冠心病伴2型糖尿病患者血清中Gas6水平检测及意义

陈 馨，陈 杰，蒋 冰，徐升强

（武汉市第一医院检验科，湖北武汉430022）

冠心病伴2型糖尿病患者血清中Gas6水平检测及意义

陈 馨，陈 杰，蒋 冰，徐升强＊

（武汉市第一医院检验科，湖北武汉430022）

目的 探讨生长停滞特异性基因产物6（Gas 6）与冠心病伴2型糖尿病患者血清中的变化及其临床意义。方法 选择心血管内科120例冠心病患者（CHD）作为冠心病组，120例冠心病伴2型糖尿病患者（CHD＋T2DM）组，同时选择健康体检者80例作为对照组。ELISA法对三组血清进行Gas 6的浓度检测，并检测其空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbAlc）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、hs－CRP、同型半胱氨酸（Hcy）含量，并对结果数据进行统计学分析。结果 ELISE法检测健康对照组Gas 6的含量为227.61±7.28pg／ml，冠心病患者组血清中Gas 6含量为278.57±6.61pg／ml，冠心病伴2型糖尿病患者血清中Gas 6含量为285.66±6.37pg／ml。冠心病患者组和冠心病伴2型糖尿病患者组较健康对照组明显升高，冠心病伴2型糖尿病患者组明显高于冠心病患者组，差异有统计学意义（P＜0.05）。冠脉狭窄支数越多，血清Gas 6水平越高（P＜0.05）。结论 生长停滞特异性基因产物6（Gas 6）在冠心病伴2型糖尿病患者血清中浓度明显升高，且随冠脉狭窄支数增多而增高，提示Gas 6参与冠心病伴2型糖尿病的发生发展。

生长停滞特异性基因产物6；冠心病；2型糖尿病；炎症因子

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0896）

冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病，CHD）是一种严重威胁中老年人的心血管疾病，近年来认为冠心病是一种炎症反应性疾病［1，2］。中国心脏调查组研究表明我国住院患者中有超过六成的冠心病患者合并糖代谢异常，糖尿病是冠心病的主要危险因素之一［3］，2型糖尿病和动脉粥样硬化同属一种慢性、亚临床炎性反应性疾病，两者发病机制存在一定的相似性。研究血清中生长停滞特异性基因产物6（Gas 6）在健康人群、冠心病患者、冠心病合并糖尿病患者三组人群中浓度水平的变化，探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象

收集2012年11月至2014年5月武汉市第一医院心血管内科冠心病（CHD）患者血清标本120例，其中男性59例，女性61例，平均年龄为45－65岁。冠心病伴2型糖尿病（CHD＋T2DM）患者血清标本120例，其中男性55例，女性65例，平均年龄为45－65岁。患者均经过彩超、CT、冠脉造影等检查，冠脉造影采用Judkins法经桡动脉做选择性冠脉造影，由两位临床经验丰富的心内科医师判定评价冠脉造影结果，冠心病判断标准为冠脉造影结果至少有1支冠状动脉病变狭窄程度≥50%，均符合1997年世界卫生组织制定的冠心病诊断标准。糖尿病诊断符合1999年WHO的糖尿病分型诊断标准。对照组为武汉市第一医院体检中心健康对照者80例，平均年龄为45－60岁。经体检及相关实验室检查，无心、脑、肝、肾、等疾病，无糖尿病，无急性感染，无血液系统疾病。根据冠心病伴2型糖尿病患者组冠脉造影结果分组，按狭窄累及左冠状动脉前降支，左回旋支，右冠状动脉的支数，病变分为单支病变、双支病变、三支病变，如病变累及左主干计双支病变。

1.2 研究方法

患者于入院时记录年龄性别、身高、体重，记录收缩压（SBP）、舒张压（DBP），并计算体质指数（bodymass index，BMI）。次日晨起空腹采集静脉血，一管置于EDTA－K2真空采血管中，用来检测糖化血红蛋白（HbAlc）。另一管置于分离胶真空采血管中，迅速分离血清，用来检测其空腹血糖（FBG）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、hs－CRP、同型半胱氨酸（Hcy）含量，生长停滞特异性基因产物6（Gas6）浓度。

FBG、TG、HDL、LDL、hs－CRP、HCY使用OLYMPUS 2700全自动生化分析仪及其配套试剂进行检测。FBG、TG、HCY采用酶法检测、HDL、LDL采用直接一步法检测、hs－CRP采用胶乳增强免疫比浊法。HbAlc使用BIO－RAD VIRANT II糖化血红蛋白分析仪及其配套试剂检测，采用高效液相色谱法。Gas 6检测试剂盒由R＆D公司提供，ELISA法按照试剂盒说明书操作，用Thermo multiskan MK3酶标仪检测其浓度水平。

1.3 统计学方法

统计学方法采用SPSS 19.0统计软件对数据进行统计学分析。计数资料用χ2检验，计量资料以±s来表示，行正态性检验和方差齐性检验，两组间比较用t检验，多组间比较用方差分析。以P＜0.05有统计学意义。

2 结果

2.1 健康对照组、冠心病组、冠心病伴2型糖尿病组三组相关临床资料分析

冠心病伴2型糖尿病组FBG、HbAlc含量较健康对照组和冠心病组明显增高，差异有统计学意义（P＜0.05）。冠心病组和冠心病伴2型糖尿病组TG、LDL、hs－CRP、HCY含量均较健康对照组增高（P＜0.05），HDL含量较健康对照组降低（P＜0.05）。见表1。

表1 健康对照组、冠心病组、冠心病伴2型糖尿病组三组临床资料比较（±s）

表1 健康对照组、冠心病组、冠心病伴2型糖尿病组三组临床资料比较（±s）

注：与健康对照组比较，＊P＜0.05；与冠心病组比较，＃P＜0.05

健康对照组（n＝80）冠心病组（n＝120）冠心病伴2型糖尿病组（n＝120）50±0.86 57±0.67 60±1.33性别（男／女）37／43 59／61 55／65 SBP（mmHg）125.1±10.2 137.1±17.9 147.7±13.75 DBP（mmHg）78.7±6.9 84.6±11.5 87.9±13.8 BMI（kg／m2）23.8±13.5 25.9±1.9 27.1±2.11 FBG（mmol／L）4.22±1.12 5.36±0.69 9.34±1.38＊＃HbAlc（%）5.01±0.87 6.23±1.33 9.72±1.57＊＃TG（mmol／L）1.68±0.12 2.35±0.09＊2.45±0.12＊HDL（mmol／L）1.43±0.03 0.82±0.17＊0.79±0.13＊LDL（mmol／L）2.55±0.07 3.45±0.07＊3.77±0.08＊hs－CRP（mg／L）3.14±0.25 10.53±0.19＊13.66±1.51＊HCY（μmol／L）7.86±0.31 18.87±0.07＊20.92±0.11年龄＊

2.2 健康对照组、冠心病组、冠心病伴2型糖尿病组三组Gas6浓度水平比较

80例健康对照组Gas6的含量为227.61±7.28 pg／ml，120例冠心病组含量为278.57±6.61pg／ml，120例冠心病伴2型糖尿病组含量为285.66± 6.37pg／ml。冠心病组和冠心病伴2型糖尿病组的血清Gas6浓度显著高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）。冠心病伴2型糖尿病组较冠心病组Gas6水平升高（P＜0.05）。见表2。

表2 健康对照组、冠心病组、冠心病伴2型糖尿病组三组Gas6浓度水平比较（±s）

表2 健康对照组、冠心病组、冠心病伴2型糖尿病组三组Gas6浓度水平比较（±s）

注：与健康对照组比较，＊P＜0.01；与冠心病组比较，＃P＜0.05

健康对照组冠心病组冠心病伴2型（n＝80）（n＝120）糖尿病组（n＝120）Gas6（pg／ml）227.61±7.28 278.57±6.61＊285.66±6.37＊＃

2.3 冠心病伴2型糖尿病患者冠脉造影分组后Gas6浓度水平结果比较

按狭窄累及左冠状动脉前降支，左回旋支，右冠状动脉的支数，病变分为单支病变、双支病变、三支病变，如病变累及左主干计双支病变。根据冠脉病变支数，将冠心病伴2型糖尿病组120例患者分成3组研究其血清中Gas6浓度水平。冠脉单支病变患者35例，冠脉双支病变患者56例，冠脉三支病变患者29例，各组Gas6浓度见表3。冠脉双支病变和三支病变患者组血清Gas6浓度高于单支病变组，差异有统计学意义（P＜0.05）；冠脉三支病变较双支病变患者组血清Gas6浓度升高（P＜0.05）。

表3 冠心病伴2型糖尿病组Gas6按冠脉病变支数分组比较（±s）

表3 冠心病伴2型糖尿病组Gas6按冠脉病变支数分组比较（±s）

注：与冠脉单支病变组比较，aP＜0.05；与冠脉双支病变组比较，bP＜0.05

单支病变双支病变三支病变例数（n＝120）35 56 29 Gas6（pg／ml）277.57±5.63 284.66±7.97a289.66±7.11ab

3 讨论

对冠心病发病机制的研究，近年来偏向于炎症介质学说［1，2］，其病理表现具有炎症病理的基本表现形式：变质、渗出和增生。糖尿病可能是一种由免疫功能紊乱参与的、细胞因子介导的炎症性疾病［4，5］，炎症反应在糖尿病的发生发展中的作用日益受到关注。大量实验证明炎症因子在冠心病、冠心病伴2型糖尿病患者中表达增强［6－8］，如：hs－CRP、HCY等。我们的研究也证明了这一点，冠心病、冠心病伴2型糖尿病患者中的hs－CRP、HCY水平均较健康组增高（P＜0.05）。

临床症状和实验室结果病理资料表明冠心病伴2型糖尿病患者动脉粥样病变严重程度都比非糖尿病患者严重［9］。其中的机制可能为：①糖尿病患者长期高血糖，致使高级糖基化终产物（advanced glycosylation end product，AGE）增多，聚集损伤血管内膜，促进单核细胞和淋巴细胞向受损内皮趋化，加重内皮细胞损伤，促进血管收缩，血液当中的有害物质如血脂、血小板等沉积在血管内壁上，导致管腔变窄［10］。②糖尿病患者血糖增加导致细胞能量代谢紊乱，破坏内皮细胞，血小板在受损内皮上黏附，聚集增加［11］，血栓形成，结果导致冠状动脉粥样硬化发生和发展加速。③冠心病的独立危险因素如高血压、高TG血症、低HDL等，也导致冠心病的发生发展。

Gas6属于维生素K依赖蛋白家族成员，参与炎症反应，动脉粥样硬化和糖尿病的发生发展［12，13］。亦有学者认为Gas6同CRP一样也可能是一种急性时相反应蛋白，在脑梗死、脑出血和AMI急性期反应性增高［14］。Saller等［15］研究指出Gas 6在人及小鼠动脉粥样硬化斑块中的内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞中表达，Gas6参与凋亡细胞的吞噬作用，在细胞凋亡增加时表达有所上调，在炎症发生时Gas6合成可明显增加［16，17］，这些机制都可能与Gas6参与炎症反应进而导致动脉粥样硬化和糖尿病有关。有研究表明Gas6还参与了泡沫细胞的形成及增殖，泡沫细胞形成是动脉粥样硬化形成和发展中的早期变化［18］，大量泡沫细胞聚集形成动脉粥样硬化斑块。

我们用ELISE法检测冠心病患者和冠心病合并2型糖尿病患者血清中Gas6的含量，发现其浓度较健康体检者明显增高，冠心病患者含量为278.57 ±6.61pg／ml，冠心病伴2型糖尿病组含量为285.66±6.37pg／ml，健康对照组Gas6的含量为227.61±7.28pg／ml，差异有统计学意义（P＜0.01）。冠心病伴2型糖尿病组较冠心病组Gas6水平升高（P＜0.05）。

国内关于Gas6与动脉粥样硬化的报道很少，国外亦有类似报道。我们的研究发现在冠心病患者中Gas6水平较正常对照是升高的，这点与唐开放［14］的研究是一致的。

在选取的120例冠心病伴2型糖尿病组中，对其冠脉造影结果进行分组后比较Gas6浓度水平，得出的结论是病变支数越多，其Gas6水平越高（P＜0.05）。其原因可能如前所述，冠心病伴2型糖尿病患者动脉内皮损伤严重，管腔狭窄，病变支数多，炎症程度加重。

本研究显示，Gas6在冠心病伴2型糖尿病发生发展过程中起着重要作用，检测冠心病伴2型糖尿病患者Gas6水平对病情的发生发展及治疗效果监测有着重要临床意义，可作为临床冠心病伴2型糖尿病组常规检测项目来应用于临床。

［1］Li J J.Inflammation an important mechanism for different clinical entities of coronary artery disease［J］.Chin Med J，2005，118（21）：1817.

［2］Libby P.Inflammation in atherosclerosis［J］.Nature，2002，420（6917）：868.

［3］吕树铮，王立新.糖尿病合并冠心病流行病学现状与研究进展［J］.中华老年心脑血管病杂志，2009，11（12）：910.

［4］King GL.The role of inflammatory cytokines in diabetes and its complications［J］.J Periodontol，2008，79（8）：1527.

［5］Li ZZ.Liu JB，Li L，et al.Intensive therapy for diabetes through influence on innate immune system［J］.Med Hypotheses，2009，72（6）：675.

［6］孙余华，裵卫东.炎症与动脉粥样硬化基础和临床研究的新进展［J］.中国循环杂志，2003，18（3）：232.

［7］Bertoni AG，Burke GL，Owusu JA，et al.Inflammation and the incidence of type 2diabetes：the Multi－Ethnic Study of Atherosclerosis（MESA）［J］.Diabetes Care，2010，33（4）：804.

［8］Lee HJ，Her SH，Im YS，et al.Significance of inflammatiory markers in diabetic patients with stable coronary artery disease［J］.Korean J Intern Med，2009，24（3）：212.

［9］汪小萍，王 青.合并糖尿病的冠心病患者冠状动脉病变特点［J］.临床医学，2009，4（27）：103.

［10］Kriszbacher I，Koppan M，Bodis J.Inflammation，atherosclerosis，and coronary artery disease［J］.N Engl J Med，2005，353（4）：429.

［11］Falcone C，Nespoli，Geroli D，et al.Silent myocardial ischemia in diabetic and non－diabetic patients with coronary artery disease［J］.Cardiol，2003，90（2－3）：219.

［12］Sandrine Laurance，Catherine A.Lemarié，Mark D.Blostein.Growth Arrest－Specific Gene 6（gas6）and Vascular Hemostasis［J］.Adv Nutr，2012，3（2）：196.

［13］Hung YJ，Lee CH，Chu NF，et al.Plasma protein Growth arrestspecific 8Levels are associated with altered glucose tolerance，Inflammation，and endothelial dysfunction［J］.Diabetes Care，2010，33：1840.

［14］唐开放，潘学谊.血浆Gas 6水平及其基因多态性与脑梗死和脑出血的相关性研究［J］.血栓与止血学，2012，18（1）：9.

［15］Saller F，Burnier L，Schapira M，et al.Role of the growth arrestspecific gene 6（gas6）product in thrombus stabilization［J］.Blood Cells Mol Dis，2006，36（3）：373.

［16］Ekman C，Gottsater A，Lindblad B，et al.Plasma concentrations of Gas6and soluble Axl correlate with disease and predict mortality in patients with critical limb ischemia［J］.Clin Biochem，2010，43（10－11）：873.

［17］Ekman C，Site DF，GottsaterA，et al.Plasma concentrations of growth arrest specific protein 6and the soluble form of its tyrosine kinase receptor Axl as markers of large abdominal aortic aneurysms［J］.Clin Biochem，2010，43（1－2）：110.

［18］Tjwa M，Moons L，Lutgens E.Pleiotropic role of growth arrestspecific gene 6in atherosclerosis［J］.Curr Opin Lipidol，2009，20（5）：386.

The clinical significance of Gas6 in conronary heart disease complicated with type 2 diabetes mellitus

CHEN Xin，CHEN Jie，JIANG Bing，et al.（Department of Clinical Laboratory，Wuhan NO.1 Hospital，Wuhan 430022，China）

Objective To study the change of growth arrest－specific gene 6（Gas 6）in serum of coronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus，and clinical significance.Methods We have selected 120cases of patients with coronary heartdisease（CHD）out of the in－part patients in cardiovascular department as the coronary heart disease group，and 120cases of patients with coronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus（CHD＋T2DM）as

Gas 6；coronary heart disease；type 2diabetes mellitus；inflammatory factor

R541.4；R587.1

Acoronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus group，80healthy people were selected as controls.Serum levels of Gas6were determined by an enzyme－linked immunosorbent assay（ELISA）kit，FBG，HbAlc，triglyceride（TG），high density lipoprotein（HDL），low density lipoprotein（LDL），hs－CRP，homocysteine（Hcy）were detected and the data were statistically analyzed.Results ELISA adopted to detect the content of Gas 6in the healthy group was 227.61±3.28pg／ml，in CHD group was 278.57±1.61pg／ml and in CHD＋T2DM group was 285.66±2.37pg／ml，in CHD group and CHD＋T2DM group are significantly higher than the control group，CHD＋T2DM group are significantly higher than the CHD group，and the data has statistically significant（P＜0.05）.The more the amount of coronary stenosis is，the higher level of Gas 6is（P＜0.05）.Conclusion The concentraction of growth arrest－specific gene 6（Gas 6）in serum of coronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus increased evidently and rise with the increase in the number of coronary stenosis，Gas 6reaction was closely associated with coronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus.

陈馨（1983－），女，检验医师，研究方向：临床分子检验。

2014－10－14）

1007－4287（2015）06－0896－04

国家自然科学基金资助项目（81170035）；武汉市卫生局科研课题（WX12C29）；武汉市卫生局科研课题（WX14D02）

＊通讯作者