蒙医灸疗对失眠模型小鼠脑组织一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

乎宝力格

（内蒙古民族大学附属医院，内蒙古通辽028007）

蒙医灸疗对失眠模型小鼠脑组织一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

乎宝力格

（内蒙古民族大学附属医院，内蒙古通辽028007）

目的 探讨施灸“赫依穴”“顶会穴”对睡眠紊乱模型小鼠脑组织中一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）的影响。方法 将36只小白鼠随机分为空白对照组、模型组、治疗组3组，每组12只，模型组与对照组反复定时腹腔内注射咖啡因致小鼠睡眠节律紊乱，治疗组施灸“赫依穴”与“顶会穴”。观察各组小鼠自发活动次数与站立数，检测小鼠脑组织中NO含量与NOS活性。结果 各组小鼠站立次数与自主活动次数比较：治疗组与空白对照组之间无统计学意义（P＞0.05）；与模型组比较空白组和治疗组均有统计学意义（P＜0.05）。各组小鼠脑组织中NO含量和NOS活性比较：治疗组与空白对照组之间无统计学意义（P＞0.05）；与模型组比较，空白对照组和治疗组均有统计学意义（P＜0.05）。结论 蒙医灸疗对睡眠紊乱模型小鼠具有镇静催眠作用，其机制可能是通过阻抑NOS诱导产生过量的NO起到神经保护作用。

蒙医灸疗；镇静催眠；穴，赫依；穴，顶会

睡眠是生命所必须的过程，是人类健康不可缺少的部分。睡眠除了可以消除疲劳，使人体产生新的活力外，还与提高免疫力，抵抗疾病的能力有密切联系，睡眠质量直接影响着人类生活质量的高低［1］。失眠症是睡眠的始发与睡眠的维持发生了障碍，导致睡眠质量不能满足个体生理需要而影响患者白天活动（比如注意力下降、疲劳、反应迟钝等）的一种睡眠障碍综合征。随着现代生活节奏的加快和社会竞争压力的加剧。失眠症的发生率逐年增高，据报道［2－3］，2002年全球失眠调查显示，我国失眠症患者占普通人群的45.4%。因此失眠症的防治与每个人的生活息息相关。

蒙医灸疗是通过在特定穴位上用艾条、艾柱、艾粒等灸具行热刺激，达到预防、治疗、保健康复作用的硬疗法。灸疗有温通经脉、调和气血、调理体质、增强抵抗力以防治疾病的作用。具有安全、经济、疗效肯定和无毒副作用等优点。对失眠症、胃火衰败、消化不良、浮肿、痞证、胃脘疼痛、慢性结肠炎、风湿类疾病、疖痈、炭疽、虚热病、癔病、癫狂、健忘症、抗防衰老等多种疾病疗效显著［4］。本实验拟用蒙医灸疗法取有效腧穴“赫依穴”（位于第7颈椎棘突与第1胸椎棘突间隙窝中，即中医大椎穴）、“顶会穴”（位于从两眉正中往上划一线，再从两耳叶上缘正中往上划一线，此二线在头顶之交叉处便是，即中医百会穴）作用于睡眠紊乱模型小鼠，并对其治疗作用加以验证，为进一步研究失眠的治疗机制奠定基础，为失眠病证的辨证施治提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料 动物：SPF级昆明种小白鼠，雌雄各半，体质量（20±2）g，由吉林大学实验动物中心提供，动物合格证号为SCXK（吉）2011－0004。药物：咖啡因，由内蒙古民族大学化学学院化学实验室提供。主要仪器设备：AUW120D型岛津电子天平（日本）；TTL－2C型超纯水制备仪（北京同泰联科技发展有限公司）；ZZ－6小鼠自主活动测定仪（成都泰盟科技有限公司）。紫外可见分光光度计（755B、上海清华），自粘式艾灸柱（商品名：神灸，苏州东方艾绒厂出品）直径4 mm，长1 cm，灸垫厚度2 mm。

1.2 方法 购买小鼠后在饲料充足、无干扰的睡眠条件下饲养7 d。称重后随机分为空白组、模型组、治疗组共3组，每组12只。治疗组与模型组：腹腔注射小剂量咖啡因（2.0 mg／kg），连续注射7 d；空白对照组：经腹腔注射生理盐水（10.0 mL／kg），连续注射7 d；动物出现毛皮枯槁，举肢、理毛、走动等次数明显，不能安卧等外部特征，与文献［5］报道一致，即造模成功。治疗组：第8天起开始施灸，参照文献［6－7］记载，剪去小鼠顶会穴、赫依穴周围鼠毛，第1天顶会穴，第2天赫依穴依次进行施灸，时间5 min，每次行3艾柱，共施灸14 d。模型组和空白组第8天起按程序只抓取不施灸，连续14 d。

1.3 指标检测 各组动物实验第15天用自主活动测定仪测试10 min内动物的活动次数和站立次数。之后各组小鼠脱臼处死，即刻剥离出脑（除掉小脑）组织备用。脑组织中NOS活性与NO含量测定分别依据NOS、NO测定试剂盒使用说明书进行。

1.4 统计学处理 用SPSS 17.0统计软件处理数据，结果用均数±标准数（¯x±s）表示，2组间资料比较采用单因素方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对小鼠自主活动的影响 治疗结束后用自主活动测定仪测10 min内动物的自发活动次数与站立次数。结果示：模型组与其他2组比较自发活动次数与站立次数明显增多（P＜0.05）。治疗组与空白组比较无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 治疗后小鼠自发活动次数与站立次数的比较（¯x±s，n＝12）次

2.2 对小鼠脑组织中NO含量与NOS活性的影响治疗组与空白对照组比较差异无统计学意义，空白对照组和治疗组与模型组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 治疗后小鼠脑组织中NO含量与NOS活性的比较（¯x±s，n＝12）

3 讨论

蒙医学认为，人体之所以能够维持正常的生理活动是因为体内具有3种能量和基本物质，即：赫依、协日、巴达干。这3种物质是人体生命的本源、根本，故称之为三根。其中，赫依是人体维持健康和延年益寿的引导者，也是保持协日与巴达干两根相对平衡的调节者。赫依具有轻、动、涩、凉、细、坚等6种特性，称其为赫依的秉性。如果与赫依之6种特性相类似，诱发疾病的4个条件（气候变化、饮食、起居、突发因素）过分时，致使赫依之特性偏盛而失去相对平衡状态。因此，赫依具有思维并保持神志安定的功能。若赫依的功能正常，则人的神志、思辨能力、精神等就正常［8］。

蒙医学认为赫依与血相搏是导致失眠的主要原因，心与白脉是主要病位。凡是悲伤过度、劳累、过于激动、出血过多等因素使赫依偏胜，客于心脏，或精神受到强烈刺激、暴怒等因素使赫依与血相搏，客于白脉，引起气血运行失常而导致失眠。而施灸“赫依穴”与“顶会穴”具有抑制赫依，疏通赫依与血之运行之路、促进白脉传导、宁心安神等功效。在临床实践中也证明了针灸“赫依穴”与“顶会穴”对赫依偏盛引起的疾病有较好的疗效［8］。

现代研究［9－14］证实，一氧化氮（NO）含量与人的精神系统、神经系统等各系统有密切联系。NO一方面是一种反应性极强的自由基，另一方面又兼有第二信使和神经递质的作用，调节多种病理生理过程。而NO含量的变化主要取决于一氧化氮合酶（NOS）活力。NOS分为神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）等3个亚型。而nNOS主要存在于神经细胞内，因此，探讨大鼠脑组织中NO、NOS与失眠的关系具有一定的临床意义。

本课题通过施灸睡眠紊乱模型小鼠“赫依穴”与“顶会穴”，观察小鼠一般生存状态、自发活动、站立次数，检测脑组织中NO含量和NOS活性指数，初步探讨了蒙医灸疗镇静作用及其机理。结果显示，施灸“赫依穴”与“顶会穴”可改善睡眠紊乱小鼠一般生活状态［15］；经统计：模型组与其他2组比较自发活动次数和站立次数明显增多（P＜0.05），NO含量和NOS活性增高（P＜0.05）；空白组与治疗组比较自发活动次数和站立次数差异无统计学意义（P＞0.05），NO含量和NOS活性差异无统计学意义（P＞0.05）。证实了顶会穴与赫依穴主治夜不安眠、白昼嗜眠的记载［2］，验证了蒙医灸疗的镇静催眠作用及其机理。其作用机理可能是通过阻抑脑组织中NOS诱导产生过量的NO，起到神经保护作用。

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Effect of moxibustion of Mongolian medicine on nitricoxide and nitric oxide synthase in brain tissue of mice model of insomnia

HU BAO Li Ge
（Affiliated Hospital of Inner Mongolia University for Nationalities，Tongliao 028007，Neimenggu Province，China）

Objective To investigate the Moxibustion“point，Heyi”“point，Dinghui”on sleep disorder mice brain tissues of NO and NOS effect．Methods The 36 mice were randomly divided into blank control group，model group，treatment group three groups，12 rats in each group，model group and control group repeated intraperitoneal injection of caffeine in mice induced by the timing of sleep rhythm disorder，the treatment group Moxibustion“Heyi point”and“Dinghui point”．The mice were observed the times of spontaneous activities and stand number，NO content and NOS activity in brain tissue of mice were detected in．Results compared mice the number of standing and independent activity times：there is no significant difference between treatment group and blank control group（P＞0．05），compared with the model group，the blank group and the treatment groups were significantly different（P＜0．05）；the comparison of NO content and NOS activity in brain tissue of mice in each group：there was no significant difference in between treatment group and blank control group（P＞0．05），compared with the model group，blank control group and the treatment groups were significantly different（P＜0．05）．Conclusion Moxibustion of Mongolian medicine has sedative and hypnotic effects on sleep disturbance model mice，may be induced to produce excessive NO by inhibiting NOS，play a neuroprotective effect．

moxibustion of Mongolian medicine；sedative and hypnotic；point，Heyi；point，Dinghui

R285.5

A

2095－6258（2015）03－0457－03

2014－12－06）

10．13463／j．cnki．cczyy．2015．03．007

内蒙古民族大学青年基金（MDX2009069）。

乎宝力格（1978－），女，硕士，主治医师，主要从事蒙医传统疗术学研究。