中草药添加剂对育肥猪免疫功能的影响
2015-04-29丁威杨剑波赵勇陈军吴井生张建生邢军
丁威 杨剑波 赵勇 陈军 吴井生 张建生 邢军
摘要 [目的]研究中草药添加剂饲喂育肥猪(巴克夏×梅山猪)免疫功能的影响。[方法]选取48头体重40 kg健康巴梅猪随机分为对照组和3个试验组。分别采集30、60和90 d血样,检测血清中总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白IgG、IgM和补体C3水平。屠宰后对免疫器官进行病理组织学检查,并进行组织切片观察。[结果]添加中草药试验组和对照组在总蛋白水平上差异不显著;试验Ⅰ组白蛋白水平在第30天显著高于对照组(P<0.05);试验Ⅱ组血清中IgG水平在第30天显著高于对照组(P<0.05);Ⅱ组血清中IgM水平在第60天显著低于对照组(P<0.05),90 d极显著低于对照组(P<0.01);C3补体试验组在第30天水平均显著高于对照组(P<0.05)。屠宰组织器官观察和组织学切片观察均无明显差异。[结论]中草药饲料添加剂能够促进育肥猪的免疫功能。
关键词 中草药;免疫功能;育肥猪
中图分类号 S828 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2015)11-136-03
我国是养猪大国,生猪出栏量占世界半壁江山,而猪肉也是我国主要的肉食品之一[1]。随着经济的不断发展和人民生活水平的提高,畜产品的质量和安全越来越受到社会的关注。近年来,一些抗生素、激素以及其他化学合成药物的滥用,致使畜产品药物残留和环境污染而危害到人类健康,甚至出现致死、致畸和致残等相关报道[2]。因此,开发新的替代产品也随之呼之欲出。中草药添加剂依据中兽医理论和动物不同生理需要,由一种或多种不同性味功能的中草药配制而成的饲料添加剂[3],并因其副作用小、天然性和无抗药性等优点现已成为饲料添加剂研究的热点。中草药医学研究和实践表明中草药作为饲料添加剂能够调节动物机体免疫力。基于此,笔者通过设计3种中草药添加剂组方,研究不同组方对育肥猪(巴克夏×梅山猪)免疫功能(总蛋白、白蛋白、IgG、IgM、C3)的影响,以期为生猪健康养殖提供一定的理论基础和生产实践依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验猪。巴克夏×梅山猪杂交商品猪,由镇江牧苑动物科技开发有限公司提供。
1.1.2 中草药添加剂。中草药Ⅰ组方由白术、茯苓、陈皮、炒麦芽、炒山楂等组成;中草药Ⅱ组方由黄芪、首乌藤、淫羊藿、穿心莲、甘草等组成;中草药Ⅲ组方由神曲、苍术、当归、柏子仁、甘草等组成;按照一定比例混合粉碎过100目筛即可。
1.1.3 饲料配方。猪营养需要参考美国NRC标准和地方养猪生产实际情况,确定试验猪的基础日粮组成及营养水平(表1~2)。
1.2 试验方法
1.2.1 饲养试验。选择体重40 kg左右的巴克夏×梅山猪杂交商品猪48头,按“体重相近、公母各半”的方法随机分成对照组、中草药添加剂Ⅰ组、中草药添加剂Ⅱ组、中草药添加剂Ⅲ组,每组3个重复,每个重复4头,重复组所喂日粮相同。预饲期7 d,待试验猪体重达到100 kg左右时终止试验时。饲喂采用群饲方法,每天定时饲喂2次,时间为7:30和15:00,自由饮水。
1.2.2 血样的采集。早晨空腹,耳缘静脉医用采血器静脉采血,4 ℃冰箱静置1 d,3 000 r/min离心10 min后分离血清,分装于Eppendorf管中,于-80 ℃冰箱中冷冻保存,供分析测试用。
1.2.3 血清生理免疫指标的测定。按照试剂盒说明书测定总蛋白(TB)、白蛋白(ALB)、免疫球蛋白IgG、免疫球蛋白IgM和补体C3水平。
1.2.4 病理组织学检查。各组分别在试验结束后,电击后放血处死所有试验用猪,检查脾脏、肾脏、肝脏和肠系膜淋巴结,并采集1~2 cm.2大小的组织样,立即放入10倍于组织块的4% 多聚甲醛溶液中固定并摇匀后,进行常规石蜡组织切片。
1.3 数据处理 所有数据用平均值±标准误表示,采用SPSS18.0统计软件对试验数据进行方差分析,并进行LSD多重比较。
2 结果与分析
2.1 中草药添加剂对猪血清总蛋白浓度的影响由表3可知,与对照组相比,各中草药添加剂组血清中总蛋白水平在30、60和90 d差异不显著,3个时间点检测不同中草药组方作为饲料添加剂均维持血清中总蛋白平衡水平,而中草药Ⅲ组总白蛋白浓度低于对照组,分析认为该组方的主要目的是促进猪快速生长,改善胴体品质。
2.2 中草药添加剂对猪血清白蛋白浓度的影响由表4可知,与对照组相比,各中草药添加剂组血清中白蛋白水平在不同时间点均高于对照组,其中Ⅰ组中30 d与同期对照组相比差异显著(P<0.05),组间差异不显著,说明中草药添加剂能提高血清中白蛋白水平。
2.3 中草药添加剂对猪免疫球蛋白IgG浓度的影响由表5可知,Ⅱ组血清中免疫球蛋白IgG浓度在30 d与对照组相比显著高于对照组(P<0.05),说明中草药能够提高机体IgG水平。但是,在90 d试验组与对照组差异不显著,而90 d对照组高于试验组,究其原因可能是因为中草药在试验早期能提高IgG水平,但后期机体增加效果不显著。
2.4 中草药添加剂对猪免疫球蛋白IgM浓度的影响由表6可知,试验组Ⅲ组和对照组血清中免疫球蛋白IgM浓度在60 d显著高于试验Ⅱ组(P<0.05),90 d与试验Ⅱ组差异极显著(P<0.01);中草药Ⅰ组IgM浓度在90 d显著高于试验Ⅱ组(P<0.05),分析认为试验Ⅱ组可能起到抑制肠道有害物质的入侵,保护机体。
2.5 中草药添加剂对补体C3浓度的影响由表7可知,各中草药试验组在30 d补体C3水平均显著高于对照组,分析认为早期中草药添加剂能增强机体的体液免疫力。
2.6 猪内脏器官病理组织学观察对试验组和对照组育肥猪脾脏、肾脏、肝脏和肠系膜淋巴结的观察发现,外观颜色和大小正常,未见明显病变。病理切片检查发现,试验组与对照组脾脏、肾脏、肝脏和肠系膜淋巴结组织切片形态均在正常范围内,未见特征性病理变化。
3 讨论
总蛋白由白蛋白和免疫球蛋白等组成。在机体内,总蛋白与白蛋白具有维持血浆胶体渗透压、维持血浆正常pH、催化、运输、营养等功能[4]。该试验结果表明,试验组总蛋白水平与对照组相比差异不显著,但白蛋白水平在30 d点,试验Ⅰ组与对照组差异显著(P<0.05),且试验Ⅰ组与Ⅱ组白蛋白3个时间点均高于对照组,中草药Ⅰ组与Ⅱ组育肥猪机体免疫力提高,增强了机体自身营养水平,从而提高了育肥猪的抗病能力。
血清免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)指标的测定是衡量动物机体体液免疫功能最常用的方法[5]。体液免疫动物机体产生抗体的能力,对动物抵抗疾病具有重要防御功能。通常在抗原刺激下机体B淋巴细胞激活分化成记忆细胞和浆细胞,浆细胞产活性的球蛋白,即抗体与抗原发生特异性结合。免疫球蛋白按其理化特性和抗原性可分为IgA、IgD、IgE、IgG 和IgM。这些免疫球蛋白在机体防御系统中发挥着重要的作用,也是机体免疫状况的重要指标。IgG是由脾脏和淋巴结中的浆细胞产生的一种免疫球蛋白,是人类和动物血清中含量最高的免疫球蛋白,是介导体液免疫的主要抗体,能抵抗多种细菌与毒素的侵袭,能够有效保护机体免受感染,在机体免疫功能中具有重要作用。IgM是初次体液免疫应答中最早出现的抗体,是近期感染的标志,主要通过与补体结合,溶解病原体。补体是存在于正常人类和动物血清与组织液中的一组经活化后具有酶活性的蛋白质,不仅与动物机体的免疫系统存在密切关系,而且与血浆中其他酶系互相影响,既是动物机体中重要的生理性防卫系统,又是炎症反应等病理损害的重要介质,为多生物效应的复杂系统。C3是补体系统中含量最多、最重要的一个组分,在补体系统发挥效应功能的关键成分。该研究表明育肥猪饲料中添加中草药能够起到改善血清中免疫球蛋白和补体水平,血清中免疫球蛋白IgG与对照组差异显著;C3补体水平基本维持在正常水平状态,但在30 d试验组显著高于对照组。IgM水平在与对照组相比发现差异极显著,分析可能饲料中中草药添加剂能够显著抑制肠道有害物质对机体的入侵。这些结果表明饲料中添加中草药能够起到改善机体的体液免疫功能。何正义等[6]研究表明中草药添加剂能显著提高杜长大育肥猪血清中免疫球蛋白IgG的水平。谢红兵等[7]在杜长大断奶仔猪基础日粮中添加精制中草药制剂,结果表明与对照组相比总蛋白、白蛋白、球蛋白、免疫球蛋白(IgG)和补体(C3)在血清中均有显著提高[8]。杜改海等[9]育肥期梅山猪饲料中添加中草药添加剂可显著提高猪血清中免疫球蛋白IgG 含量和补体C3 含量,这与该研究结果相一致。该研究在饲料中添加中草药添加剂的育肥猪IgM水平低于对照组,可能是因为该组方中一些中草药饲料添加剂具有抗菌驱虫的作用,尤其是清热解毒类中草药能有效抑制和杀灭细菌、病毒、寄生虫等病原菌,保护机体免受病原微生物的侵害,防止传染性疾病的发生。
中草药添加剂是依据中兽医理论和动物不同生理需要、由1种或多种不同性味功能的中草药配制而成的饲料添加剂[3],但中草药是含有特殊活性物质的动、植物组织,作为饲料添加剂取代抗生素而大量或不当使用时,对饲养动物或人类健康也可能会有不利作用[3]。笔者观察发现试验组和对照组脾脏、肾脏、肝脏和肠系膜淋巴结外观颜色和大小正常,未见明显病变。病理切片检查发现,试验组与对照组脾脏、肾脏、肝脏和肠系膜淋巴结组织切片形态均在正常范围内,未见特征性病理变化,与杜改海等[9]的研究结果相一致。
该研究中草药饲料添加剂对猪血清免疫球蛋白和补体水平结果表明,3种组方的中草药复方制剂作为饲料添加剂能够起到改善机体的体液免疫功能,由于试验间隔时间点较长,对于其具体作用机制有待于进一步研究。
参考文献
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[9] 杜改梅,晏文梅,蒋加进,等.中草药饲料添加剂对生长猪免疫功能的影响[J].畜牧与兽医,2013(8):19-22.