新辅助化疗前后宫颈癌组织中MK、MVD的表达变化及其临床意义

叶 芬

新辅助化疗前后宫颈癌组织中MK、MVD的表达变化及其临床意义

叶 芬

目的观察新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy，NACT)前后宫颈癌组织中中期因子(midkine，MK)、微血管密度(microvessel density，MVD)的表达变化。方法临床纳入宫颈鳞癌患者35例，患者均给予顺铂+平阳霉素进行NACT。采用免疫组化SP法检测NACT前后肿瘤组织中MK以及CD34的表达。结果患者接受NACT治疗后，临床完全缓解(CR)4例，部分缓解(PR)25例，总有效率(CR+PR)82.86%。NACT前后，患者MK表达分别为74.28%、31.43%；MVD水平分别为(24.63±9.15)、(16.55±7.58)。NACT前后MK及MVD表达差异均有统计学意义(P<0.05)；临床有效组NACT前后，患者MK表达分别为75.86%、31.03%，差异有显著性(P<0.05)。临床无效组NACT前后患者MK表达分别为66.67%、33.33%，差异无统计学意义(P>0.05)。临床无效组和有效组NACT前后，患者MVD水平差异均有统计学意义(P<0.05)。结论NACT治疗宫颈鳞癌的临床有效率较高，其能够降低MK与MVD水平。NACT发挥治疗作用的机制可能与抑制肿瘤血管生成有关，而通过检测MK在NACT前后的表达变化能够协助预测NACT的临床疗效。

新辅助化疗；宫颈癌；中期因子；微血管密度；表达

(ThePracticalJournalofCancer,2015,30:1609～1611)

目前，临床上治疗宫颈癌主要采用手术、放疗以及新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy，NACT)等方法[1]。NACT是指在患者接受主要治疗前先进行化疗，然后再接受手术治疗或放疗[2]。研究显示，NACT能够有效对镜下微转移灶进行消除，抑制肿瘤细胞的生长，从而缩小肿瘤组织的体积，提高手术成功率等[3]。近年来的研究显示，宫颈癌组织中中期因子(midkine，MK)以及微血管密度(microvessel density，MVD)的表达明显升高[4-5]。为探讨NACT前后宫颈癌组织中MK与MVD表达的变化，我们对35例宫颈鳞癌患者进行了相关指标的检测与分析，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

本研究共纳入宫颈鳞癌患者35例，均为我院2010年1月-2014年1月收住入院的病例。患者入组前均已经过活检，病理诊断明确。患者均进行1～2个疗程的NACT，方案为顺铂+平阳霉素。患者年龄22～69岁，平均年龄(41.6±10.6)岁；FIGO分期：Ⅰb2期9例，Ⅱ期25例，Ⅲ期1例；中高分化9例，低分化26例；淋巴结转移8例，无淋巴结转移27例。

1.2 NACT疗效评定标准

采用直接观察以及测量子宫颈病灶大小进行，部分患者参照阴道B超或CT测量的子宫颈病灶大小变化进行评估。近期疗效评定：根据实体瘤疗效评价标准进行评估，患者每半月进行一次复查。完全缓解(CR)：化疗后，检查显示肿瘤部位外观无明显异常，周围组织富有弹性，肿瘤100%消退，至少持续4周以上；部分缓解(PR)：肿瘤周围组织弹性变差，肿瘤较前缩小1/2以上，至少持续4周以上；无变化或无效(SD)：肿瘤周围组织增厚，同治疗前相比，检查肿瘤体积较前缩小低于1/2；进展(PD)：肿瘤增大1/4以上或出现新病灶及转移。其中，以CR+PR为化疗有效，SD+PD为化疗无效。

1.3 宫颈癌组织中MK与CD34表达检测方法

肿瘤组织标本先经10%甲醛固定，常规石蜡包埋，4 μm厚连续切片。然后经二甲苯脱蜡、梯度酒精脱水、灭活内源性酶、热抗原修复、滴加一抗(MK浓度1∶50，CD34浓度1∶150)后置于4 ℃冰箱内过夜、二抗处理后滴加辣根酶标记链亲和素、DAB显色、复染、脱水、透明、中性树胶封片，并在显微镜下观察结果。用已知阳性切片作为阳性对照，PBS代替一抗作为阴性对照。

1.4 结果判定标准

①MK表达：以肿瘤组织细胞质或细胞膜出现清晰黄色颗粒作为阳性结果，MK阳性细胞数<5%为阴性，≥5%～10%为弱阳性，10%～15%为中阳性，>15%为强阳性；②MVD水平，以CD34免疫组化结果计数MVD值，血管内皮细胞出现棕黄色或黄色颗粒判定为阳性。在高倍视野(×400倍)下分别计数每个活跃区的微血管数,取5个活跃区的平均值作为该组织的MVD值。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 NACT临床疗效分析

患者接受NACT治疗后，临床完全缓解(CR)4例，部分缓解(PR)25例，SD 6例，总有效率(CR+PR)为82.86%。

2.2 NACT治疗前后患者宫颈癌组织中MK与MVD表达比较

NACT前后，患者MK表达分别为74.28%(28/35)、31.43%(11/35)，差异有统计学意义(χ2=16.73，P<0.05)。MVD水平分别为(24.63±9.15)、(16.55±7.58)，差异有统计学意义(χ2=4.02，P<0.05)。

2.3 NACT不同临床疗效组治疗前后MK、MVD表达比较

观察不同临床疗效组可见，临床有效组NACT前后，患者MK表达分别为75.86%、31.03%，差异有统计学意义(χ2=9.78，P<0.05)；临床无效组NACT前后，患者MK表达分别为66.67%、33.33%，差异无统计学意义(χ2=0.73，P>0.05)。临床有效组NACT前后，患者MVD水平分别为(24.15±8.53)、(16.25±7.47)，差异有统计学意义(χ2=4.12，P<0.05)；临床无效组NACT前后，患者MVD水平分别为(26.96±12.40)、(21.00±8.68)，差异有统计学意义(χ2=2.33，P<0.05)。

3 讨论

宫颈癌是妇科中较为多见的一种恶性肿瘤，近年来其临床发病呈现了年轻化的趋势。NACT是近年来临床兴起的一种治疗方法，其能够为临床上较为年轻的宫颈癌患者提供手术机会。在手术过程中，进行的卵巢移位能够避免放射治疗导致的卵巢功能损伤。此外，局部肿瘤灶缩小就能够尽可能多地保留阴道，从而在较大程度上提高了患者术后的生活质量[6]。美国曾进行了5个大规模的临床研究，发现以顺铂为主的化疗方案能够显著改善宫颈癌患者的生存率以及无瘤生存率[7]。本研究共纳入Ⅰb2～Ⅲ期宫颈癌患者35例，经过NACT后进行临床疗效评估，结果发现CR 4例，PR 25例，总治疗有效率达到82.86%，这与目前现有的文献报道一致[8]。但是，并不是所有的宫颈癌患者均对NACT治疗敏感，因此对于此类患者，进行NACT反而会延误患者的治疗，导致病情的进展。因此，临床上如果通过检测某些指标，能够准确反映患者化疗后对于NACT的敏感性，就能够为临床合理选择化疗方案提供指导意见。

MK属于分泌性肝素结合生长因子，其在妊娠中期胎儿的脑组织中呈现高表达。出生时MK的表达逐渐减低，成年后，MK仅能够在小肠、小脑、甲状腺、肾脏、膀胱、肺泡、直肠、胃以及脾中见到少量的表达[9]。近年来，大量的文献报道，MK与临床上多种肿瘤的发生以及发展存在着较为密切的联系，如食管癌、胃癌、直肠癌、胰腺癌、肝癌等。有学者甚至主张将MK检测作为恶性肿瘤高危人群的筛查以及随访指标[10]。徐秋霞等的研究表明[11]，在宫颈癌分期越大的患者中，MK与MVD表达越高。研究显示，MK、MVD的表达程度与宫颈癌的发展有密切联系。研究还发现，MK具有多种生物活性，可诱导细胞分化，修复组织以及促瘤作用等，而MVD与MK有关。其认为宫颈癌的进展可能与MK的生物活性有关，MK表达越高，宫颈癌发展越成熟。本研究发现，宫颈癌组织中MK明显升高。研究显示，微血管的形成在恶性肿瘤的生长、浸润以及转移中的作用已经得到广泛证实，MVD越高，肿瘤的生长速度就越快，恶性程度就越高，并且很容易出现肿瘤的转移。结果与徐秋霞等的研究一致。而孙晋瑞等对宫颈癌治疗效果的研究显示[12]，NACT治疗后，大多数宫颈癌患者MK、MVD均有大幅度下降，且也可明显发现宫颈癌治疗效果有显著提升。其认为NACT在肿瘤新生血管及分化作用中起到强力的抑制作用。本研究进行了自身对照实验设计，对比NACT前后患者MK、MVD的变化。结果显示，患者接受NACT后，MK以及MVD表达均出现明显的下降(P<0.05)。另外，临床有效组患者接受NACT后，MK以及MVD表达均出现明显的下降(P<0.05)。临床无效组患者接受NACT后，MVD表达出现明显的下降(P<0.05)。上述结果提示，NACT可降低患者体内MK、MVD的表达，抑制其活性，从而减少了其促进肿瘤分化的作用。这与孙晋瑞等的结论相符。

综上所述，NACT治疗宫颈鳞癌的临床有效率较高，其能够降低MK与MVD水平。NACT发挥治疗作用的机制可能与抑制肿瘤血管生成有关，而通过检测MK在NACT前后的表达变化能够协助预测NACT的临床疗效。

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(编辑：甘 艳)

The Expression of MK and MVD in Cervical Cancer Treated with Neoadjuvant Chemotherapy and Its Clinical Significance

YEFen.

Objective To observe the expression change of midkine(MK) and microvessel density(MVD) in cervical cancer tissues before and after neoadjuvant chemotherapy (NACT).Methods 35 cases of cervical squamous cell carcinoma were treated with cisplatin and pingyang mycin NACT.Immunohistochemical SP method was used to detect MK and CD34 expression in cervical cancer tissues before and after NACT.Results After NACT therapy，there had 4 cases of complete remission (CR),25 cases of partial remission (PR),the total efficiency (CR+PR)was 82.86%.Before and after NACT,MK expression in patients were respectively 74.28%,31.43%,MVD levels were (24.63±9.15),(16.55±7.58),there was significant difference (P<0.05);MK expression in patients in clinical ineffective group before and after NACT were respectively 66.67% and 33.33%,the difference was not significant (P>0.05).Conclusion NACT for cervical squamous cell carcinoma is effective,it can reduce the level of MK and MVD.Mechanism of NACT may be related to the inhⅠBition of tumor angiogenesis.Detection of MK can help predict the clinical efficacy of NACT.

Neoadjuvant chemotherapy;Cervical carcinoma;Midkine;Microvessel density;Expression

432000 湖北省职业技术学院

10.3969/j.issn.1001-5930.2015.11.008

R737.33

A

1001-5930(2015)11-1609-03

2015-01-12

2015-05-21)

HubeiPolytechnicInstitute,Xiaogan,432000