狭叶獐牙菜化学成分研究

陈丽元，李水仙，夏从龙*

（1.大理学院药学与化学学院，云南大理 671000；2.大理学院基础医学院，云南大理 671000）

狭叶獐牙菜（Swertia angustifoliaBuch.）属于龙胆科獐牙菜属植物，分布于云南、广西、贵州等地，常生长于海拔为1 500～3 300 m的田边、草坡及荒地，民间常用全草代替青叶胆入药，具有清热解毒、健胃、除湿利胆的功效，用于治疗黄疸型肝炎、胆囊炎等疾病〔1-2〕。由于目前对狭叶獐牙菜研究较少，为了解其药用成分的结构特点，我们对狭叶獐牙菜的主要化学成分进行了初步的研究，从95%乙醇提取物的氯仿部位分离鉴定了4个化合物。分别鉴定为齐墩果酸（1）、乌苏酸（2）、羽扇豆醇（3）、β-羟基-11α，12α-环氧齐敦果-28，13β-内酯（4）。见图1。

图1 化合物1～4的化学结构

1 仪器与材料

1.1 实验材料 实验材料于2008年10月采自云南省大理市凤阳桥后山，由药学与化学学院夏从龙教授鉴定为龙胆科狭叶獐牙菜（Swertia angustifoliaBuch.）的全草。

1.2 仪器与试剂 Bruker AM-400型核磁共振波谱仪，四甲基硅烷（TMS）为内标；瑞士Büchi R-210型旋转蒸发仪；柱层析硅胶、薄层层析板硅胶G和GF254（青岛海洋化工厂）；Sephadex LH-20（Pharmacia公司）；其他化学试剂均为化学纯。显色方法为10%硫酸乙醇溶液处理后烘烤显色或碘蒸气熏蒸显色。

2 提取与分离

狭叶獐牙菜自然晾干（9.8 kg），粉碎后用95%乙醇回流提取，每次3 h，共提取3次，提取液合并浓缩得浸膏，加水分散后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯分配，氯仿部位浓缩（150 g），以少量粗硅胶拌样后用200～300目硅胶柱层析，石油醚-丙酮混合溶剂（30∶1，20∶1，15∶1，10∶1，5∶1，1∶1）梯度洗脱，得到5个组分FrA～E。组分FrA反复经硅胶柱层析（石油醚/氯仿、氯仿/丙酮）洗脱、凝胶柱Sephadex LH-20层析，得到化合物1（11.584 8 g）、化合物2（20 mg）、组分FrB经反复硅胶柱层析（石油醚/丙酮、石油醚/氯仿）洗脱、凝胶柱Sephadex LH-20纯化得到化合物3（15 mg）、化合物4（15 mg）。

3 实验结果

化合物1：C30H48O3；白色粉末（氯仿）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：183.33（C-28），143.60（C-13），122.64（C-12），79.04（C-3），55.22（C-5），47.64（C-9），46.53（C-19），45.88（C-17），41.59（C-14），40.98（C-18），39.28（C-8），38.76（C-4），38.40（C-1），37.09（C-10），33.80（C-21），33.07（C-29），32.61（C-22），32.44（C-7），30.68（C-23），28.10（C-20），27.69（C-2），27.18（C-15），25.94（C-27），23.58（C-16），23.40（C-30），22.92（C-11），18.30（C-9），17.15（C-26），15.54（C-24），15.32（C-25）。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.28（1H，t，J=3.47 Hz，12-H），3.22（1H，dd，J=4.07，5.23 Hz，3-H），2.82（1H，dd，J=4.07，4.68 Hz，18-H），1.13，0.99，0.93，0.91，0.90，0.77，0.75（各3H，s，-CH3×7）。以上数据与文献〔3〕报道对比，鉴定化合物1为齐墩果酸。

化合物2：C30H48O3；白色粉末（氯仿）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：181.95（C-28），139.82（C-13），123.08（C-12），79.01（C-3），55.50（C-5），53.15（C-18），47.99（C-17），47.6（C-9），42.56（C-14），41.35（C-8），40.66（C-19），38.94（C-20），38.88（C-4），38.23（C-1），37.64（C-10），37.56（C-22），34.58（C-7），31.05（C-21），29.10（C-23），28.96（C-15），28.38（C-2），23.59（C-16），23.40（C-11），22.90（C-27），21.93（C-30），18.22（C-6），17.22（C-26），17.02（C-24），16.66（C-29），15.38（C-25）。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.29（1H，s，H-12），3.24（1H，m，H-3），2.84（1H，d，J=15.05 Hz，H-18），1.28，1.15，0.88，0.79，0.77（3H，s，-CH3×5），1.00（3H，d，J=6.61 Hz，H-30），0.94（3H，d，J=7.41 Hz，H-29）。以上数据与文献〔4〕报道对比，鉴定化合物2为乌苏酸。

化合物3：C30H48O；白色粉末（氯仿）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：150.89（C-20），109.38（C-29），80.56（C-3），55.40（C-5），50.35（C-9），48.30（C-18），48.01（C-19），43.00（C-17），42.84（C-14），40.86（C-8），40.01（C-22），39.82（C-1），38.27（C-4），38.07（C-13），37.10（C-10），35.59（C-16），34.23（C-7），29.72（C-21），27.98（C-23），27.45（C-2），26.95（C-15），25.19（C-12），20.96（C-11），19.30（C-30），18.28（C-6），18.01（C-28），16.18（C-26），15.99（C-25），15.55（C-24），14.53（C-27）。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：4.67（1H，d，J=2.07 Hz，H-29），4.56（1H，d，J=2.08Hz，H-29），3.22（1H，dd，J=4.07，5.23Hz，3-H），2.36（1H，m，H-19），1.25，1.03，0.97，0.94，0.86，0.83，0.79（各3H，s，7×CH3）。以上数据与文献〔5〕报道对比，鉴定化合物3为羽扇豆醇。

化合物4：C30H46O4；白色粉末（氯仿）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：179.35（C-28），87.53（C-13），78.77（C-3），57.10（C-12），54.60（C-5），52.73（C-11），50.71（C-9），49.61（C-18），43.86（C-17），41.30（C-8），40.53（C-14），38.86（C-4），38.15（C-1），37.76（C-19），36.47（C-10），34.29（C-21），33.19（C-29），31.45（C-20），31.10（C-7），27.78（C-23），27.00（C-22），26.79（C-2），26.70（C-15），23.59（C-30），21.27（C-16），20.04（C-26），18.84（C-27），17.58（C-6），17.18（C-25），15.09（C-24）。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：3.27（1H，m，3-H），3.05（2H，t，J=5.30 Hz，H-11，12），2.34（1H，dd，J=3.41，2.79 Hz，H-18），2.15（1H，m，H-16），1.92（1H，m，H-19），1.57（1H，s，H-19），1.12，1.08，1.04，1.01，0.94，0.82（各3H，s，-CH3×6）。以上数据与文献〔6〕报道对比，鉴定化合物4为3β-羟基-11α，12α-环氧齐墩果-28，13β-内酯。

4 讨论

青叶胆为龙胆科獐牙菜属植物青叶胆的干燥全草，味苦、微寒、归肝胆经，具有清肝利胆、清热利湿的功效，用于黄疸尿赤、热淋涩痛。具有保肝、解毒、降酶、抗菌消炎等多种药理作用。近年来青叶胆被大量采挖，资源逐年减少，但该属其他种资源丰富，民间用其同属植物代替青叶胆，狭叶獐牙菜就是其中之一，关于狭叶獐牙菜的化学成分研究报道较少，本研究从狭叶獐牙菜中分离得到的4个化学成分中，化合物1齐墩果酸的含量最多，据文献报道齐墩果酸能抑制环磷酰胺所致的肝细胞培养上清液谷丙转氨酶、谷草转氨酶及乳酸脱氢酶活性增强，肝细胞MTT（噻唑蓝）值减小，同时可降低谷氨酸诱导的海马神经元〔Ca2+〕升高，对谷氨酸诱导的海马神经元损伤有一定的保护作用〔7-10〕。这为狭叶獐牙菜能代替青叶胆作为治疗肝炎类药物使用提供了依据。

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