1 176例血培养检出真菌及细菌的耐药性分析

杨丽静，银吉卓玛，巫全桂

（青海省大通县红十字医院检验科，青海 西宁 810100）

1 176例血培养检出真菌及细菌的耐药性分析

杨丽静，银吉卓玛，巫全桂

（青海省大通县红十字医院检验科，青海 西宁 810100）

目的调查2010～2013年医院常见真菌、细菌的耐药性，为临床用药提供依据。方法用BacT/Alert 3D全自动血培养仪进行培养，用VITEK鉴定系统进行细菌鉴定和药敏试验，用WHONET5.4统计结果。结果1 176例送检标本中阳性标本108例，阳性率为9.18%。分离病原菌123株，革兰阳性菌60株（48.78%），革兰阴性菌为47株（38.21%），真菌为16株（13.01%）。前5位病原菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌（44株）、大肠埃希菌（18株）、肺炎克雷伯菌（15株）、白色念珠菌（10株）、金黄色葡萄球菌（7株）。耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）、金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率分别为72.73%（32/44）、57.14%（4/7），MRSA和MRCNS较MSSA和MSCNS对抗菌药物耐药率高，未发现对万古霉素及利奈唑胺耐药的葡萄球菌。酮康唑、氟康唑、咪康唑对白色念珠菌敏感率高。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）率分别为50.00%、40.00%，亚胺培南和美罗培南敏感率为100.00%。头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦对肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌敏感率较高。结论血培养以凝固酶阴性葡萄球菌为主，分离菌的耐药性较强，应加强血培养，指导临床合理用药。

血培养； 细菌； 真菌； 耐药性； 药敏试验

因免疫抑制剂、化疗药物、广谱抗菌药物的使用，条件致病菌引发的感染也日益突出，临床分离病原菌的耐药性日趋严重。血流感染因起病急、病死率高、严重威胁患者生命［1］。因此，监测血培养中细菌分布及耐药性的变迁十分重要，现回顾性分析本院2011年1月至2013年12月的血培养阳性结果，报道如下。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 2010年1月至2013年12月，剔除同一患者相同部位的重复分离菌株。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄葡葡萄球菌ATCC25923和白色念珠菌ATCC90028。

1.2 细菌培养、鉴定及药敏试验 临床科室在有感染体征的患者于抗菌药物使用前采集静脉血标本，成人血量8～10mL，儿童3～5mL，每次采集一套（需氧瓶及厌氧瓶），用BacT/A－lert3D全自动血培养仪（配套瓶）培养。阳性标本操作规程转种［2］，用VITEK微生自动鉴定药敏仪鉴定细菌和药敏试验判断标准参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）的相关文件［3］。真菌药敏试剂盒为珠海银科产品。

1.3 统计学处理 数据记录及分析采用WHONET5.4软件。

2 结 果

2.1 病原菌分布 2010～2013年共接收血培养1 176例，分离菌株阳性标本108例，标本分离阳性率为9.18%。共分离菌株123株，其中革兰阳性菌占48.78%（60/123），革兰阴性菌占38.21%（47/123），真菌占13.01%（16/123）。检出例数排前5位的病原菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌（44例）、大肠埃希菌（18例）、肺炎克雷伯菌（15例）、白色念珠菌（10例）、金黄色葡萄球菌（7例），见表1。

2.2 临床主要分离菌对常用抗菌药物的耐药性

2.2.1 白色念珠菌 白色念珠菌对酮康唑、氟康唑、咪康唑敏感，其敏感率分别为90.00%、90.00%和80.00%。白色念珠菌对益康唑和制菌霉素的敏感性均为50.00%，对二性霉素B、伊曲康唑的敏感性差，分别为40.00%、30.00%。

2.2.2 革兰阳性菌 耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率分别为72.73%（32/44）、57.14%（4/7）。耐甲氧西林菌株（MRSA和MRCNS）较甲氧西林敏感株［甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）和甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）］对抗菌药物耐药率更高，特别对左氧氟沙星和庆大霉素的耐药率升高。未发现对万古霉素耐药或中介的葡萄球菌，所有检出的葡萄球菌对利奈唑胺敏感率为100.00%，见表2。

2.2.3 革兰阴性菌 肠杆菌科大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）率分别为50.00%（9/18）、40.00%（6/15）。杆菌科细菌对亚胺培南、美罗培南、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦的肠敏感性较高。铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦两种复合剂敏感性较高，对亚胺培南、美罗培南有一定的敏感性，见表3。

3 讨 论

在血流感染中，有文献报道检出的病原菌以革兰阴性杆菌为主［1，4］，也有报道以革兰阳性球菌为主，特别是以凝固酶阴性葡萄球菌为主［5－6］。本研究中，血培养的细菌检出率为9.18%，以革兰阳性菌为主（占48.78%），尤其是凝固酶阴性葡萄球菌（占35.77%），与文献［5－6］的报道一致。革兰阴性菌（占38.21%）中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌分别为检出率排第二、三位的细菌。真菌检出率为13.01%，高于文献报道，表明不同地区、不同医院或不同病区病原菌的分布存在一定的差异。

本研究中，白色念珠菌对酮康唑、氟康唑、咪康唑的敏感率高，当快速诊断或涂片检查有真菌感染时，可首选这些药物进行经验性用药治疗。

在分离的病原菌中，凝固酶阴性葡萄球菌排第一位，可能与采血过程中污染、条件致病感染增加有关，有报道存在血流感染凝固酶阴性葡萄球菌污染问题［7－8］，因此加强采血管理是减少血培养中污染的一个重要环节，同时血液培养中检出凝固酶阴性葡萄球菌时，临床还需结合患者临床体征、其他检查结果、患者是否有插管、血管内置管及血液培养报警时间进行综合判断，分析患者为血流感染还是污染［7－8］。药敏试验发现，耐甲氧西林菌株（MRSA和MRCNS）较甲氧西林菌敏感菌株（MSSA和MSCNS）对抗菌药物的耐药率高，因此需加强对耐甲氧西林葡萄球菌的检测与报告。目前，本院未检出对万古霉素和利奈唑胺耐药及中介的葡萄球菌株，但鉴于国外有耐万古霉素株（VRSA）的报道［9］，国内有对万古霉素株敏感性下降菌株、中介菌株及利奈唑胺抑制环变小的趋势报道［10］，因此，应警惕菌株对这两种菌株耐药性的增加并密切监测。

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs株分别占50.00%和40.00%，与藏婉等［1］的结果相差较大，这可能与地域、病区、患者用药及疾病的严重程度有关。由于ESBLs容易引起多重耐药，中国大肠埃希菌对第三代头孢耐药率达60%以上，这与中国国情，临床好用第三代头孢类药物并导致ESBLs变异有关［10］。有文献报道产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对多种抗菌药物的耐药率明显高于不产ESBLs的菌株［1，6］。本研究未发现肠杆菌科细菌对亚胺培南或美罗培南耐药，且头孢哌酮/舒巴坦敏感率较高，提示本院重度感染肠杆菌科菌株的患者，可首选碳青酶烯类抗菌药物治疗。另外，肠杆菌科菌株对哌拉西林/他唑巴坦的敏感性也较高，因为他唑巴坦能强有力地抑制常见的CTX－M型ESBLs及DHA、CMY、ACT型质粒AmpC酶［11］。本研究中铜绿假单胞菌只对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦敏感率高，对其他常规检测药物耐药率高，对亚胺培南和美罗培南的耐药率也较高，这些需引起重视。

总之，抗菌药物的使用与细菌耐药性的产生有关，只有连续监测不同细菌的耐药情况并研究其耐药机制才能提出有效的治疗方案，指导临床用药。

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Analysis of drug resistance of fungi and bacteria detected by using blood culture in 1 176 cases

Yang Lijing，Yinji Zhuoma，Wu Quangui
（Department of Clinical Laboratory，Datong County Red Cross Hospital，Xining，Qinghai 810100，China）

ObjectiveTo investigate the drug resistance of fungi and bacteria detected by using blood culture from 2010to 2013.MethodsBacT/Alert 3Dblood culture system was used，Then VITEK microbiological analyzer was used to identify the bacteria and perform drug sensitivity test，the results were analyzed using WHONET5.4software.ResultsThere were 108positive specimens among 1 176samples，the detection rate was 9.18%.Among 123isolates，60strains were gram positive（48.78%），47strains were gram negative（38.21%），16strains was fungus（13.01%）.The major five kinds of pathogenic bacteria were coagulase negative staphylococcus（CNS，44strains），Escherichia coli（18strains），Klebsiella pneumoniae（15strains），candida albicans（10 strains）and Staphylococcus aureus（7strains）.The detection rate of methicillin resistant coagulase negative staphylococci（MRCNS）and Staphylococcus aureus（MRSA）were 72.73%（32/44）in CNS strains and 57.14%（4/7）in Staphylococcus aureus strains，the antibiotic resistance rates of MRSA and MRCNS were significantly higher than that of MSSA and MSCNS，none of Staphylococcus aureus strain was resistant to vancomycin and linezolid.The sensitive rate of Candida albicans to fluconazole，ketoconazole and miconazole was high.50%of Escherichia coli strains and 40%percent of Klebsiella pneumoniae strains produced extended spectrum beta－lactamases（ESBLs）.The sensitive rate of Enterobacteriaceae to imipenem and meropenem were both 100.00%.The sensitive rate of Pseudomonas aeruginosa to cefoperazone/shubatan，piperacillin/tazobactam were both high.ConclusionCNS is the major kind of bacteria in blood culture.The antibiotic resistance of bacteria is increasing and it is necessary to pay attention to blood culture results in order to guide the clinical use of drugs.

blood culture； bacteria； fungus； drug resistance； drug sensitivity test

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.007

A

1673－4130（2015）03－0303－03

杨丽静，女，主管检验技师，主要从事临床微生物学与检验的研究。

2014－12－15）