、(2)计算耳廓肿胀度和肿胀率。

1.5.2 蛋清致大鼠足跖肿胀实验

分组:阳性对照组按每100 g体重0.1 mL量给地塞米松磷酸钠生理盐水溶液，其它同1.5.1方法。

末次给药后0.5 h，于大鼠右踝关节处标记，采用容积法测定大鼠正常足跖的容积。然后分别于每只大鼠的右后足跖皮下注射10%新鲜蛋清生理盐水溶液0.1 mL致炎［7］，再分别于致炎后30 min、60 min、90 min、120 min、180 min用容积法测定大鼠足跖容积，按式(3)、(4)计算大鼠足跖肿胀度和肿胀抑制率［8-9］。

1.5.3 大鼠纸片肉芽肿实验

分组:按1.5.1方法分成4组。将干燥至恒质量的滤纸片经高温、高压灭菌后，用1 mg·(0.1 mL)-1的80万单位青霉素生理盐水溶液浸泡，置于50℃烘箱内烘干。将大鼠用2%戊巴比妥钠生理盐水溶液按3 mg·(100 g)-1麻醉后，在无菌条件下于脊柱正中切口，将纸片植入大鼠脊柱两侧皮下。术后当日灌胃给药，每日1次，连续7 d。

第7 d用戊巴比妥钠将大鼠麻醉，将纸片连同周围结缔组织一起取出，除去脂肪组织，称重(肉芽组织干质量)。然后将纸片置于60℃烘箱内干燥24 h，称重(肉芽肿总干质量)，减去原纸片质量，即为肉芽肿净干质量(以100 g体重计)，按式(5)、(6)计算干质量抑制率，并进行组间比较［10］。

2 结果与讨论

2.1 滁菊挥发油对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(表1)

表1 滁菊挥发油对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响Tab.1 Effects of Chrysanthemum morifolium volatile oil on xylene-induced mouse ear edema

由表1可知，与阴性对照组比较，滁菊挥发油高剂量组和低剂量组均有抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀的作用，而且高剂量组的肿胀率接近阳性对照组，抗炎效果明显。

2.2 滁菊挥发油对蛋清致大鼠足跖肿胀的影响(表2)

表2 滁菊挥发油对蛋清致大鼠足跖肿胀的影响(n=10)Tab.2 Effects of Chrysanthemum morifolium volatile oil on egg white-induced rat paw edema(n=10)

由表2可知，与阴性对照组比较，滁菊挥发油高剂量组和低剂量组都有明显的抑制蛋清致大鼠足跖肿胀的作用，高剂量组效果更明显［10］。

2.3 滁菊挥发油对大鼠纸片肉芽肿的影响(表3)

表3 滁菊挥发油对大鼠纸片肉芽肿的影响Tab.3 Effects of Chrysanthemum morifolium volatile oil on rat paper granuloma

由表3可知，与阴性对照组比较，滁菊挥发油高剂量组和低剂量组均有明显的抑制大鼠慢性炎症的作用，并且高剂量组的效果明显高于低剂量组(P＜0.05)。

2.4 讨论

炎症反应可分为早期、中期和晚期，即血管反应、细胞反应和组织增生等3个阶段。早期炎症的主要表现有毛细血管扩张、通透性亢进、渗出和水肿;中期炎症表现为白细胞向炎灶聚集;晚期炎症主要特点是炎灶屏障形成和组织增生［11］。本实验结果表明，滁菊挥发油有很强的抗炎作用，其抗炎机制可能与影响小鼠毛细血管的通透性、提高毛细血管抵抗力、抑制炎症介质组胺和羟色胺的释放有关。

3 结论

滁菊挥发油对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致大鼠足跖肿胀和大鼠纸片肉芽肿有明显的抑制作用，表明其对急、慢性炎症均有一定的抑制作用，这与滁菊挥发油的清热解毒、抗菌、抗炎等功效是一致的，为临床应用滁菊治疗外感风热、发热头痛、目疾、眩晕和疔疮肿毒的进一步研究提供了理论依据，同时也说明滁菊挥发油是滁菊中不可忽视的有效成分之一［11］。

［1］ 王春霞，陈志良.菊花的药理和临床应用研究［J］.广东医学，2005，26(12):1740-1741.

［2］ 周国梁，张娜，刘汉珍，等.滁菊挥发油提取工艺研究［J］.中兽医医药杂志，2012，31(2):5-8.

［3］ 王文基.怀菊花挥发油的提取及其在卷烟加香中的应用研究［D］.郑州:河南农业大学，2010.

［4］ 张菲菲，马永建，孙桂菊，等.菊花挥发油提取工艺研究［J］.时珍国医国药，2008，19(4):834-836.

［5］ 李琳琳.药理学实验指导［M］.第二版.北京:科学出版社，2006: 70-73.

［6］ 王棋文.炎毒热清毒理学及药效学初步评价［D］.兰州:甘肃农业大学，2009.

［7］ 熊敏，张荫杰，徐世军，等.感毒清颗粒抗炎镇痛作用研究［J］.中药药理与临床，2012，28(3):89-92.

［8］ 陈奇.中药药理研究方法学［M］.北京:人民卫生出版社，1994: 904.

［9］ 覃仁安，梅璇，陈敏，等.鹅不食草挥发油抗炎作用及机制研究［J］.中国医院药学杂志，2006，26(4):369-371.

［10］ 徐世军，沈映君，解宇环.桂枝挥发油的抗炎实验研究［J］.中药新药与临床药理，2000，18(5):186-189.

［11］ 徐世军.桂枝挥发油对TLR2、TLR4基因表达及其信号转导通路的影响［D］.成都:成都中医药大学，2006.

Experimental Study on Anti-Inflammatory Effect of Chrysanthemum Morifolium Volatile Oil

LIU Bao-hua1，WANG Dong-gen1，ZHOU Guo-liang2
(1.College of Pharmacy，Nantong University，Nantong 226001，China; 2.School of Food and Drug，Anhui Science and Technology University，Fengyang 233100，China)

To study anti-inflammatory effect of Chrysanthemum morifolium volatile oil，the effects of Chrysanthemum morifolium volatile oil on acute and chronic inflammation were investigated by xylene-induced mouse ear edema，egg white-induced rat paw edema and rat paper granuloma models.Results showed that，Chrysanthemum morifolium volatile oil had significant inhibitory effect to xylene-induced mouse ear edema，egg white-induced rat paw edema and rat paper granuloma.

Chrysanthemum morifolium volatile oil;anti-inflammatory;ear edema;paw edema;paper granuloma

R 284.2

A

1672-5425(2015)02-0057-03

10.3969/j.issn.1672-5425.2015.02.014

2014-10-27

刘保华(1990-)，女，安徽舒城人，硕士研究生，研究方向:中药分析与药理研究，E-mail:liubaohua19891203@163.com;通讯作者:汪冬庚，副教授，E-mail:wdg1228@126.com。