迈瑞B C-6 900全自动血细胞分析仪血液模式的性能验证和评价

寿爽，徐胜，吕洁，李静云，成军，孙长贵

(解放军第一一七医院检验科，浙江 杭州310013)

随着科技的发展和应用，各类自动化仪器不断更新，其性能与检验质量密切相关，稳定的检测系统是保障检验结果质量的前提[1]。血细胞分析仪是目前实验室最常用的检测仪器之一，BC-6900全自动血细胞分析仪(BC-6900血球仪)是目前深圳迈瑞公司生产的国际上高档的仪器之一，分为血液和体液两种模式。根据《医学实验室--质量和能力的专用要求》[2]的要求，实验室应确定设备(在安装时及常规使用中)能够达到所要求的性能标准，并且符合相关检验所要求的条件。为进一步了解该机性能，笔者以国际血液学标准委员会(ICSH)和美国国家临床实验室标准化协会(CLSI)的相关标准和指南，对血液模式各种性能进行初步评价，现将实验结果报道如下 。

1 材料与方法

1.1 40份患者标本均是按照世界卫生组织(WHO)《静脉采血的最佳操作》[3]采集的静脉血液，使用EDTA-K2真空采血管。

1.2 主要仪器与试剂 迈瑞BC-6900全自动血细胞分析仪(BC-6900血球仪)、厂家配套校准品(批号：PLUS044)，高、中、低值质控品(批号：MB054H，N，L)及检测试剂，SYSMEX XE-2100全自动血细胞分析仪(XE-2100血球仪)及相应配套检测试剂。

1.3 方法 性能评价前用标准品进行定标，两仪器状态良好(XE-2100血球仪参加了全国和浙江省内全血细胞计数室间质评，成绩优秀)，对BC-6900血球仪的白细胞计数(WBC)，红细胞计数(RBC)，血红蛋白(Hb)，血小板计数(PLT)的空白计数，携带污染率，精密度，准确度，线性范围和相关性比较等方面进行性能评价。所有操作均严格按照《全国临床检验操作规程》[4]的要求，判断标准参考仪器说明书。

1.3.1 空白计数 BC-6900血球仪开机后，以稀释液为标本，连续检测3次，取3次结果的最大值。

1.3.2 携带污染率 选择高值和低值的质控品，分别在BC-6900上连续检测高值质控品3次(H1，H2，H3)，立即检测低值质控品 3 次(L1，L2，L3)，计算四个项目(WBC、RBC、Hb和PLT)的携带污染率(%)，与厂家提供的技术指标比较，其携带污染率计算公式：

1.3.3 精密度评价 全血高、中、低值质控品连续检测20d，每天测两批次，上午9时一次，下午4时一次，每批次测两次[5]。计算四个项目(WBC、RBC、Hb及PLT)的精密度，用Sr表示批内精密度，Srr表示批间精密度，Sdd表示日间精密度，ST表示总不精密度，如果 Srr2为负数，说明批间变异几乎都由批内变异形成，因此取值为0；如果 Sdd2为负数，说明日间变异几乎都由批间变异形成，因此也取值为0[6]。

1.3.4准确度评价 校准品校准仪器后，重复10次测定校准品，取其均值与其靶值比较，计算四个项目(WBC，RBC，Hb，PLT)的相对偏倚(%)[7,8]：

1.3.5 线性范围 将WBC，RBC，Hb高值标本用血浆按 100%，80%，60%，40%，20%，10%比例稀释，每个浓度检测两次取均值。将PLT值为3000×109/L的标本用血浆按 5/6，2/3，1/2，1/3比例稀释，每个浓度检测两次取均值；将PLT值为1000×109/L的标本用血浆按 100%，80%，60%，40%，20%，10%比例稀释，每个浓度检测两次取均值。计算WBC，RBC，Hb和不同范围PLT测定值与样本浓度的直线回归方程及相关系数[9,10]。

1.3.6 相关性比较 (1)两仪器四个项目测定结果的相关性：参照CLSI EP9-A2[11]文件，在 5个工作日内，每日选择 8份样本，检测参数浓度满足文件要求，标本采集2h内，在室温下分别在BC-6900和XE-2100血球仪上按文件要求测定顺序进行测定，判断检测结果有效性后，进行相关分析。(2)白细胞分类仪器法与显微镜法的相关性：参照CLSI H20-A[12]文件内容进行白细胞分类相关性评价。取40份患者EDTA-K2抗凝静脉血标本在BC-6900血球仪上重复测定2次取均值。同时取5μl血样45度角推片，制成符合质控标准的血涂片3张，1张备用，2张瑞氏染色后由两名经验丰富的主管技师采用双盲法进行白细胞分类：每张血涂片在油镜下计数200个白细胞进行中性粒细胞(N)，淋巴细胞(L)，单核细胞(M)，嗜酸性细胞(E)，嗜碱性细胞(B)分类，每张血涂片每人分类3次，计算两张血涂片各类细胞百分比均值，以显微镜法为参照与仪器结果进行相关性分析[13]。

1.4 统计学处理 应用Microsoft Excel2007软件中的统计学函数及SPSS 12.0统计软件包对数据进行线性回归分析。

2 结果

2.1 空白计数 四个项目的空白计数结果均符合标准要求，见表1。

表1 空白计数结果

2.2 携带污染率 四个项目的携带污染率分别为WBC：0.199%，PLT：0.4%，RBC，Hb均为 0%， 均在1.0%以下(厂家标准)。

2.3 精密度评价 按照CLSI指南要求进行精密度测定和计算，结果见表2。

表2 精密度评价结果

2.4 准确度评价 四个项目测定结果的相对偏倚均符合行业标准，结果见表3。

2.5 线性范围 四个项目在覆盖医学决定水平范围内的线性回归方程及相关系数结果见表4。

2.6 相关性

2.6.1 BC-6900和XE-2100血球仪测定四个项目的相关性结果见表5，两仪器间测定值的相对偏倚WBC≤3%，RBC，Hb，PLT均≤2%。

2.6.2 BC-6900血球仪与显微镜分类所得五类细胞的百分比结果相关性分别为N%：0.9927；L%：0.9839；M%：0.9070；E%：0.9858；B%：0.7835。

表3 准确度试验结果

表4 线性回归方程结果

表5 BC-6900(X)与XE2100血球仪(Y)的相关性

3 讨论

BC-6900血球仪将流式细胞仪普遍采用的荧光技术引入到白细胞、网织红细胞和有核红细胞的检测中，利用激光流式细胞术结合荧光染色技术手段，可以将细胞中核酸含量的多少通过荧光强度表现出来，结合细胞体积或者细胞内部复杂信息来区分各种细胞类型，使其提高了对幼稚细胞和原始细胞的精准识别和检测[14]。该仪器血液模式能够提供准确、全面的血细胞分析结果，有利于血液系统疾病的早发现、早治疗。

从保证检验质量考虑，检验工作者在使用新的仪器和检测系统进行患者标本检测前，应当评价和验证检测系统的基本性能指标，只有检测系统的各项性能指标符合临床使用要求，才可以将检测系统用于常规工作。本次对BC-6900血球仪的评估试验结果如下：WBC，RBC，Hb和 PLT4项参数空白计数结果良好，各项指标均合格。携带污染率均在允许范围内，达到了厂家的技术要求。精密度评价，四个项目参数的总精密度除低值Hb外，均低于厂商提供的精密度，说明仪器的重复性较好，基本符合仪器的设计标准；低值的重复性相对稍差，而且主要由批内不精密度较大造成，说明仪器对低值的测定重复性有待改进。准确度评价，校准品的相对偏倚均符合行业标准，说明仪器有较高的准确性。采用覆盖医学决定水平的临床标本评价线性范围，四个项目的相关系数均大于0.99以上，线性误差均小于2%，表明仪器实测值和理论值具有良好的相关性(检测浓度与稀释倍数呈线性相关)。在与XE-2100血球仪进行结果比较时，相关系数均大于0.99以上，具有良好的相关性，说明BC-6900血球仪与同类血球仪具有可比性；与手工镜检进行分类比较时，仪器对中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性细胞的分类效果较好，相关性高且均在手工分类测定值99%区间内，而单核细胞和嗜碱性细胞的分类效果稍差，此结果与其它类型血球仪类似[15]。单核细胞虽然比一般淋巴细胞体积大，核酸含量高，荧光方向和侧向散色光位置高，但与大淋巴细胞、颗粒型淋巴细胞、单核型异性淋巴细胞接近，是否容易引起计数误差，值得探讨；嗜碱性细胞可能因为细胞少比例低，手工镜检计数的细胞与仪器分析几千个细胞相比误差较大。各项结果表明该仪器比BC-5380有更好的性能[16]。

总之，通过对BC-6900血液细胞分析仪空白计数、携带污染率、精密度、准确度、线性范围、仪器比对和手工白细胞分类比对的初步性能评价，笔者认为该仪器具有良好的性能。可以为临床诊断提供快速、准确的血细胞分析结果，适合各大中型医院检验科使用。

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