消石胶囊对泌尿系结石干预机制的实验研究*

董永军，曹永孝

(1.庆阳市妇幼保健院， 甘肃 庆阳745000； 2.西安交通大学医学院药理学系，陕西 西安 710061)

·实验研究·

消石胶囊对泌尿系结石干预机制的实验研究*

董永军1，曹永孝2

(1.庆阳市妇幼保健院， 甘肃 庆阳745000； 2.西安交通大学医学院药理学系，陕西 西安 710061)

目的：观察消石胶囊对泌尿系结石干预的机制。方法：用乙二醇法复制大鼠肾结石模型，研究消石胶囊对肾结石形成的抑制作用；用代谢笼集尿法研究其利尿作用；用扭体法研究其镇痛作用；用伊文斯蓝法研究其对腹腔毛细血管通透性的作用。结果：消石胶囊大、中、小剂量均有抑制结石形成作用； 此外，消石胶囊大剂量有利尿作用，大、中剂量有镇痛作用。结论：消石胶囊对泌尿系结石干预可能是通过抑制结石形成及利尿作用来实现的。

消石胶囊/药效学；泌尿系结石/药物作用；动物模型；大鼠；小鼠

消石胶囊是甘肃省庆阳市妇幼保健院董永军主任医师等研制的中药复方制剂，主要由广金钱草、石韦、威灵仙等组成，有清热利湿、活血止痛、补肾化气、溶石排石的功能，主治肾、输尿管、膀胱等泌尿系结石。为进一步探讨其作用机制，本课题组设立实验对大鼠泌尿系结石的干预机制进行了研究。

1 材 料

1.1 动 物

SD雄性大鼠，体质量(180±20)g，合格证号为陕动证字08-004号；ICR小鼠，体质量(20±2)g，雌雄兼用，合格证号为陕动证字08-003号。

1.2 药品、试剂与仪器

消石胶囊由甘肃省庆阳市中医医院提供，批号050410；玉林消石片，广西玉林制药有限责任公司产品，批号 438029；氢氯噻嗪，山西临汾云鹏药业有限公司产品，批号20050401。HH-S112型电热恒温水浴锅，江苏医疗器械厂产品；721-分光光度计，上海第三分析仪器厂产品；AnalyTech-738半自动生化分析仪，上海安泰分析仪器公司产品；80-2B型离心机，无锡瑞江分析仪器公司产品；BS1103型电子天平，北京赛多利斯天平有限公司产品；BF202型生物显微镜，重庆麦克光电仪器有限公司产品。

2 方法与结果

2.1 模型的建立

将78只大鼠禁食、给水1d，随机分成正常对照组、模型对照组、玉林消石片组和消石胶囊大、中、小剂量组。大鼠自由饮用含1.4mL/L乙二醇和0.7g/L氯化铵的水溶液[1-2]，连续30d；用10mL/L的乙二醇和10g/L的氯化铵继续喂养10d[3]，同时各组每天以相应药物灌胃给药。40d后处死动物, 纵向剖开肾脏, 在解剖显微镜下观察结晶沉淀物及游离结石或钙化斑，作为判断结石的标准。见表1。

表1 结石形成及对肾脏损伤程度的检测标准

2.2 统计学方法

2.3 对大鼠肾脏结石形成的抑制作用

肾脏常规石腊包埋，切片，HE染色，显微镜下观察病理变化。正常对照组：大鼠肾脏皮质、髓质分界清楚，皮质内肾小球分布、结构如常，肾皮质、髓质及肾乳头均无可见的结石和结晶沉淀物, 肾外形无异常，肾小囊内未见渗出、增生，肾小管上皮未见变性、坏死及脱落，肾小管管腔内未见管型(见图1)。模型对照组：大鼠肾小管内可见大量结晶，有游离结石形成(见图2)。玉林消石片组：大鼠肾髓质的肾小管内可见少量的结晶沉淀物(见图3)。消石胶囊大剂量组：大鼠肾小管内仅见少量的结晶沉淀物(见图4)。消石胶囊中剂量组：肾皮质的肾小管内可见结晶沉淀物或有小的游离结晶，以远曲小管更为多见，但明显少于模型对照组(见图5)。消石胶囊小剂量组：肾皮质深部肾小管内可见结晶沉淀物或有小的游离结晶，但仍少于模型对照组(见图6)。

图1 正常对照组大鼠肾脏光镜照片(HE)

图2 模型对照组大鼠肾脏光镜照片(HE)

图3 玉林消石片组大鼠肾脏光镜照片(HE)

图4 消石胶囊大剂量组大鼠肾脏光镜照片(HE)

图5 消石胶囊中剂量组大鼠肾脏光镜照片(HE)

图6 消石胶囊小剂量组大鼠肾脏光镜照片(HE)

消石胶囊大剂量组和中剂量组肾脏的结石形成率明显低于模型对照组，差别有统计学意义(P<0.01)。模型对照组大鼠肾脏有明显的结石形成并对肾脏造成损伤，消石胶囊3个剂量组大鼠肾脏结石形成及对肾脏损伤程度均明显较模型对照组轻，且有统计学意义。见表2。

表2 各组大鼠肾脏损伤对比 n=13

注：与模型对照组对比，* P<0.05，** P<0.01。

2.4 对大鼠尿量的干预

取大鼠50只，轻压下腹部使膀胱排空后灌胃生理盐水20μL/g，将大鼠置于代谢笼中，1只鼠放1个代谢笼，测24h尿量。随机将大鼠分为正常对照组、氢氯噻嗪组和消石胶囊大、中、小剂量组5组，每组10只。各组均灌胃给相应药物(正常对照组给以生理盐水)，容积20μL/g，1d1次，连续4d。末次给药后，再测大鼠24h尿量[4]。结果：消石胶囊大剂量组较正常对照组尿量增加，差别有统计学意义(P<0.01)。见表3。

表3 各组大鼠尿量和尿量增加值对比

注：与正常对照组对比，** P<0.01。

2.5 对小鼠痛觉的干预

取雄性小鼠100只，体质量(20±2)g，随机分为模型对照组、阿司匹林组和消石胶囊大、中、小剂量组5组，每组20只。各组均灌胃相应药物(模型对照组给以生理盐水)20μL/g,1d1次，连续4d。于末次给药后40min，腹腔注射 6g/L醋酸溶液，记录各组小鼠15min内的扭体次数。结果：阿司匹林组和消石胶囊大、中剂量组小鼠扭体次数减少，与模型对照组对比，差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。见表4。

表4 各组小鼠扭体数对比

注：与模型对照组对比，* P<0.05，** P<0.01。

2.6 对小鼠腹腔毛细血管通透性的干预

取雄性小鼠50只随机分为模型对照组、阿斯匹林组和消石胶囊大、中、小剂量组5组，每组10只。各组均灌胃相应药物(模型对照组给以生理盐水)20μL/g,1d1次，连续4d。末次给药后1h，腹腔注射质量分数6g/L醋酸0.3mL；30min后，尾静脉注射6g/L的 伊文斯蓝生理盐水溶液10μL/g；20min后，脱颈椎处死小鼠；切开腹腔，用6mL生理盐水洗涤腹腔,吸管吸出洗涤液4mL，加生理盐水稀释至10mL;3 000r/min离心15min;取上清液于578nm比色测定，读取吸光度值。结果：消石胶囊大、中、小剂量组吸光度值与模型对照组对比，差别无统计学意义。见表5。

表5 各组小鼠腹腔毛细血管通透性对比

注：与模型对照组对比，** P<0.01。

3 讨 论

消石胶囊由广金钱草、石韦、威灵仙、怀牛膝、延胡索等药物经有效成分提取而制成[5]。方中广金钱草、海金砂味甘，性寒，入膀胱经，具有清热、利尿、通淋之功。金钱草兼咸味，可软坚、清热、排石，是排石专药。现代药理学研究证实，金钱草可引起输尿管上段腔内压力增高，输尿管蠕动增强，尿量增加，促使结石排出；此外，口服金钱草可使尿液变为酸性，能促使在碱性环境中才能存在的结石溶解[6]。海金砂利尿通淋，善于治疗上尿道疼痛，亦是治诸淋涩痛的要药；其煎剂对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、福氏杆菌均有抑制作用。石韦长于清热利湿通淋，还能抑制草酸盐结晶沉淀，具有防治结石形成的作用。威灵仙其性猛急，善走而不守，可宣通十二经脉，具有缓解平滑肌痉挛的作用，故有溶石和促进排石之功效；配合延胡索，既可行血中之气滞，又可散气中之血瘀，为治疗结石诱发肾绞痛之要药。怀牛膝味酸苦，性平，归肝肾二经，其性滑利，善下行，能活血祛瘀、补肝肾、强筋骨、利尿通淋。配肉桂，温肾助阳化气，为标本兼顾之法。纵观全方，主次分明，标本兼顾，相辅相成，共奏清热利湿、补肾化气、排石溶石之功效。

本研究结果显示：①消石胶囊各剂量均对大鼠肾脏结石形成有抑制作用；②消石胶囊大剂量明显增加大鼠日尿量；③消石胶囊大、中剂量有镇痛作用。由此可推断：消石胶囊对大鼠泌尿系结石的干预机制可能是通过其对结石形成过程的抑制及利尿作用来完成的。

[1]曹正国，刘继红，段永芳，等. 几种实验性大鼠肾草酸钙结石模型的比较研究[J].华中科技大学学报，2002, 31(5): 93-96.

[2]陈奇. 中药药理研究方法学[M]. 北京：人民卫生出版社，1993：389-391.

[3]钟玲，熊爱华，杨延秀，等. 乙二醇法复制肾结石模型给药途径和方法的比较[J]. 中国病理生理杂志，2000，16(4):381-382.

[4]徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M]. 2版. 北京:人民卫生出版社,1994：1052.

[5]董永军，景秀珍，杨楠，等.消石胶囊治疗泌尿系结石的临床观察[J]. 世界中西医结合杂志，2008：350-352.

[6]田代华.实用中药词典[M]. 北京:人民卫生出版社,2002：1178.

(编辑 陶 珠)

1001-6910(2015)02-0064-04

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B

10.3969/j.issn.1001-6910.2015.02.30

甘肃省庆阳市科技攻关项目(GDK022-1-17)

2014-09-22；

2014-11-13