抗眩颗粒对小鼠脑膜微循环的影响

王希东，郝少君，李文俊，张正臣

抗眩颗粒对小鼠脑膜微循环的影响

王希东，郝少君*，李文俊，张正臣

目的 观察抗眩颗粒对小鼠脑膜微循环的影响。方法 取小鼠60只，雌雄各半，随机分为6组，分别灌服抗眩颗粒、养血清脑颗粒混悬液及同体积的生理盐水，连续给药10 d。于第10天后开始测定。记录小鼠平静后2 min内的血流灌注量。取结扎前110～120 s的血流灌注量平均值作为结扎前的平均灌注量，取230～240 s的血流灌注量平均值作为结扎后的平均灌注量，并进行分析。结果 与空白对照组比较，模型组脑膜微循环血流量显著减少(P<0.01)。抗眩颗粒和养血清脑颗粒均可显著改善双侧颈总动脉结扎所致的小鼠脑血流量减少(P<0.01)。结论 抗眩颗粒对小鼠脑膜微循环有良好的改善作用。

抗眩颗粒；小鼠；脑膜微循环；养血清脑颗粒

0 引言

脑动脉供血不足导致眩晕发作在临床上较多见。现代医学认为其与脑部微循环功能障碍、血液流变学异常、细胞内自由基损伤等诸多因素有关。脑供血不足在中医学上属于“眩晕”范畴。目前，虽然治疗该病的药物很多，但疗效不理想[1-4]。笔者根据临床经验自拟抗眩颗粒，该方由磁石、夏枯草、葛根、牛膝、钩藤、姜半夏、川芎、丹参等组成。诸药合用，具有平肝潜阳、活血通窍、息风定眩的作用。用于因高血压、脑动脉硬化、椎基底动脉供血不足、美尼尔氏病、植物神经功能紊乱引起的眩晕、头重足轻、行走不稳等症疗效较好。为探究其疗效原理，本文进行了抗眩颗粒对小鼠脑膜微循环影响的实验研究。

1 实验材料

1.1 实验药品 抗眩颗粒(中国人民解放军第371中心医院提供，批号：20110620)口服，10 g/次，3次/d；养血清脑颗粒(天士力制药集团股份有限公司，批号：120802)；羧甲基纤维素钠(天津市恒兴化学试剂制造有限公司，批号：20060728)；盐酸肾上腺素(上海和丰制药有限公司，批号：120508)；水合氯醛(天津市光复精细化工研究所，批号：2012707)；生理盐水(河南双鹤华利药业有限公司，批号：C12031801)；香柏油(中国上海标本模型厂，批号：20120705)；巧蜜儿脱毛膏(广州市壹佰雅化妆品有限公司)。

1.2 实验动物 小鼠，昆明种，SPF级，由武汉生物制品研究所有限责任公司提供，合格证号：42000400000116。

1.3 实验仪器 JM1000电子秤，余姚记铭称重校验设备有限公司；BI-2000图像分析系统，成都泰盟科学仪器有限公司；PIM3激光散斑血流监测视频系统，瑞典帕瑞医学(中国)公司。

2 实验方法

小鼠60只，体重18～21 g，雌雄各半，随机均匀分为6组，分别灌服大、中、小剂量抗眩颗粒混悬液(15.2、7.6、3.8 g/kg，0.1 mL/10 g)、养血清脑颗粒混悬液(3 g/kg，0.1 mL/10 g )及同体积的生理盐水(2组，0.1 mL/10 g)，1次/d，连续给药10 d。于第10天早给药1 h(禁食不禁水12 h)后开始测定。以20%乌拉坦0.05 mL/10 g(体重)腹腔注射麻醉，俯卧位固定，将颅骨正中皮肤矢状切开，用止血钳将两侧皮肤拉开，使大脑脑膜完全暴露，用标记笔在小鼠脑部矢状缝与冠状缝交叉处作一标记，将小鼠置于仪器的推荐距离范围内，并使仪器与监测部位平行，光束照在标记处，并与检测部位垂直，调整仪器距离与设定距离相一致，圈定扫描面积，点击记录按钮开始记录，记录小鼠平静后2 min内血流灌注量(仪器操作方法：先启动计算机和其他外周设备，然后启动Perimed仪器，预热5 min，当仪器的LED灯停止闪烁时，可以开始监测，双击桌面上的PIMsoft软件，选择PeriCam PSI 系统；点击工具，进入项目编辑器，设置操作距离为10 cm，监测面积的宽度和高度均为2 cm，步长设为中，采样频率为23/s，持续时间设为直至停止，然后点击应用-OK键，开始实验)。然后松开小鼠，仰卧位固定，结扎双侧颈总动脉(假手术组只分离双侧颈总动脉，不做结扎处理)。测量完小鼠正常脑部血流量后，松开小鼠，仰卧位固定，结扎双侧颈总动脉[空白对照组(假手术组)只分离双侧颈总动脉，不做结扎处理]，然后松开小鼠，并俯卧位固定，圈定同只小鼠正常状态时相同的扫描面积，记录小鼠平静后2 min内血流灌注量。取结扎前110～120 s的血流灌注量平均值作为结扎前的平均灌注量，取230～240 s的血流灌注量平均值作为结扎后的平均灌注量，导出报告，并进行分析。

3 结果

各组小鼠脑血流量比较见表1。从表1可见，颈总动脉结扎前各组小鼠脑膜微循环血流量差异无统计学意义，说明各组具有可比性。空白对照组结扎假手术前后脑血流量比较差异无统计学意义；其他各组结扎后，各组小鼠脑膜微循环血流量均减少(P<0.01)；与空白对照组比较，模型组脑膜微循环血流量减少(P<0.01)，说明颈总动脉结扎可使小鼠脑血流量显著减少，但由于侧支循环，虽结扎双侧颈总动脉，脑血流并未完全阻断；与模型组比较，大、中、小剂量抗眩颗粒组和养血清脑颗粒组结扎至小鼠脑血流量减少得到显著改善(P<0.01)。与空白对照组比较，模型组脑血流量下降更明显(P<0.01)，与模型组比较，大、中、小剂量抗眩颗粒组和养血清脑颗粒组均可使双侧颈总动脉结扎所致的小鼠脑血流量下降得到显著改善(P<0.01)。见图1～图6。

表1 各组小鼠脑血流量比较

注：*与模型组比较，P<0.01;#与结扎前比较，P<0.01

图1 空白对照组脑血流图

图2 模型组脑血流图

图3 养血清脑颗粒组脑血流图

图4 大剂量抗眩颗粒组脑血流图

图5 中剂量抗眩颗粒组脑血流图

图6 小剂量抗眩颗粒组脑血流图

由图1～图6可见，空白对照组脑血流量降低不明显；与空白对照组比较，模型组结扎后小鼠脑膜微循环血流量明显减少，颜色变浅，说明造模成功；与模型组比较，养血清脑颗粒组和大、中、小剂量抗眩颗粒组结扎后小鼠脑的血流量减少得到很好的改善，颜色变深，其中，以大剂量抗眩颗粒组改善脑血流量效果较好。

4 讨论

眩晕患者的发病原因中，属于虚者居多，如阴虚则易肝风内动，血缺则脑失所养，精亏则髓海不足，均易导致眩晕。眩晕常常突然发作，常伴有恶心、呕吐、自汗等现象，更为严重者可突然昏倒[5]。中医认为，肝经热盛，肝风内动，致头晕目眩，治宜凉肝、息风、止疼。抗眩颗粒具有平肝息风、潜阳安神、活血通经的作用。笔者对其工艺、质量标准[6]及药理进行研究，包括抗眩颗粒对小鼠微循环的影响，抗眩晕颗粒的镇静作用，抗眩颗粒对大鼠血瘀模型的影响，抗眩颗粒对内分泌型高血压大鼠模型的影响[7]等。本文研究抗眩颗粒对小鼠脑膜微循环的影响。结果表明，颈总动脉结扎后，抗眩颗粒可使小鼠脑膜微循环血流量显著减少，灌注量显著下降，大、中、小剂量抗眩颗粒和养血清脑颗粒均可显著改善双侧颈总动脉结扎所致的小鼠脑血流量减少。但本文没有研究抗眩颗粒的毒理作用，有待于在未来的实验中加强对其毒理作用的研究，保证用药的安全性。

5 致谢

本实验在河南中医学院苗明三教授指导下完成，特此致谢！

[1] 王献明,赵军波,魏洁.静脉滴注纳洛酮治疗颅脑外伤后眩晕症的临床疗效分析[J].实用药物与临床,2012,15(7):449-450.

[2] 张金生.仲景论治眩晕病探微[J].中医学报,2011(6):1104-1105.

[3] 李波,李彬.眩晕辩治体会[J].中医学报,2012,(8):1012-1013.

[4] 张晋,杨磊,郭莲军.蝙蝠葛诺林碱对小鼠软脑膜微循环障碍的改善作用[J].武汉大学学报,2011,32(1):36-39.

[5] 王冠良,王自恺.眩晕的辨证论治[J].菏泽医专学报,2001,13(3):92-95.

[6] 王希东,郝少君,李文俊,等.抗眩颗粒的制备及葛根素的含量测定[J].中国药师,2014,17(8):1279-1261.

[7] 郝少君,王希东,李文俊,等.抗眩颗粒对小鼠自主活动及运动协调能力的影响[J].中医学报,2014,29(2):237-238.

Effect of anti-glare granules on meningeal microcirculation in mice

WANG Xi-dong, HAO Shao-jun*, LI Wen-jun, ZHANG Zheng-chen

(371 Central Hospital of PLA, Xinxiang 453000, China)

Objective To observe the effect of anti-glare granules on meningeal microcirculation in mice.Methods 60 mice(male∶female=1∶1)were randomly divided into 6 groups, and they were given anti-glare granules, Yangxue qingnao granule suspension and the same volume of normal saline continuously for 10 d.After medication, when the mice were calm, the blood perfusion was recorded after 5 min.The average amounts of blood perfusion at 110～120 min before ligation and at 230～240 min after ligation were compared.Results The blood flow in meningeal microcirculation of model group decreased more significantly than that in blank control group(P<0.01).The anti-glare granules and Yangxue qingnao granule could significantly improve the decrease of blood flow induced by bilateral common carotid artery ligation(P<0.01).Conclusion Anti-glare granules could improve the meningeal microcirculation in mice.

Anti-glare granule;Mice;Meningeal microcirculation;Yangxue qingnao granules

2014-12-09

解放军第371中心医院，河南 新乡 453000

河南新乡重点科技攻关项目(ZG14013)

10.14053/j.cnki.ppcr.201506006

*通信作者