肝素和乙二胺四乙酸二钾对TSGF检测的影响

邵迎春，杨 慧，钱 琤，王 贝，丁庆莉，韩 娟，刘亭亭，刘 芳，任传路

（解放军第一○○医院检验科，江苏苏州 215007）

肝素和乙二胺四乙酸二钾对TSGF检测的影响

邵迎春，杨 慧，钱 琤，王 贝，丁庆莉，韩 娟，刘亭亭，刘 芳，任传路△

（解放军第一○○医院检验科，江苏苏州 215007）

目的探讨抗凝剂肝素、乙二胺四乙酸二钾（EDTA－K2）对检测血标本恶性肿瘤特异性生长因子（TSGF）的影响。方法选取2014年1～6月恶性肿瘤患者50例（恶性肿瘤组）和体检健康者50例（健康对照组），均采用肝素、EDTA－K2、分离胶采集3份外周血，离心分离后用全自动生化分析仪进行检测。结果与健康对照组比较，恶性肿瘤患者TSGF水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。在恶性肿瘤组与健康对照组，与分离胶采血相比，肝素抗凝血TSGF水平均偏低（P＜0.05），EDTA－K2抗凝血TSGF水平均偏高（P＜0.05）。结论检测TSGF时尽量选用分离胶管采集血液标本。

恶性肿瘤特异度生长因子； 肝素； 乙二胺四乙酸二钾； 分离胶

肿瘤特异度生长因子（TSGF）是恶性肿瘤及周边毛细血管大量扩增产生的一类多肽物质，在进行肿瘤筛查的体检人群中应用广泛［1］。研究表明，TSGF与其他肿瘤标志物联合检测，可大大提高早期肿瘤检出率［2］。本文采用速率法对用抗凝剂肝素、乙二胺四乙酸二钾（EDTA－K2）及分离胶采集的血液进行TSGF检测，以明确使用抗凝剂是否对TSGF检测结果产生影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2014年1～6月解放军一零零医院诊断明确且暂未治疗的初诊肿瘤患者50例设为恶性肿瘤组，男32例，女18例；平均年龄（65.6±5.7）岁；其中血液系统肿瘤8例，消化系统肿瘤10例，呼吸系统肿瘤9例，妇科肿瘤7例，动脉及生殖系统肿瘤12例，其他肿瘤4例。另选取同期体检健康者50例设为健康对照组，男29例，女21例，平均年龄（63.5±4.9）岁。排除检验室检查中有异常指标，影像学检查异常者。

1.2 仪器与试剂 BS－800全自动生化分析仪（迈瑞公司）。试剂均购自福建新大陆生物技术股份有限公司，主要成分:R1［磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠（EDTA－Na2）、凯松、4－羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPPS）］；R2（显色剂、凯松、枸橼酸钠、甘油）。

1.3 方法 所有研究对象均分别抽取3份血液，分别采用肝素抗凝、EDTA－K2抗凝及分离胶，离心后采用生化仪速率法检测TSGF水平，具体方法参照文献［3］。以上均排除明显黄疸、脂血及溶血标本。

1.4 统计学处理 采用SPSS19.0统计软件进行数据处理与统计分析；计量资料以表示，组间比较采用两独立样本t检验或配对t检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组TSGF表达水平比较 恶性肿瘤组患者肝素抗凝、EDTA－K2抗凝及分离胶采血的TSGF表达水平均高于健康对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），提示恶性肿瘤患者TSGF表达水平升高。见表1。

2.2 不同采血方法TSGF检测结果比较 在恶性肿瘤组与健康对照组，肝素抗凝血TSGF水平均低于分离胶采血，EDTAK2抗凝血TSGF水平均高于分离胶采血，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表1 不同采血方法两组TSGF表达水平比较（，U/mL）

＊:P＜0.05，与健康对照组比较。

组别肝素EDTA－K2分离胶恶性肿瘤组77.52±13.58＊85.86±11.15＊82.3±10.38＊健康对照组40.27±5.23 47.28±4.98 45.21±4.41

表2 不同采血方法TSGF检测结果比较（，U/m L）

＊:P＜0.05，与恶性肿瘤组分离胶比较；#:P＜0.05，与健康对照组分离胶比较。

组别肝素EDTA－K2分离胶恶性肿瘤组－3.73±2.96＊＋3.01±2.14＊0.00±0.00健康对照组－3.94±3.07#＋3.11±2.37#0.00±0.00

3 讨 论

恶性肿瘤已经成为继心、脑血管疾病以外，严重威胁人类健康的疾病之一，其治疗的关键是早期发现、早期诊断和早期治疗，以降低其病死率［4］。TSGF对肿瘤的检测具有早期性和广谱性，是与其他肿瘤标志物不相关的独立物质，具有肿瘤特异度而不具备脏器特异度，可为恶性肿瘤的早期诊断提供科学依据［5］。本室前期研究发现不同抗凝剂对检测结果确实存在较大影响［6］。因此本文研究了肝素和EDTA－K2对TSGF检测的影响。

本研究结果显示，与健康对照组比较，恶性肿瘤患者TSGF表达水平明显升高（P＜0.05），与文献报道相符，这说明TSGF对恶性肿瘤具有较好的鉴别诊断价值。该试剂检测TSGF的原理是EDTA－Na2与TSGF进行叠加偶联反应，反应剩余的EDTA－Na2与显色剂反应，在570 nm测得吸光度值，通过公式换算得出TSGF水平。肝素抗凝血与分离胶采血比较，TSGF表达水平明显降低（P＜0.05），这可能是肝素只是增强了抗凝血酶Ⅲ与凝血酶的亲和力，加速凝血酶的失活，并未消耗血中的钙离子。因此血中钙离子与检测试剂中的EDTANa2反应产生螯合物从而降低了检测试剂中EDTA－Na2的浓度，导致TSGF的检测结果偏低。EDTA－K2抗凝血与分离胶采血比较，TSGF表达水平明显升高（P＜0.005），这可能是EDTA－K2与检测试剂中的EDTA－Na2化学性质相似，可以参与反应，相当于间接增加了检测试剂中EDTA－Na2的浓度，导致TSGF表达明显升高。因此检测TSGF时应尽量用分离胶管采集。另外，本室前期研究发现，采用全自动生化仪速率法检测TSGF时，标本应尽量在分离血清后4 h内完成检测，或置于－20℃冰箱冷冻保存，否则可能会导致TSGF检测水平下降，偏离真实结果［3］。

综上所述，由于TSGF对临床有很大的应用价值，因此在检测TSGF时应尽量排除其他干扰因素的影响。研究发现肝素和EDTA－K2对TSGF的检测具有干扰，所以在TSGF检测时应尽量选用分离胶管采血。

［1］王海枫，梁茱.恶性肿瘤特性生长因子（TSGF）的检测在肿瘤诊断中的应用［J］.福建医药杂志，2000，22（1）:90－91.

［2］刘陶文.肿瘤相关物质群（TSGF）联合检测法的应用研究进展［J］.肿瘤防治研究，2003，30（1）:78－79.

［3］文静，任传路，丁庆莉.检测时间对速率法检测恶性肿瘤特异度生长因子结果的影响［J］.国际检验医学杂志，2013，34（22）:3001－3002.

［4］王志贤，马玲.血清TSGF测定及其临床应用价值［J］.实用浙江临床医学，2010，12（1）:27－28.

［5］杨菁，王东.恶性肿瘤相关物质群在大肠癌辅助诊断中的临床价值［J］.南方医科大学学报，2007，27（10）:1577－1579.

［6］丁庆莉，韩娟，王海刚，等.3种抗凝血剂对化学发光法定量检测乙肝标志物结果的影响［J］.现代预防医学，2013，40（2）:336－337.

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.10.057

A

1673－4130（2015）10－1446－02

2015－02－22）

△通讯作者，E－mail:clu_ren＠126.com。