西施舌对糖尿病小鼠血脂及抗氧化活性的影响*

温扬敏，万端静，谢永华，罗彩林，程 晶

1泉州医学高等专科学校，福建 泉州 362011；2泉州市中医院急诊科

西施舌对糖尿病小鼠血脂及抗氧化活性的影响*

温扬敏1，万端静2，谢永华1，罗彩林1，程 晶1

1泉州医学高等专科学校，福建 泉州 362011；2泉州市中医院急诊科

目的：研究西施舌水提取物对糖尿病小鼠血脂含量和抗氧化活性的影响。方法：构建链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病小鼠模型，分析不同浓度西施舌水提取物对糖尿病小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、总抗氧化(T-A O C)活性和N O含量，以及对肝脏组织羟自由基含量(O H o)、超氧化物歧化酶(SO D)和过氧化氢酶(CA T)活性的影响。结果：不同浓度西施舌水提物均具能降低糖尿病小鼠总胆固醇和甘油三酯含量，且不同剂量西施舌水提物实验组与糖尿病小鼠之间差异显著(P＜0.05)。结论：西施舌水提物能提高糖尿病小鼠抗氧化活性，并趋近于正常小鼠水平。

西施舌；降血脂；抗氧化；STZ诱导糖尿病小鼠;酶

近年来，糖尿病预防已成为我国最主要的公共卫生问题。糖尿病是以胰岛素抵抗及(或)胰岛素分泌缺陷改变所引起的以高血糖为主要临床特征的慢性内分泌代谢性疾病［1-2］。根据对中国31个省(自治区、直辖市)的161个检测县(区)18岁及以上常住居民的糖尿病调查显示，我国2010年18岁及以上居民糖尿病患病率达9.65%，且患者的知晓率和治疗率都很低。如不予以有效控制，今后十年中国的糖尿病患病率仍会继续攀升。西施舌(Coelomactra antiquata)福建俗称“海蚌”，个体较大，肉质细嫩，营养丰富，是久负盛名的珍品佳肴［3］。西施舌除可食用外，还具有降低尿糖的功效。据临床报道，糖尿病患者每天早晨空腹食水煮西施舌8个连汤饮服，5天后即有显著效果［4］。本文研究西施舌提取物对糖尿病小鼠降血脂和抗氧化活性影响，为西施舌的药用价值研究及功能食品开发提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 西施舌水提取物的制备 选择壳长7～9 cm新鲜西施舌成贝，去壳、洗净，称取其肌肉50 g，剪成3小块，放入1 000 mL烧杯，再加入300 mL的双蒸水，置于超声波清洗机，于60 W、20 kHz、60℃条件下处理20分钟。冷却后用新华1号定性滤纸过滤，取滤液低温冷冻干燥得到西施舌水提物粉末。用双蒸水配置成不同浓度备用。

1.2 动物实验 糖尿病小鼠模型构建：昆明小鼠30只，雌雄各半，体质量18～20 g，购自斯莱克实验动物有限公司，动物合格证号：SCXK(沪)2012-0002。自由饮水适应性饲养1周后，禁食24小时。用4℃冰箱冷却的0.1 mol/L的柠檬酸缓冲液(pH4.5)将STZ溶解，配置成10 mg/mL溶液。小鼠腹腔皮下一次性注射含55 mg/kg STZ溶液。对照组注射相同体积的柠檬酸缓冲液。小鼠禁食，自由饮食5%葡萄糖水溶液。72小时后，尾部取血测定血糖，血糖值大于20 mmol/L为糖尿病模型小鼠。小鼠分成5组，每组6只。第1组为正常对照组：正常小鼠，每天灌胃相同剂量pH4.5的柠檬酸钠缓冲液(Control)；第2组为糖尿病对照组：糖尿病小鼠，每天灌胃相同剂量pH4.5的柠檬酸钠缓冲液(Diabetes)；第3组为低浓度治疗组：糖尿病小鼠，每天灌胃50 mg/kg的西施舌水提物(D+C1)；第4组为中浓度治疗组：糖尿病小鼠，每天灌胃100 mg/kg的西施舌水提物(D+C2)；第5组为高浓度治疗组：糖尿病小鼠，每天灌胃150 mg/kg的西施舌水提物(D+C3)。21天后，小鼠禁食24小时，但自由饮水。尾静脉取血，测定血糖。再摘眼球取血，用EDTA抗凝，用于总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)，以及总抗氧化(T-AOC)和NO测定。小鼠脱臼处死，取肝脏，洗净血污，剪碎。加入固液比(g/mL)为1∶1生理盐水匀浆。于4℃条件下，6 000 g离心10分钟，取上清液测定羟自由基含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性。

2 结果

2.1 西施舌水提取物对糖尿病小鼠体质量及血糖水平的影响 糖尿病小鼠和不同剂量西施舌水提取物处理组小鼠体质量均明显低于正常组(P＜0.05)，而血糖水平均明显高于正常组(P＜0.05)。治疗21天后，不同剂量西施舌水提物均能提高糖尿病小鼠的体质量，其中剂量为100 mg/kg和150 mg/kg的实验组小鼠体质量与糖尿病小鼠之间差异有统计学意义(P＜0.05)。不同剂量西施舌水提取物均能降低糖尿病小鼠的血糖浓度，与糖尿病小鼠比较差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 西施舌水提物对糖尿病小鼠体质量及血糖水平的影响(±s)

表1 西施舌水提物对糖尿病小鼠体质量及血糖水平的影响(±s)

注：a表示与正常组比较，P＜0.05；b表示与糖尿病组比较，P＜0.05。

组别 只数 剂量/(m g·kg-1) 体质量/g 血糖/(m m ol·L-1)正常组 6 － 47.92±3.92 6.64±0.69糖尿病组 6 － 31.68±3.94 22.28±1.60 6 50 36.26±4.89a15.46±2.58ab西施舌组 6 100 39.22±4.30ab12.42±1.51ab6 150 39.84±6.71ab10.84±1.75ab

2.2 西施舌水提物对糖尿病小鼠血脂的影响 不同剂量西施舌水提物均能降低糖尿病小鼠血清TG和TC含量，并趋近于正常小鼠。与糖尿病小鼠比较，不同剂量西施舌浓度对游离脂肪酸的影响差异均无统计学意义(P＞0.05)，表明西施舌水提取对糖尿病小鼠游离脂肪酸无改善效果。见表2。

表2 西施舌水提物对糖尿病小鼠血脂水平的影响

表2 西施舌水提物对糖尿病小鼠血脂水平的影响

注：a表示与正常组比较，P＜0.05；b表示与糖尿病组比较，P＜0.05。

组别 例数 剂量/(m g·kg-1) TC/(m m ol·L-1) TG/(m m ol·L-1) FFA/(m m ol·L-1)正常组 6 － 0.74±0.06 1.16±0.06 0.89±0.07糖尿病组 6 － 2.11±0.10 2.17±0.05 1.46±0.05 6 50 1.71±0.07ab1.65±0.04ab1.43±0.09a西施舌组 6 100 1.61±0.05ab1.59±0.04ab1.47±0.08a6 150 1.49±0.11ab1.51±0.03ab1.42±0.05a

2.3 西施舌水提物对糖尿病小鼠血清抗氧化活性的影响 与糖尿病小鼠比较，不同浓度西施舌水提取均能提高血清总抗氧化活性，其中浓度为100 mg/kg和150 mg/kg的实验组与糖尿病鼠之间比较差异有统计学意义(P＜0.05)。不同浓度西施舌水提取物均能显著降低糖尿病小鼠血清的NO含量(P＜0.05)，并趋近于正常小鼠水平。见表3。

表3 西施舌水提取物对糖尿病小鼠血清抗氧化活性的影响

表3 西施舌水提取物对糖尿病小鼠血清抗氧化活性的影响

注：a表示与正常组比较，P＜0.05；b表示与糖尿病组比较，P＜0.05。

组别 只数 剂量/(m g·kg-1) T-A O C/g N O/(m m ol·L-1)正常组 6 － 15.66±0.80 6.64±0.69糖尿病组 6 － 10.93±0.69 22.28±1.60 6 50 12.06±0.58a15.46±2.58ab西施舌组 6 100 13.25±0.56b12.42±1.51ab6 150 14.55±0.51b10.84±1.75ab

2.4 西施舌水提取物对糖尿病小鼠肝脏抗氧化活性的影响 不同浓度西施舌水提取物均能改善糖尿病小鼠肝脏抗氧化活性。不同浓度西施舌水提物SOD活性和羟自由基含量与正常鼠之间差异有统计学意义(P＜0.05)。与糖尿病小鼠比较，西施舌水提物浓度为150 mg/kg的实验组羟自由基含量、SOD和CAT活性差异有统计学意义(P＜0.05)，并趋近于正常小鼠水平。见表4。

表4 西施舌水提物对糖尿病小鼠肝脏抗氧化活性的影响(±s)

表4 西施舌水提物对糖尿病小鼠肝脏抗氧化活性的影响(±s)

注：a表示与正常组比较，P＜0.05；b表示与糖尿病组比较，P＜0.05。

组别 只数 剂量/(m g·kg-1) SO D/(m m ol·L-1) CA T/(m m ol·L-1) 羟自由基/(m m ol·L-1)正常组 6 － 15.05±1.34 25.69±3.34 145.79±11.72糖尿病组 6 － 7.93±1.10 18.83±2.14 96.54±4.70 6 50 8.86±1.03a20.01±1.72a105.51±7.12a西施舌组 6 100 10.05±0.30ab21.02±1.85a113.25±9.24ab6 150 12.48±0.62ab23.13±1.36b128.42±6.06ab

3 讨论

长期的糖代谢紊乱可导致机体氧化应激和抗氧化防御体系的失衡，还会引起机体内的抗氧化酶系统的损伤。研究发现，细胞中的自由基能够使胰岛素信号通路的反应发生异常，而这些胰岛素抵抗效应都可以通过向体系中添加抗氧化物质或诱导抗氧化酶类的表达来消除［5］。Nshikawa等［6］发现，通过使细胞中线粒体产的过氧化物含量正常化可以预防蛋白激酶c活化通路、糖基化末端产物增加及醛糖还原酶通路所引起的高血糖损伤。肝脏是物质代谢的重要器官，也是常见的糖尿病慢性损伤的靶器官之一。氧化应激是糖尿病引发并发症的共同发病机制，也是导致肝纤维化甚至肝硬化的原因之一。提高机体肝脏抗氧化能力，减少自由基对肝脏的损伤对改善糖尿病及其并发症具有重要的意义［7-8］。

本研究结果表明，西施舌水提取物能提高STZ诱导的糖尿病小鼠鼠血清抗氧化活性降低和减少羟自由基的含量，提肝脏抗氧化酶 SOD、CAT活性，减少羟自由基含量，一定程度恢复机体的抗氧化能力。表明西施舌降低糖尿病小鼠血脂水平与提高机体抗氧化活性有关，西施舌提取物可通过加强抗氧化活性，对糖尿病引起的肝脏损伤有一定的保护作用，其机制有待进一步研究。

［1］ Raj asekaran S，Si vagnanamK，Ravi K，et al.H ypogl ycem i c effectof al oe vera gelon st rept ozot oci n-i nduced di abet es i n experi m ent alrat s［J］.J M ed Food，2004，7(1):61-66.

［2］ 康继宏，宁光.中国糖尿病防治研究的现状与挑战［J］.转化医学研究：电子版，2012，3:1-24.

［3］ 齐秋贞，高如承，邱文仁，等.西施舌的生活史［J］.福建师范大学学报：自然科学版，1995，44(4):82-88.

［4］ 邢湘成.西施舌的药用［J］.药膳食疗，2004，7(4):32.

［5］ 贺凯，杨勇，李学刚.糖尿病的抗氧化治疗及问题［J］.广东医学，2013，34(4):640-643.

［6］ N i shi kaw a T，Edel st ei n D，D u X L，et al.N orm al i zi ng m i t ochondri alsuperoxi deproduct i on bl ockst hree pat hw ays ofhypergl ycaem i c dam age［J］.N at ure，2000，404(13):787-790.

［7］ H arri son SA.Li ver di sease i n pat i ent s w i t h di abet es m el l i t us［J］.JournalofCl i ci nalG ast roent erol ogy，2006，40(1):68-76.

［8］ 谢欣梅，庞晓斌.覆盆子提取物对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响及对肝脏保护作用的研究［J］.中成药，2013，35(3): 460-465.

Influence of Surf Clam Shell on Blood Lipid and Antioxidant Activity of Diabetic Mice

WEN Yangmin1,WAN Duanjing2,XIE Yonghua1,LUO Cailin1,CHENG Jing1
1 Quanzhou Medical College,Quanzhou 362011,China;
2 Emergency Department of Quanzhou Municipality TCM Hospital

Objective:To study the influenee of surf shell(Mactra antiquata)aqueous extract on blood lipid and antioxidant activity of diabetic mice.Methods：After mice models with diabetes mellitus(DM)were established by streptozotocin(STZ),the influences of different concentrations of surf clam shell aqueous extract on total cholesterol(TC),triglyceride(TG),free fatty acids(FFA),total antioxidant activity(T-AOC),the contents of NO,the contents of hydroxyl radicals(OHo)in the liver tissue,the activity of superoxide dismutase(SOD)and catalase(CAT) were analyzed.Results:The results showed that different concentrations of surf clam shell aqueous extract could decrease the contents of TC and TG of diabetic mice,and there were significant differences existed in the comparisons among different doses groups of surf clam shell aqueous extract(P＜0.05).Conclusion:Surf clam shell aqueous extract could improve antioxidant activity of diabetic mice,which was closing to the levels of normal mice.

surf clam shell;decreasing blood lipid;antioxidantion;STZ-induced diabetes mellitus mice; enzyme

R285.5

A

1004-6852(2015)10-0019-03

2014-12-27

泉州市科技发展重点项目(编号2011Z28)。

温扬敏(1979—)，男，硕士学位，讲师。研究方向：天然产物研究与开发。