火焰原子吸收法测定傣药人面果树茎皮中7种微量元素的含量

杨 丽，董 伟,周 堃,王月德,刘晓芳,叶艳青

(云南民族大学 民族药资源化学国家民委-教育部重点实验室，云南 昆明 650500)

火焰原子吸收法测定傣药人面果树茎皮中7种微量元素的含量

杨 丽，董 伟,周 堃,王月德,刘晓芳,叶艳青

(云南民族大学 民族药资源化学国家民委-教育部重点实验室，云南 昆明 650500)

采用传统消解法对傣药人面果树茎皮进行消解,并在火焰原子吸收分光光度计最佳工作条件下,用外标法测定药中锌、铜、锰、钴、铁、铅、镉7种微量元素的含量,并计算其溶出率.结果显示,7种元素在原药及汤剂中的含量不同,其含量顺序为Fe>Cu>Mn>Zn>Pb>Co>Cd.它们的溶出率也有一定差异,Cd的溶出率最大,Zn的溶出率最小.实验检出限均小于 0.003 8 μg/mL,加标回收率在93.25%～109.6%之间,相对偏差RSD≤2.90%,测定的结果精密度和准确度令人满意,可为傣药人面果树的有效成分研究提供基础数据.

原子吸收;人面果树;微量元素;溶出率

藤黄属(Garciniagenus)植物隶属于藤黄科,亦称山竹子属,约有450种,多为乔木或灌木,主要分布于东半球热带地区,生长在温暖多湿的热带密林中.我国有21种,主要分布于云南、广西、广东、海南、台湾和西藏及沿海部分地区[1].人面果(garciniaxanthoymus)高达10～20 m,是我国传统傣药之一,生于海拔100～1 000 m的沟谷、丘陵、潮湿的密林中,主要分布在云南南部和西南部.人面果作为藤黄科植物,大叶藤黄,其茎、叶、浆汁、茎皮和种子,具有驱虫、清火退热、解食物中毒之功效.研究表明人面果还具有较广泛的生物活性,如抗癌、抗细胞毒素、抗HIV病毒等,也可以用于治疗腹泻,痢疾及肝胆疾病[2].

无机元素是人体必不可少的,缺少无机元素会引起人体不适[3],而无机元素中的微量元素更是关键,近年来人们对中成药、药食同源食品的微量元素的研究与探讨日渐深入[4],得到了医学界和营养学家的高度重视[5].现代医学已证明,微量元素与人体健康、疾病防治有着密切的关系[6],对中药中微量元素含量及溶出率的研究,不仅能了解微量元素的含量及其存在状态,而且对于中药质量的评价和指导临床合理用药都具有重要的现实意义[7].本研究对人面果中7种元素的含量及溶出率进行了测定,旨在为探讨人面果中微量元素与药效的关系提供科学依据.

1 实验部分

1.1 试剂及材料

浓硝酸,浓盐酸,30% H2O2均为分析纯;人面果树茎皮原药,购于云南省西双版纳傣族自治州民族医药研究所;多种元素标准储备液购于国家钢铁材料测试中心,质量浓度均为 1 000 μg/mL.

1.2 实验仪器

AA-6300型原子吸收分光光度计(日本岛津公司);电子天平(奥豪斯仪器上海有限公司)；101-电热恒温干燥箱(上海仪器厂有限公司);DB-3自动恒温不锈钢电热板(常州国华仪器有限公司);WL-200高速中药粉碎机(瑞安市威力制药机械厂);EPED-20TH实验超纯水器(南京易普易达科技发展有限公司).

火焰原子吸收分光光度计工作条件如表1.

表1 火焰原子吸收分光光度计工作条件

1.3 实验方法

1.3.1 绘制各元素标准曲线的线性范围如表2.

表2 各元素配制质量浓度的线性范围

对试样空白测定12次,计算其标准偏差,以3倍空白值的标准偏差比上标准曲线的斜率作为检出限.各种元素的检出限,线性回归方程及相关系数见表3.

表3 线性回归方程及相关系数

1.3.2 样品处理

人面果树茎皮原药用自来水快速冲洗干净后,用蒸馏水洗2～3次,再用超纯水洗净,置于60～65 ℃烘箱中烘干,取出后粉碎,过0.441 nm的筛,将筛好的粉末置于密封袋中备用.

准确称取粉碎的人面果树茎皮药用样品4份,每份5 g(精确至 0.000 1 g)于100 mL烧杯中,加20.00 mL的浓硝酸浸泡过夜,次日加入高氯酸5.00 mL,盖上表面皿,于电热板上加热消解,将溶液消解至2 mL左右,加入5～6滴30% H2O2,直至消解液澄清透明后冷却,冷却后移至25 mL容量瓶中,用超纯水定容至刻度,待测.随即在给定的条件下用火焰原子吸收法测量原生药中各元素的含量.

准确称取粉碎的人面果树茎皮药用样品4份,每份5 g(精确至 0.000 1 g)放入100 mL烧杯中,加入60.00 mL超纯水,在电炉中用大火加热至沸腾后改文火慢煎,将其维持微沸40 min后冷却过滤;滤渣再加60.00 mL超纯水同法煎煮,过滤;滤渣再加70.00 mL超纯水依上法得水煎液.合并3次滤液,文火浓缩至20 mL,冷却,依上法消解,定容至25 mL,待测.随即在给定的条件下用火焰原子吸收法测量汤剂中各元素的含量.

1.3.3 消化试剂及消化条件的选择

消解试剂使用最广泛的酸是HNO3、HCl、HF、HClO4等,其中HNO3是一种强氧化剂,广泛地用来释放生物样品中的痕量元素.为了完全破坏复杂的有机基体往往需要120 ℃以上的温度,或加其它氧化剂,如H2O2和HClO4.本实验选择HNO3和HClO4的混酸体积比(4∶1)作为消解试剂,采用逐步升温的方法(120～160 ℃),当消化液呈浅黄色后加入5～6滴30% H2O2即可完全消解.

2 结果与分析

2.1 样品测定结果

由表4中测定结果可知,人面果树茎皮中所测各元素的溶出率相差不大,都在50%左右.

表4 样品测定结果(n=4)

2.2 回收率实验

为了考察方法的可靠性,做了加标回收试验,结果见表5.

表5 回收率试验结果(n=4)

由表5可知,该方法测定人面果树茎皮中锌、铜、锰、钴、铁、铅、镉均有较好的回收率.

3 结果与讨论

1) 本次实验用电热板从120～160 ℃逐步升温消解法处理人面果树茎皮药材,具有设备简单安全、操作简便、消解完全等特点,实验得出的数据表明精密度和准确度良好；

2) 人面果树茎皮中富含铁元素,铁是血红蛋白的组成元素[8],人体缺铁会导致贫血[9],较严重的还影响智力和体格的发育,导致消化功能障碍并影响营养物质吸收,影响免疫功能[10]；

3) 不同地区地壳表面所含无机矿物质各不相同,因此,同种物种中元素的含量差异也很大.中药多以水煎液服用,由于各种微量元素在中药中的存在形态不同,他们在水煎液中的溶出率也不同,因此,我们对水煎液中微量元素的溶出率进行测定,有助于对中药汤药及其药效的进一步研究.

[1] 钟芳芳,梅之南,杨光忠,等.傣药人面果化学成分研究[J].中国民族医药杂志,2008(2):46-47.

[2] 钟芳芳,赵应红,陈玉,等.人面果树皮中新酚性成分的研究[C]//第九届全国中药和天然药物学术研讨会大会报告及论文集.南昌,2007:600-602.

[3] 罗雯,马金晶,张龙旺,等.微波消解-ICP-MS测定傣药嘎哩啰树皮中的11种无机元素[J].光谱学与光谱分析,2012,32(9):2562-2565.

[4] 李加林,吴素珍,李银保,等.中药槐米和远志中微量元素的测定[J].时珍国医国药,2008,19(2):332-333.

[5] 韩丽琴,董顺福,刘建华.治疗呼吸系统疾病中草药微量元素含量测定[J].光谱学与光谱分析,2008,28(2):453-455.

[6] 张辰露,李崇勇.中药娑罗子中微量元素的光谱分析[J].时珍国医国药,2010,21(5):1171-1172.

[7] 侯洪波,徐娟,杨保海,等.火焰原子吸收法测定中草药云南黄花稔中微量元素含量[J].微量元素与健康研究,2013(4):19-20.

[8] 李鸿举.关于人类记忆思维存在于线粒体(生物铁氧体)的推论[J].医药前沿,2013,7(19):46-47.

[9] 丁天凌,陈勤奋.输血依赖性铁过载的评估及治疗进展[J].中国输血杂志,2010,23(6):421-423.[10] 许琳,李蕤,余庭华.高血压患者血尿酸和血脂水平的相关探讨[J].国际检验医学杂志,2011,32(11):1261-1262.

(责任编辑 庄红林)

Study on the contents and the dissolution rate of the seven microelements in the stem ofGarciniaxanthochymus

YANG Li,DONG Wei,ZHOU Kun,WANG Yue-de,LIU Xiao-fang,YE Yan-qing

(Key Laboratory of Chemistry in Ethnic Medicinal Resources,State Ethnic Affairs Commission and Ministry of Education of China,Yunnan Minzu University,Kunming 650031,China)

This research aims to determine the dissolution rate of seven microelements in the stem of Garcinia xanthochymus by the traditional method of wet digestion. The metal ions (Zn,Cu,Mn,Co,Fe,Pb,Cd) in the digested samples are determined by the Flame Atomic Absorption Spectrometry. The result shows that the contents of the seven microelements in the crude drug and its decoction are different. The contents of these seven elements rank as the following: Fe>Cu>Mn>Zn>Pb>Co>Cd. The dissolution rate of Cd is the highest,while that of Zn is the lowest. The result shows that the detection limits are all below 0. 003 8 μg/mL,the addition standard recoveries are in the range of 93. 25%—109.6%,and the relative standard deviations are less than 2.90%. The result is satisfactory,and it can offer some basic data for the further study of active components in Garcinia xanthochymus.

atomic absorption;Garciniaxanthoymus; microelement; dissolution rate

2014-11-27.

国家自然科学基金(51062018);云南民族大学化学与生物技术学院SRT创新性实验项目(2013HXSRTY04); 云南民族大学研究生创新基金科研项目(2014YJY72).

杨丽(1982-),女,硕士研究生，讲师.主要研究方向:分离分析科学.

叶艳青(1967-),女,硕士,教授,硕士生导师.主要研究方向:分离分析科学.

R284.1

A

1672-8513(2015)02-0129-03