HBV 基因型与临床特征及拉米夫定抗病毒疗效研究*

石光英 马晓媛 谢敬东

1.新疆生产建设兵团医院(石河子大学第二附属医院)肝病科 (新疆 乌鲁木齐，830002) 2.新疆医科大学第五附属医院预防保健科 3.上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科

HBV 感染可导致不同类型的肝病包括无症状携带者(AsC)、CHB、重型肝炎、肝硬化(LC)和肝细胞癌(HCC)等，我国慢性HBV 携带者约1.5 亿人，每年约有50 万人死于HBV 感染相关肝病［1］，因此加强对乙型肝炎的防治工作对提高我国居民健康水平具有非常重要的意义。目前研究HBV 有8个基因型，即基因型A～H，HBV 基因型分布具有明显的地域性差异，在我国大陆地区流行有A～D 4个基因型，其中以B 和C 型为主［2，3］。不同基因型乙型肝炎患者临床表现之间存在一定的差异，而且不同基因型对抗病毒的治疗反应也有所不同。因此，了解本地区HBV 基因分型特点及其对抗病毒治疗的反应，对早期选择合适治疗方案，遏制病情发展具有重要的指导意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 27例患者为2011年6月到2012年6月期间来我院消化肝病科就诊的CHB 患者，其中男19例，女8例，平均(32.94 ±12.66)岁，30岁以下13例(48.1%)，30岁以上14例(51.9%)。其中AsC6例，CHB12例(轻中重度分别为5例、5例和2例)，肝硬化7例，原发性肝癌(HCC)2例。所有患者均符合中华医学会肝病学分会和感染病学分会制定的《慢性乙型肝炎防治指南》［4］中的诊断标准，排除甲、丙、丁、戊肝病毒标志物阳性患者。签署知情同意书后，采集外周血-70℃保存，并进行临床相关信息收集。

1.2 治疗方法 患者口服拉夫米定100mg/次，1次/d，疗程12个月以上。

1.3 观察项目与方法 HBV 标志物采用酶联免疫法(ELISA)，操作均按照试剂盒说明书进行。HBV 基因型采用TaqMan 荧光PCR 技术(美国ABI7500PCR 仪)进行检测［5］，根据HBV B 和C基因型序列的特异性设计合适的引物和探针(上海英俊生物技术有限公司)。反应体系:DNA 模板2 μl，Mutilplex Powermix 9μl，B、C 基因型探针各0.5μl，引物各4 μl，总计20μl。反应条件:95℃预变性5min;然后94℃15s，62℃45s;共42个循环。对第一次分型不清的标本进行重复测量。观察患者病毒学应答率(HBV DNA 检测不到或者下降2 log10IU/ml 以上)、血清学应答率(HBeAg 转换或HBsAg 转换)和生化学应答率(ALT 和AST 恢复正常)。

1.4 统计学方法 所有数据使用SPSS 16.0 软件包进行分析，计量资料采用()表示，两组间计量资料的比较应用t检验，多组间计量资料比较应用方差分析方法。计数资料或组间率对比用χ2检验。P＜0.05 表示差异有显著性意义。

2 结果

2.1 HBV 基因型分布情况 见表1。

表1 27例HBV 感染者基因分型情况及患者基本特征比较

2.2 HBV 基因型与临床特征的关系 见表2。

2.3 HBV 基因型与拉米夫定的疗效关系 见表3。治疗3～12个月时B 基因型患者生化学应答率、病毒学应答率和血清学应答率均高于C 基因型，然而除3个月病毒学应答率外(P＜0.05)，其他指标之间比较，差异均无显著性意义(P＞0.05)。

3 讨论

越来越多的研究表明在不同的国家、地区和人群中流行的HBV 存在基因型上的差异，进而导致患者具有不同的临床特征、生物学特征和药物疗效差异［6～10］。本地区是汉族、维吾尔族、回族混杂聚居，务农人员占多数，感染HBV 患者较多，因此掌握本地区HBV 基因型分布特点、不同基因型临床特征以及对抗病毒治疗反应的不同特点，将更加有利于临床上对HBV 感染者快速采取有效的诊疗措施，提高对HBV 感染的控制能力。

表2 27例患者HBV 基因型与临床特征的关系

表3 HBV 基因型对拉夫米定疗效影响

已有研究表明我国HBV 感染者以B 基因型和C 基因型为主，也存在少量D 基因型及混合感染［2，6］，D 基因型主要分布在少数民族中如维吾尔族和回族等［11］。本研究发现，在27例HBV 感染者中，66.2%为C 基因型，22.2%为B 基因型，其他基因型为11.1%，推测主要为未检出的D 基因型及混合感染，与国内研究报道相符［12］。进一步分析不同基因和患者基本特征之间的关系发现，不同民族之间HBV 基因型分布不同，在汉族C 基因型占到78.9%，而维吾尔族以其他基因型(主要为D 基因型)和C 基因型为主各占到37.5%。这与之前的报道一致［11］。在本研究中维吾尔族患者所占比例较小，可能与维吾尔族HBsAg 携带率低于汉族有关。

本研究进一步分析了HBV 基因型与临床特征的关系，C 基因型患者在AsC、CHB、LC 和HCC 分别占50.0%、58.3%、85.7%和100%，呈现逐步升高趋势，均高于B 基因型患者，可能的原因有:C 基因型HBV 感染宿主后其核心启动子易发生突变，DNA 复制水平升高进而导致疾病进展速度较快、对肝脏功能破坏较为严重［13］;B 基因型患者对临床上常用抗病毒治疗药物更为敏感，治疗效果更好，从而使得C 基因型患者发展为肝硬化和肝癌的比例越来越高。本研究中肝癌患者虽然C 基因型仍然占优势，但是与其他基因型相比差异无统计学意义，这可能与本研究中肝癌患者人数较少有关，因此下一步仍需在更大样本量的肝癌患者中进一步探索研究。另外我们比较了4个基因型患者ALT、AST、TBil 和Alb，结果未发现差异有显著性意义，这与本地区之前的研究报道一致［12］。

拉夫米定是目前公认的安全有效的核苷类抗病毒药物之一，其抗病毒作用及安全性均优于阿德福韦酯，而HBV 基因型可以影响CHB 患者抗病毒治疗的效果［7～9］。本研究结果显示B 基因型患者在治疗3～12个月时其生化学应答率、病毒学应答率、血清学应答率均优于C 基因型，虽然由于样本量的限制，除去3个月病毒学应答率外，本研究未能发现基因型在拉夫米定疗效上的差异具有显著性意义，因此尚需在其他基因型上扩大样本量后进一步研究证实，然而结果仍提示CHB 患者在进行抗病毒治疗时，应先进行HBV 基因型检测与分析，选择更有效的抗病毒治疗方案。另外本研究发现在治疗12个月之后部分患者出现耐药性，因此要及时调整药物治疗方案，更换其他核苷酸类药物或者干扰素类药物以保证疗效。

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