慢性乙型肝炎患者血清HBsAg 浓度与HBV DNA 定量及HBeAg 滴度的关系分析

东南大学附属第二医院检验科 (江苏 南京，210003)

HBsAg 与反映病毒复制的HBV DNA 合成途径不同，两者在血清中的表达水平也不平行［1］，在抗病毒治疗过程中HBsAg定量检测结果对疗效有预测作用，HBeAg 的转归则是治疗有效最明显的标志，而HBV DNA 则反映的是有无复制和传染性的强弱。为了进一步探讨CHB 患者外周血中HBsAg 浓度与HBV DNA 含量及HBeAg 的滴度以及反应肝脏受损的主要指标ALT的关系，本研究收集了437例CHB 患者的血清，分别对其进行HBsAg 浓度、HBV DNA、HBeAg 滴度及ALT 检测，并对其结果进

行分析。

1 资料与方法

1.1 研究对象 437例血清标本来自南京市第二医院2012年12月-2013年5月期间住院的CHB 患者，其中男307例，女130例;年龄6～82岁，平均34.9岁。诊断符合中华医学会肝病学分会，中华医学会感染病学分会制定的《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》的诊断标准［2］。所有标本无溶血和脂血等现象，并排除甲、丙、丁、戊、庚型病毒性肝炎合并感染。

1.2 主要仪器与试剂 主要仪器为美国ABBOTT 公司ARCHITECT 2000 全自动化学发光仪;罗氏LightCycler480 实时定量PCR 仪，日本HITACHI 公司7600-120 全自动生化分析仪。试剂:美国ABBOTT 公司HBsAg 和HBeAg 试剂;HBV DNA 荧光定量试剂盒由上海科华生物技术有限公司提供;ALT 测定试剂盒由北京莱帮生物技术有限公司提供。

1.3 方法 HBsAg 浓度和HBeAg 的滴度均采用微粒子发光法检测;HBV DNA 检测采用荧光实时定量方法检测，HBV DNA≤5.0×102IU/ml 为检测下限，HBV DNA 定量取常用对数表示;ALT 测定采用速率法。

1.4 统计学方法 采用SPSS 16.0 软件。不符合正态分布的变量采用中位数描述。HBV DNA 进行对数转换后进行统计分析。定量资料多组间比较先采用Levene 方差齐性检验，若方差不齐，采用Welch 法;当组间均数有显著差异时，需做多重比较，方差齐性的多重比较采用LSD 法，基于方差不齐的多重比较采用Tambane’s T2 的方法。所有检验均为双侧检验，检验水准均为0.05。

2 结果

2.1 不同HBsAg 浓度与HBV DNA，HBeAg、ALT 水平比较 将HBsAg 指标按浓度由低到高依次分为5 组，并分别与HBV DNA、HBeAg 和ALT 比较分析，结果见表1。

表1 不同HBsAg 浓度与HBV DNA、HBeAg、ALT 比较

表1 结果显示，不同HBsAg 浓度组之间HBV DNA 定量水平差异有显著性意义(F=119.753，P＜0.01)，组间两两分别比较，各组之间差异有显著性意义(P＜0.01);不同HBsAg 浓度组间HBeAg 滴度的比较，差异有显著性意义(F=175.457，P＜0.01)，各组间两两比较，差异有显著性意义(P＜0.01)。不同HBsAg 浓度组间之间ALT 水平的比较，差异无统计学意义(F=2.545，P=0.056)

2.2 不同浓度HBsAg 患者HBV DNA 定量，HBeAg 滴度、AlT多重比较的P 值 统计结果见表2～表4。

表2 不同HBsAg 浓度患者HBV DNA 定量多重比较的P 值

表3 不同HBsAg 浓度患者HBeAg 滴度多重比较的P 值

表4 不同HBsAg 浓度患者ALT 多重比较的P 值

3 讨论

HBsAg 的血清清除是CHB 治愈的最佳指征。研究发现HBsAg 定量检测结果与HBV 感染的肝细胞核内HBV DNA 的量相关［3］，血清HBsAg 水平能反应肝脏内激活的cccDNA(共价闭合环状DNA)的水平，所以HBsAg 被认为是细胞感染的标志［4～7］。同时，HBsAg 水平能够直接反映出机体的免疫状态，并且与机体免疫系统对病毒的控制有着密切的联系［8］。这使得越来越多的学者致力于研究HBsAg 定量检测与CHB 病程的确切关系，并探讨利用HBsAg 定量检测结果预测CHB 的转归及预后。HBV DNA 与HBeAg 水平高低同样也是反应病毒复制水平高低及传染性强弱的标志，如果把HBsAg 定量和HBeAg 血清学转换作为联合预测指标，治疗结束时，如果HBsAg 定量水平下降且发生HBeAg 血清学转换，最终将得到治疗的持续应答或获得持久免疫控制状态。因此探讨这3 项检查的关联性就显得非常有意义。

本研究结果显示，血清HBsAg 浓度＞10000IU/ml 时与HBV DNA 定量各组间存在非常显著的关联性，但是当HBsAg浓度达到1000IU/ml 以上时，与HBeAg 的滴度就呈现出非常显著的关联性，而HBsAg 浓度与血清ALT 活性无关联性。因此，HBsAg 浓度在高水平时亦可以间接反映患者体内HBV 复制水平的高低，而HBsAg 浓度持续下降至1000IU/ml 以下时，HBeAg的血清学转归的可能性将大大增加。同时，本研究结果还显示HBsAg 浓度与肝脏的受损程度没有明显的关系。因此，对于临床抗病毒治疗的患者，若无条件定量检测HBV DNA 水平，可以动态观察HBsAg 浓度来间接推断体内HBV 复制水平，并预测HBeAg 的血清学转归。

目前较多的研究结论都反映出血清中HBsAg 与HBV DNA之间存在正相关性，HBsAg 水平可以反映病毒复制情况，因此，笔者认为，将HBsAg、HBeAg 及HBV DNA 三项指标同时测定，将会更加全面地反映出病毒在患者体内的复制情况，以更好地指导临床制定治疗方案。随着HBsAg 定量技术的开发与应用，让我们更加深入地了解到其变化规律和临床价值，并且对HBsAg 定量的认识和应用上升到一个新的台阶。

［1］武建国.HBsAg 与HBV DNA 定量的临床信息互补［J］.临床检验杂志，2013，31(11):801-804.

［2］中华医学会肝病学分会、中华医学会感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)［J］.中华肝脏病杂志，2001，19(1):13 -24.

［3］Chan HL，Wong VW，Tse AM，et al.Serum hepatitis B surface antigen quantitation can reflect hepatitis B virus in the liver and predict treatment response［J］.ClinGastroenterol Hepatol，2007，5(12):1462 -1468.

［4］CHAN HL，WONG VW，Wong GL，et al.A longitudinal study on the natural history of serum hepatitis B surface antigen changes in chronic hepatitis B［J］.Hepatology，2010，52(4):1232 -1241.

［5］Rodella A，Galli C，Terlenghi L，et al.Quantitative analysis of HBsAg，IgM anti-HBc and anti-HBc avidity in acute and chronic hepatitis B［J］.Clin Virol，2006，37 :206 -212.

［6］Chen J，Wang Z，Guo Y.Serum HBsAg changes in HBeAg positive chronic hepatitis B patients with continuous viral load reductions during treatment with adefovir or peg-interferon-alpha-2a［J］.Antiviral Res，2009，81:88 -91.

［7］Ozaras R，Tahan V.Correlation of quantitative assay of HBsAg and HBV DNA levels during chronic HBV treatment［J］.Digestive Dis Sci，2008，53:2995 -2998.

［8］黄明清，胡丽，咸建春.慢性乙型肝炎病毒感染患者表面抗原定量检测与病毒载量的相关性［J］.中华感染病学杂志，2013，23(14):3314 -3316.