藤梨正丁醇部位化学成分的研究

向梅先， 金财多， 寇荣生， 杨光忠， 李 竣

(中南民族大学 药学院， 武汉 430074)



向梅先， 金财多， 寇荣生， 杨光忠， 李 竣*

(中南民族大学 药学院， 武汉 430074)

采用薄层色谱，正相、反相硅胶，葡聚糖凝胶，半制备高效液相柱对中药藤梨的正丁醇部位进行了分离研究.得到8个化合物，分别为：2-β-D-葡萄糖-1，3，7-三羟基-酮 (1)， 7-O-[β-D-吡喃木糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷]-1，8-二羟基-3-甲氧基-酮(2)， 3-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖]-5，7，4′-三羟基黄酮(3)，6-C-葡萄糖-5，7，3′，4′-四羟基黄酮(4)， 6-C-葡萄糖-5，7，4′-三羟基黄酮 (5)， 1-O-[β-D-吡喃木糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷]-8-羟基-3，7-二甲氧基-酮(6)， 3-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃半乳糖]-5，7，3′，4′-四羟基黄酮 (7)， 7-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖]-5，3′-二羟基-4′-甲氧基二氢黄酮 (8).所有的化合物都是首次从该植物分离得到.

藤梨； 正丁醇部位； 化学成分研究

藤梨又称藤梨根、阳桃、木子、猕猴桃根，为猕猴桃科猕猴桃属植物硬毛中华猕猴桃 [Actinidiaarguta(Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq.] 的根.中华猕猴桃史载于《开宝本草》，生于林下或灌木丛中，海拔1 400～1 620 m，主要分布于我国东北、华北、西北及长江流域，日本和朝鲜也有分布，我国陕西省广泛栽培，栽植面积占全国一半以上.民间将猕猴桃的根洗净，晒干，切碎后进行入药使用.具清热解毒、清热利湿、防肿瘤抗癌、祛风除湿、利尿止血、解毒消肿，可缓解或治疗消化不良、呕吐、风湿痹痛、风湿骨痛、消化道癌肿、消化道肿瘤、痈疡疮疖、风湿骨痛及黄疸等症.近年来发现该植物具有抗癌，降血脂等活性[1].随着癌症病人的高发，对该药的研究也引起科学家的高度重视.本研究对其化学成分进行了系统分离研究,采用正相和反相硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶LH-20色谱、高效液相半制备色谱及重结晶等分离和纯化方法，同时配合硅胶薄层层析跟踪分析，以薄层色谱指导柱层析，从藤梨乙酸乙酯和正丁醇位分离得到共计25个化合物，鉴定出了正丁醇部位分离的8个，且所有化合物均首次从该植物分离得到.8个化合物的结构如图1所示.

1 仪器与材料

1.1 仪器

ZF-6型三用紫外光谱仪；Bruker AM-600型核磁共振仪；Finnigan LCQ-Deca和Waters/ Micromass Q-Tof-Ultima 型质谱仪；美国戴安Ultimate 3000型高效液相色谱仪(Chromeleon 色谱工作站)；5C18-MS-Ⅱ(10 mm×250 mm)色谱柱；RE-52型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；KQ-500E型超声波清洗仪；紫外分光光度仪(VU)；Nicolet NEXUS-670 傅立叶变更红外光谱仪;中草药粉碎机(FW177，天津市泰斯特仪器有限公司)．

1.2 材料

藤梨根购自湖北天济中药饮片厂，经中南民族大学万定荣教授鉴定为硬毛中华猕猴桃 [Actinidiaarguta(Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq.]的根.

1.3 试剂

95%的工业酒精(武汉酒精厂)；乙醇：分析纯，天津博迪化学试剂厂；甲醇：分析纯，天津博迪化学试剂厂；乙酸乙酯：分析纯，上海国药集团化学试剂有限公司；石油醚：分析纯，上海国药集团化学试剂有限公司；正丁醇：分析纯，湖北大学化学试剂厂；苯：分析纯，国药集团化学试剂有限公司；

薄层层析：GF254高效薄层板，青岛海洋化工有限公司；TLC板：GF254板，青岛海洋化工有限公司；柱层析硅胶：100～200目、200～300目、硅胶H，青岛海洋化工厂；RP-18: 50 μm; 反相硅胶，葡聚糖凝胶：日本YMC 公司.

图1 8个化合物的结构Fig.1 Structures of compounds 1～8

2 方法

2.1 药材的提取与分离

取藤梨根饮片10 kg，用粉碎机粉碎成粗粉.将其粗粉置95%的酒精中室温浸泡提取3次，每次24 h.过滤，合并滤液，减压回收浓缩得浸膏3.4 kg，将浸膏用90%的甲醇水溶液溶解后用等体积石油醚萃取，回收石油醚得到石油醚浸膏200 g，即石油醚部位.减压回收下层的甲醇水溶液，得浸膏，浸膏用蒸馏水溶解后，分别用等体积的乙酸乙酯和正丁醇萃取，减压回收正丁醇得到浸膏1.1 kg. 称取乙酸乙酯部位和正丁醇部位浸膏各500 g，分别采用正相硅胶、反相硅胶、葡聚糖凝胶、半制备高效液相色谱柱进行分离，采用重结晶法对分离的化合物进行纯化，得到25 个化合物，鉴定了其中的8个.这8个化合物均来自于正丁醇部位.

2.2 结构鉴定

化合物1:黄色粉末，MW=406.33.

1H NMR (600 MHz， DMSO): 13.41 (1H，s， 1-OH)，10.14 (1H，s，OH)，7.37(1H，d，J=9.0 Hz， H-5)，7.51 (1H，d，J=3.0 Hz， H-8)， 7.48 (1H，dd，J=9.0， 3.0Hz， H-6)，6.31 (1H，s，H-4)， 4.71 (1H， d，J=9.8 Hz， H-1 of Glc);13C NMR (150MHz，DMSO); 179.8 (C=O)，165.1 (C-3)， 162.1 (C-1)， 156.3 (C-4a)， 124.5 (C-6)， 148.8 (C-4b)， 153.9 (C-7)，120.5 (C-8a)， 108.3 (C-8)， 107.8 (C-2)，118.7 (C-5)， 101.9 (C-8b)， 93.2 (C-4)，81.7 (C-1′of Glc)， 79.2 (C-5′of Glc)， 73.3 (C-2′of Glc)，70.5 (C-3′of Glc)，70.3 (C-4′of Glc)，61.6 (C-6′of Glc).以上数据与参考文献一致[2].故鉴定该化合物为2-β-D-吡喃葡萄糖-1，3，7-三羟基-酮.

化合物2:黄色粉末，MW=568.48.

1H NMR (600 MHz， DMSO): 11.75，11.72 (each 1H，s，1，8-OH)，7.80 (1H，d，J=9.2 Hz，H-6)， 6.76 (1H，d，J=9.2 Hz，H-5)， 6.67 (1H，d，J=2.1 Hz， H-4)， 6.46 (1H，d，J=2.1 Hz，H-2)， 4.76 (1H，d，J=7.1 Hz，H-1′of Glc)， 4.07 (1H，d，J=7.4 Hz， H-1″of Xyl)， 3.67 (3H，s，OCH3);13C NMR (150 MHz， DMSO): 184.2 (C=O)， 167.2 (C-3)， 162.0 (C-1)，157.6 (C-4a)， 149.3 (C-8)， 149.8 (C-4b)，140.4 (C-7)， 125.3 (C-6)， 107.2 (C-8a)， 101.7 (C-8b)， 106.2 (C-5)， 103.8 (C-1″of Xyl)， 101.1(C-1′of Glc)， 97.2(C-2)， 92.7 (C-4)， 76.5 (C-3″of Xyl)， 76.3 (C-5′of Glc)， 76.2(C-3′of Glc)， 73.3(C-2′of Glc)， 73.1 (C-2″of Glc)， 69.6 (C-4″of Xyl)， 69.5 (C-4′of Glc) ，68.4 (C-6′of Glc)， 65.7 (C-5″of Xyl)， 56.4 (OCH3).以上数据与参考文献一致[3]，故鉴定该化合物为7-O-[β-D-吡喃木糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷]-1，8-二羟基-3-甲氧基-酮．

化合物3: 黄色粉末，MW=594.52．

1H NMR (600 MHz， 甲醇): 8.18 (1H，d，J=8.7 Hz，H-2′，6′)， 6.58 (1H，d，J=8.6 Hz， H-3′，5′)， 6.58 (1H， brs，H-8)， 6.19 (1H，brs， H-6)， 5.13 (1H，d，J=7.8 Hz， H-1″of Gal)， 4.62 (1H，s，H-1‴of Rha)， 1.28 (3H，d，J=6.2 Hz， H-6‴of Rha);13C NMR (150 MHz，甲醇); 179.4 (C=O)， 166.8 (C-7)， 162.8 (C-5)，161.7 (C-4′)，158.6 (C-4)， 159.3 (C-2)， 135.6 (C-3)， 132.4 (C-2′，6′)， 122.5 (C-1′)， 116.3 (C-3′，5′)， 105.7 (C-1″ of Gal)，105.4 (C-10)， 101.7 (C-1‴of Rha)， 100.3 (C-6)， 95.0 (C-8)， 75.5 (C-3″ of Gal)， 75.2 (C-5″of Gal)， 73.7 (C-4‴of Rha)， 73.1 (C-2″of Gal)， 72.4 (C-3‴of Rha)， 72.2 (C-2‴of Rha)， 70.1 (C-5‴of Rha)， 69.8 (C-4″of Gal)， 67.4 (C-6″of Gal)， 18.1 (C-6‴of Rha).以上数据与参考文献一致[4]，故鉴定该化合物为3-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃半乳糖]-5，7，4′-三羟基黄酮．

化合物4:黄色粉末，MW=462.40．

1H NMR( 600MHz， DMSO): 13.44 (1 H，s，5-OH)， 7.52 (2 H，m，H-2′，6′)， 6.79(1H，d，J=8.2 Hz，H-5′)， 6.57 (1H，s，H-3)， 6.68 (1H，s，H-8)， 4.59 (1H，d，J=9.8 Hz H-1″of Glc);13C NMR (150 MHz， DMSO): 181.5 (C=O)， 163.6 (C-7)， 163.6 (C-2)， 160.5 (C-5)， 156.2 (C-9)，149.7 (C-4′)，145.6 (C-3′)， 121.5 (C-1′)，119.2 (C-6′)，113.3 (C-2′)， 116.3 (C-5′)， 108.7 (C-6)， 103.4 (C-10)， 102.6 (C-3)， 93.3 (C-8)， 81.5 (C-1′of Glc)， 79.2 (C-5′of Glc)， 73.2 (C-2′of Glc)， 70.7 (C-3′of Glc)， 70.3 (C-4′of Glc)， 61.4 (C-6″of Glc).以上数据与参考文献一致[5]，故鉴定该化合物为6-C-葡萄糖-5，7，3′，4′-四羟基黄酮．

化合物5：黄色粉末，MW=432.37．

1H NMR (600 MHz， DMSO): 13.46 (1H，s，5-OH)， 7.91 (2H，d，J=7.8 Hz，H-2′，6′)， 6.82 (1H，d，J=7.5 Hz， H-3′，5′)， 6.65 (1H，s，H-3)， 6.59 (1H，s，H-8)， 4.60 (1H， d，J=9.6 Hz， H-1″ of Glc);13C NMR (150 MHz， DMSO): 181.7 (C=O)，163.4 (C-7)， 161.4 (C-5)， 160.7 (C-4′)， 156.4 (C-9)， 156.5 (C-2)，128.3 (C-2′，6′)， 121.2 (C-1′)，116.1(C-3′，5′)，109.2 (C-6)， 103.3 (C-10)， 102.5 (C-3)， 93.6 (C-8)， 81.7 (C-1″of Glc)，79.2 (C-5″of Glc)， 73.2 (C-2″of Glc)， 70.7 (C-3″of Glc)，70.2 (C-4″of Glc)， 61.4 (C-6″of Glc)).以上数据与参考文献一致[6]，故鉴定该化合物为6-C-葡萄糖-5，7，4′-三羟基黄酮．

化合物6:黄色粉末，MW=582.50．

1H NMR (600 MHz， DMSO): 3.26 (1H，s，1-OH)， 7.44 (1H，d，J=8.1 Hz，H-6)， 6.69(1H，d，J=7.8 Hz，H-5)， 6.83 (2H，brs，H-2，4)， 5.17 (1H，d，J=7.3 Hz，H-1′of Glc)， 4.27 (1H，d，J=7.4 Hz，H-1′of Xyl)， 3.81， 3.91 (each 3H， s， 3，7-OCH3);13C NMR (150 MHz， DMSO): 181.3 (C=O)， 165.6 (C-3)， 159.3 (C-1)， 158.7 (C-4a)， 150.3 (C-8)， 148.2 (C-4b)， 142.4 (C-7)， 120.5 (C-6)， 104.6 (C-8b)，104.4 (C-5)， 104.1 (C-1″ of Xyl)， 100.6 (C-1′of Glc)， 98.6 (C-2)， 94.8 (C-4)，76.7 (C-3″ of Xyl)， 76.5 (C-5′ of Glc)， 75.6 (C-3′ of Glc)， 73.5 (C-2′ of Glc)， 73.3 (C-2″ of Glc)， 69.7 (C-4″ of Xyl)， 69.4 (C-4′ of Glc)， 68.6 (C-6′ of Glc)， 65.6 (C-5″ of Xyl)， 56.6 (OCH3)， 56.3 (OCH3). 以上数据与参考文献一致[7]， 故鉴定该化合物为1-O-[β-D-吡喃木糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷]-8-羟基-3，7-二甲氧基-酮．

化合物7:黄色针状结晶，MW=610.50．

1H NMR (600 MHz， DMSO): 12.48 (1H，s，5-OH)， 7.75 (1H， dd，J=8.5， 2.1Hz，H-6′)，7.52 (1H，d，J=1.9 Hz，H-2′)， 6.71 (1H，J=8.4 Hz， H-5′)， 6.46 (1H，brs，H-8)， 6.16 (1H， brs， H-6)， 5.31 (1H， d，J=7.7 Hz， H-1′of Gal)， 4.32 (1H， s， H-1‴of Rha)， 1.26 (3H，d，J=6.2 Hz， H-6‴of Rha);13C NMR (150 MHz， DMSO): 177.5 (C=O)， 165.2 (C-7)， 161.2 (C-5)，156.6 (C-9)，156.4 (C-2)，148.8 (C-4′)， 144.7 (C-3′)，133.4 (C-3)， 121.7 (C-1′)， 121.2 (C-6′)， 115.8 (C-2′)， 115.4 (C-5′)， 103.6 (C-10)， 102.2 (C-1″of Gal)， 100.2 (C-1‴of Rha)， 99.3 (C-6)， 93.7 (C-8)， 73.5 (C-3″of Gal)， 73.2 (C-5″of Gal)， 71.9 (C-4‴of Rha)，71.0 (C-2″of Gal)， 70.7 (C-3‴of Rha)，70.4 (C-2‴of Rha)， 68.3 (C-4″of Gal)， 68.3 (C-5‴of Rha)， 65.2 (C-6″of Gal)， 17.8 (C-6‴of Rha).以上数据与参考文献一致[8]， 故鉴定该化合物为3-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃半乳糖]-5，7，3′，4′-四羟基黄酮．

化合物8:黄色粉末，MW=610.56.

1H NMR (600 MHz， DMSO): 11.89 (1H， s， 5-OH)， 9.26 (1H，s，3′-OH)， 6.79(3H， m， H-2′，5′，6′)， 6.21 (1H，brs，H-2)， 6.19 (1H，brs，H-4)， 4.84 (1H，d，J=7.2 Hz， H-1′of Glc)， 4.53 (1H， brs， H-1″ of Rha)， 3.54 (3H， s， OCH3)， 1.16 (3H， d，J=6.0 Hz， H-6″of Rha);13C NMR(150 MHz， DMSO): 197.2 (C=O)， 165.1 (C-7)， 163.3 (C-5)， 162.4 (C-9)， 148.1 (C-4′)， 146.6 (C-3′)， 130.7 (C-1′)， 118.1 (C-6′)， 114.3 (C-2′)， 112.3 (C-5′)， 103.2 (C-10)， 100.7 (C-1‴of Rha)， 99.4 (C-1″of Glc)， 96.4 (C-6)， 95.7 (C-8)， 78.3 (C-2)， 76.5 (C-3″ of Glc)， 75.6 (C-5″of Glc)， 73.2 (C-2″of Glc)， 72.1 (C-4‴of Rha)， 70.5 (C-3‴of Rha)， 70.3 (C-2‴of Rha)， 69.5 (C-4″of Glc)， 68.3 (C-5‴of Rha)， 66.2 (C-6″of Glc)， 55.6 (4′-OCH3)， 42.1 (C-3)， 17.6 (C-6‴of Rha).以上数据与参考文献一致[9]， 故鉴定该化合物为7-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖]-5，3′-二羟基-4′-甲氧基二氢黄酮．

3 讨论

藤梨为恩施土家药，具有较好的抗肿瘤活性.鉴于藤梨的药效，有必要对藤梨进行全面研究与开发，充分发挥其潜在的应用价值.本文对藤梨根的乙酸乙酯、正丁醇等部位进行了化学成分的分离研究，并探讨了治疗肿瘤的药效及作用机制.采用系统溶剂萃取及柱层析技术分离和重结晶方法，从乙酸乙酯部位和正丁醇部位分离得到25个化合物，鉴定了其中8个化合物的结构，这8个化合物均来自于正丁醇部位.经结构分析和文献资料查阅[10]，发现分离的化合物全部为首次从该属植物中分离得到，下一步将对其进行活性筛选与作用机制研究，以期为该药在治疗肿瘤的临床应用提供科学依据.

[1] 杨 帆. 藤梨根中化学成分的研究[D]. 成都: 西南交通大学， 2007．

[2] 张东明， 单卫华. 瓜子金根的化学成分研究[J]. 中草药， 2005， 36(12): 1767-1771．

[3] Goetz M， Maniliho F， Jacot-Guiharmod A. Study of the flaconic and xanthonic compounds in the leaves of Gentiana Ciliate L. [J]. Helcetica Chimica Acta， 1978， 61， 1549-1554.

[4] 易 衍， 巫 鑫， 王 英， 等. 霸王花黄酮类成分研究[J]. 中药材， 2011， 34(5): 712-716．

[5] 乔涌起， 崔宝松， 唐 丽， 等. 长梗喉毛花正丁醇部位化学成分研究[J]. 中国中药杂志， 2012， 37(16): 2360-2365．

[6] 赵 青， 李莉军， 杨敬之， 等. 黄皮叶的化学成分研究[J]. 中国中药杂志， 2010， 35(08): 997-1000．

[7] 潘 莉， 张晓峰， 王明奎， 等. 祁连獐牙菜化学成分研究[J]. 中草药， 2002， 33(07): 583-586．

[8] Abiodun Falodun, Muhammad Irfan Qadir, Muhammad Iqbal Chouldary. Isolation and characterization of xanthine oxidase inhibitory constituents of Pyrenacantha staudtii[J].Acta Pharmaceutica Sinica, 2009(04):390-394．

[9] 巴寅颖， 刘倩颖， 石任斌， 等. 鬼箭羽中黄酮类化学成分研究[J]. 中草药， 2012， 43(02): 242-246．

[10] 赫 军， 马秉智， 赵 铁， 等. 藤梨的化学成分的研究[J]. 中国药学杂志， 2014， 29(03): 184-186.

Study on chemical compound ofn-butyl alcohol fraction fromActinidiaarguta(Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq．

XIANG Meixian， JIN Caiduo， KOU Rongsheng， YANG Guangzhong， LI Jun

(College of Pharmacy， South-Central University for Nationalities， Wuhan 430074)

To study chemical composition of fraction fromActinidiaarguta(Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq. TLC， normal-phase silica gel column， reverse-phase silica gel column， sephadex-LH and semi-preparative HPLC column were used to isolate chemical compositions ofn-butyl alcohol fraction fromarguta(Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq. Eight compounds were identified as: 2-β-D-Glu-1，3，7-tri hydrogen-xanthone (1)， 7-O-[beta-D-xylose-(1-6)-beta-D-glucopyranoside]-1， 8-dihydroxy-3-methoxy Xanthone (2); 3-O-[beta-D-Pyranrham-nose-(1-6)-beta-D-galactopyranose]-5，7，4′-trihydroxy flavone (3); 6-C-glucose-5，7，3′，4′-tetra hydroxy flavone (4); 6-C-glucose -5，7，4′-trihydroxy flavone(5)， 1-O-[beta-D-xylose-(1-6)-beta-D-glucopyranoside]-8-hydroxy-3，7-dimethoxy Xanthone (6); 3-O-[beta-D-pyran rhamnose-(1-beta-D-pyran galactose]-5，7，3′，4′-tetrahydroxy flavone (7); 7-O-[beta-D-pyran rhamnose-(1-6)-beta-D-pyran glucose]-5， 3′-dihydroxy-4′-methoxy two dihydrogen flavone (8)．All compounds were isolated for the first time from this plant， moreover， all compounds were gained from genus for first time．

Actinidiaarguta(Sieb. & Zucc) Planch. ex Miq.;n-butyl alcohol fraction; chemical composition

2015-02-18.

武汉市科技晨光计划项目(2014070404010210).

1000-1190(2015)03-0397-05

O629

A

*通讯联系人. E-mail: Lijunwuhan@sina.com.