GC法测定标准桃金娘油肠溶胶囊中3种成分的含量

张 勇，张 慧，高桂花

GC法测定标准桃金娘油肠溶胶囊中3种成分的含量

张 勇1，张 慧1，高桂花2*

目的 建立测定标准桃金娘油肠溶胶囊中α-蒎烯、柠檬烯和桉叶油醇的含量测定方法。方法 采用Rtx-1701毛细管柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm)，进样口温度200 ℃，火焰离子化检测器，测器温度220 ℃，柱温90 ℃，氮气为载气，流速1.0 mL/min，进样量1 μL，外标法测定含量。结果 α-蒎烯进样浓度在10.09～90.79 μg/mL，回归方程为y=24 163 x+39 804，r=0.999 8；柠檬烯进样浓度在16.82～151.3 μg/mL，回归方程为y=31 699 x+1 555 748，r=0.999 7；桉叶油醇进样浓度在41.23～371.1 μg/mL，回归方程为y=7 416.8 x+2 367 875.5，r=0.999 7。α-蒎烯的平均回收率为99.36%，RSD为1.21%；柠檬烯的平均回收率为99.14%，RSD为1.03%；桉叶油醇的平均回收率为100.22%，RSD为0.87%。结论 该方法简便、准确、灵敏、重现性好，可作为标准桃金娘油肠溶胶囊中主要成分的含量测定方法。

标准桃金娘油肠溶胶囊；α-蒎烯；柠檬烯；桉叶油醇；含量测定

0 引言

标准桃金娘油肠溶胶囊由德国保时佳大药厂生产，具有抗炎、祛痰作用[1-9]，能够治疗中耳炎、气管炎、肺炎，其疗效确切、不良反应少。经气红联用法测定[10]，标准桃金娘油肠溶胶囊主要是由α-蒎烯、柠檬烯和桉叶油醇等3种单萜组成，本文采用气相色谱法测定其含量，建立了质量控制方法，该方法简便、准确、灵敏、重现性好。

1 仪器与试药

GC-2010气相色谱仪，配FID检测器(日本岛津公司)，Rtx-1701毛细管柱，HGH-300BF氢气发生器(北京汇龙公司)，BS 224 S型电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。

标准桃金娘油肠溶胶囊(德国保时佳大药厂，批号：219223)，α-蒎烯对照品(批号：110897-200502)；柠檬烯对照品(批号：100470-201302)；桉叶油醇(桉油精)对照品(批号：110788-201105)对照品均由中国食品药品检定研究院提供；乙酸乙酯(天津市博迪化工有限公司)。

2 方法与结果

2.1 溶液的配制

2.1.1 对照品储备液的配制 分别精密称取α-蒎烯约25 mg、柠檬烯约40 mg、桉叶油醇约100 mg于50 mL容量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为储备液(α-蒎烯0.5 mg/mL、柠檬烯0.8 mg/mL、桉叶油醇2 mg/mL)。

2.1.2 对照品溶液的配制 取储备液1 mL 于 10 mL的容量瓶中，用乙酸乙酯稀释至刻度并摇匀，即得。

2.1.3 供试品溶液的配制 取本品内容物0.3 g置50 mL容量瓶中，加乙酸乙酯定容至刻度，摇匀，取1 mL置10 mL容量瓶中，加乙酸乙酯定容至刻度，摇匀作为供试品溶液。

2.2 色谱条件与系统适应性试验 气相色谱仪(配FID)，Rtx-1701毛细管柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm)，气化室温度200 ℃，检测器温度220 ℃，柱温90 ℃，流速1.0 mL/min，进样量1 μL。取对照品溶液1 μL注入气相色谱仪，记录色谱图，各组分间分离度符合规定。见图1。

图1 HPLC色谱图

2.3 检出限与定量限 分别取α-蒎烯、柠檬烯、桉叶油醇对照品溶液逐步稀释，取1 μL注入气相色谱仪，记录色谱图，以S/N=3为检出限，α-蒎烯、柠檬烯、桉叶油醇检出限为0.64、0.38、0.72 ng，S/N=10为定量限，α-蒎烯、柠檬烯、桉叶油醇定量限为1.6、1.1和1.4 ng。

2.4 线性关系试验 称取α-蒎烯25.22 mg，柠檬烯42.04 mg，桉叶油醇103.07 mg置同一50 mL量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度并摇匀，得对照品储备液。取对照品储备液1 mL置10 mL的容量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度并摇匀，得对照品溶液。分别精密量取对照品储备液0.2、0.6、1.0、1.4、1.8 mL于10 mL的容量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度并摇匀，得供试品溶液。分别量取1 μL注入气相色谱仪，记录色谱图，以进样浓度为横坐标、峰面积为纵坐标计算回归方程。α-蒎烯的回归方程为y=24 163 x+39 804，r=0.999 8；柠檬烯的回归方程为y=31 699 x+1 555 748，r=0.999 7；桉叶油醇的回归方程为y=7 416.8 x+2 367 875.5，r=0.999 7。α-蒎烯进样浓度在10.09～90.79 μg/mL，柠檬烯进样浓度在16.82～151.3 μg/mL，桉叶油醇进样浓度在41.23～371.1 μg/mL范围内呈良好的线性关系。

2.5 精密度试验 精密量取对照品溶液1 μL注入气相色谱仪，记录色谱图，重复进样6次，α-蒎烯峰面积的RSD为0.55%，柠檬烯峰面积的RSD为0.61%，桉叶油醇峰面积的RSD为0.45%，方法精密度良好。

2.6 稳定性试验 取供试品溶液，于0、2、4、6、8 h分别进样1 μL，依法测定。结果α-蒎烯峰面积的RSD为0.64%、柠檬烯峰面积的RSD为0.82%，桉叶油醇峰面积的RSD为0.57%，结果供试品溶液在8 h内稳定。

2.7 重复性试验 取标准桃金娘肠溶胶囊，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液6份，依法测定。α-蒎烯、柠檬烯、桉叶油醇含量的RSD分别为0.78%、1.04%、0.69%。含量测定重复性良好。

2.8 回收率试验 精密称取桃金娘标准油内容物0.15 g置50 mL容量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，再精密量取1 mL置10 mL容量瓶中，共称取9份，分成3组，每组分别加入上述对照品储备液0.4、0.5、0.6 mL，加乙酸乙酯稀释至刻度，制备供试品溶液，取上述9个溶液分别进样1 μL，记录色谱图，按外标法计算，结果见表1～表3。

2.9 样品含量测定 取本品内容物依法测定，结果见表4。

3 讨论

3.1 指标性成分的选择 桃金娘油中的主要成分为α-蒎烯、柠檬烯和桉叶油醇，占总桃金娘油的97%以上，可碱化溶解粘液、调节分泌物比例、提高纤毛摆动空间并主动刺激粘液纤毛运动、增强粘液纤毛清除，是实现治疗功效的主要成分，故选择其作为指标性成分。

3.2 色谱条件建立 参考不同物质中有关3种成分的测定方法[11-15]，建立了标准桃金娘油肠溶胶囊中主要成分的测定方法，采用Rtx-1型毛细管柱时，桉叶油醇峰与柠檬烯峰之间分离度低，与其后的峰分离度差。选用Rtx-1701型毛细管柱，各组分分离效果好，无拖尾现象。采用等温条件进行分离，方法简便，分析时间短。

表1 α-蒎烯回收率试验结果

表2 柠檬烯回收率试验结果

表3 桉叶油醇回收率试验结果

表4 标准桃金娘肠溶胶囊中3种成分含量测定结果(mg/g)

[1] 何剑,吴平,吴苏日娜,等.标准桃金娘油胶囊预防鼻咽癌放疗后分泌性中耳炎的临床疗效观察[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志,2013,27(10):473-474.

[2] 范昕.吉诺通联合鼓室内注射治疗分泌性中耳炎102例[J].陕西医学杂志,2013,42(11):1553-1554.

[3] 张奕,周松.标准桃金娘油治疗分泌性中耳炎的系统评价[J].华西医学,2013,28(1):56-58.

[4] 王楠,韩德民,宋晓红,等.桃金娘油对人鼻腔黏液纤毛传输系统的影响[J].首都医科大学学报,2009,30(1):62-65.

[5] 花照泉,畅亦杰.益气清肺汤联合标准桃金娘油治疗AECOPD的临床疗效研究[J].中国中药杂志,2013,38(3):440-442.

[6] 曹丽华,康健,王洋,等.标准桃金娘油对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症的影响[J].大连医科大学学报,2010,32(1):18-21.

[7] 何逾祥,罗素玲,黄耀良.标准桃金娘油在儿童上气道咳嗽综合征治疗中的临床观察[J].中外医疗,2013,29:121-122.

[8] 张健波,卢金花.标准桃金娘油肠溶胶囊治疗儿童急性支气管炎的临床观察[J].临床合理用药杂志,2012,5(3B):32-33.

[9] 路岩莉,孙丹,韩耀巍.吉诺通辅助治疗儿童重症肺炎临床疗效观察[J].药学研究,2013,32(9):548-549.

[10]楼启正.气红联用法研究标准桃金娘油的化学成分[J].光谱学与光谱学分析,2007,27(5):924-917.

[11]薛海萍,侯剑伟,杨骏,等.GC测定香榧假种皮挥发油中α-蒎烯、β-蒎烯和柠檬烯含量[J].中国实验方剂学杂志,2013,19(17):57-59.

[12]梁可,姬巍,闫小玉,等.GC法同时测定桂枝挥发油中α-蒎烯、β-蒎烯和柠檬烯的含量[J].中国药房，2012,23(39):3694-3696.

[13]施法,侯峰,董斌,等.GC法同时测定明目上清片中4个成分的含量[J].药物分析杂志,2013,33(1):146-149.

[14]隋添爽,李清,刘然,等.毛细管气相色谱法测定鱼腥草中4种挥发油的含量[J].沈阳药科大学学报,2011,28(2):130-134.

[15]阎卉,靳文仙,王成港.气相法同时测定不同产地藏茴香中葛缕酮和柠檬烯含量[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(11):97-99.

Content determination of three components in myrtol standardized enteric coated soft capsules by GC

ZHANG Yong1,ZHANG Hui1,GAO Gui-hua2*

(1.Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Dalian 116600,China;2.School of Pharmacy,Jining Medical University,Rizhao 276826,China)

Objective To establish a method for determination of α-pinene,limonene and eudesmol in myrtol standardized enteric coated soft capsule.Methods Rtx-1701 capillary column(30 m×0.32 mm×0.25 μm)was adopted,inlet temperature was 200 ℃,Flame Ionization Detector(FID)with temperature of 250 ℃,the column temperature was 90 ℃ with nitrogen as the carrier gas,the flow rate was 1 mL/min,injection volume was 1 μL.Results The linear ranges of α-pinene,limonene and eudesmol were 10.09～90.79 μg/mL(y=24 163 x+39 804,r=0.999 8),16.82～151.3 μg/mL(y=31 699 x+1 555 748,r=0.999 6),41.23～371.1 μg/mL(y=7 416.8 x+2 367 875.5,r=0.999 7)；the mean recovery rates of the three components were 99.36%(RSD=1.21%),99.14%(RSD=1.03%),100.22%(RSD=0.87%),respectively(n=9).Conclusion The method is simple,accurate,sensitive,reproducible,it can be used to determine the main contents in myrtol standardized enteric coated soft capsule.

Myrtol standardized enteric coated soft capsules;α-Pinene;Limonene;Eudesmol;Content determination

2014-06-17

1.辽宁中医药大学，大连 116600；2.济宁医学院药学院，山东 日照 276826

*通信作者

10.14053/j.cnki.ppcr.201506020