化疗联合DC-CIK治疗中晚期胃癌研究

吴付兵,黄 雯,王康霞,王明元,徐方贵,黄春开,王 星

(南京军区福州总医院第一附属医院，福建 莆田 351100)

化疗联合DC-CIK治疗中晚期胃癌研究

吴付兵,黄 雯,王康霞,王明元,徐方贵,黄春开,王 星

(南京军区福州总医院第一附属医院，福建 莆田 351100)

目的 观察DC-CIK联合化疗治疗中晚期胃癌的临床疗效以及安全性。方法 将52例中晚期胃癌患者随机分为治疗组和对照组，对照组采用吉西他滨和奥沙利铂治疗，治疗组采用吉西他滨和奥沙利铂联合DC-CIK治疗，观察2组近期疗效、生活质量、1年生存率以及不良反应发生情况。结果 治疗组客观缓解率为54%，疾病控制率为81%；对照组客观缓解率为46%，疾病控制率为58%。2组客观缓解率比较差异无统计学意义，而疾病控制率比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后，治疗组KPS评分显著高于对照组(P<0.05)。患者免疫力提高，而对照组免疫力进一步降低，2组治疗后比较差异有统计学意义(P<0.05)。1年生存率2组比较差异无统计学意义，但是治疗组有延长的趋势。2组不良反应均为血液学毒性和消化道反应，但是治疗组不良反应比对照组明显减轻(P<0.05)。结论 DC-CIK联合化疗治疗中晚期胃癌的临床疗效优于单纯常规化疗，而且可以提高疾病控制率和患者生活质量，减轻不良反应，值得推广应用。

化疗;DC-CIK;中晚期胃癌

近年来，随着社会、环境、经济以及生活方式的变化，恶性肿瘤发病率逐年提高，已经成为威胁生命的头号杀手。胃癌是常见的消化道恶性肿瘤，发病率占据消化道恶性肿瘤首位，而且早期不易发现，确诊时多已到晚期，失去手术的机会。而对于中晚期肿瘤患者而言，手术切除后患者生活质量、精神状态以及生存率并没有得到明显改善，所以开发新的治疗手段就显得尤为重要。随着分子生物学以及肿瘤免疫学的发展，生物治疗已展现出越来越广阔的前景。肿瘤的生物治疗是一种依靠自身免疫系统的激活来抗癌的新型治疗方式，其通过生物制剂或者自身的防御机制来激发、增强自身的免疫功能，从而达到抑制肿瘤生长或者根治的目的。治疗法包括肿瘤的基因治疗和免疫治疗。其中免疫治疗主要包括细胞因子疗法、疫苗疗法、单克隆抗体疗法、免疫导向疗法以及过继免疫疗法。DC-CIK疗法是过继细胞免疫疗法的一种，具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤种类广以及安全性高的特点[1-2]。目前在治疗晚期非小细胞肺癌[3-4]急性髓细胞白血病[5]以及结直肠癌[6-7]中具有良好的临床疗效，成为肿瘤治疗的有效手段，是继手术、放化疗之后的有效辅助治疗方法，在改善患者的生活质量、增强免疫能力、改善精神状态以及延长生存时间方面有着良好的应用前景。而采用DC-CIK和手术、放化疗等手段联合使用有利于提高肿瘤治疗的综合疗效。本研究观察了DC-CIK治疗法联合化疗治疗中晚期胃癌的疗效以及安全性，现将结果报道如下。

1 临床资料

1.1一般资料 选择2013年5月—2014年3月来南京军区福州总医院第一附属医院肿瘤中心接受化疗治疗的中晚期胃癌患者52例，均经过病理、细胞学以及影像学检验确诊，预计生存期>3个月，至少能完成3周期化疗， KPS评分≥60分。化疗前心肝肾以及尿常规正常，无低、高血压病史，血常规、心电图等结果提示无化疗禁忌证。排除正在接受放化疗或其他抗肿瘤治疗者，同时存在其他恶性肿瘤及传染病的患者、怀孕期及哺乳期妇女、对生物制品过敏者、伴有严重心肺肺肾功能不全及免疫功能降低者。将52例患者随机分成2组：治疗组26例，男13例，女13例；年龄40～65岁；按国际抗癌联盟(UICC) 分期标准进行临床分期：Ⅱ期13例，Ⅲ期8例，Ⅳ期5例。对照组26例，男14例，女12例；年龄45～68岁；临床分期：Ⅱ期14例，Ⅲ期8例，Ⅳ期4例。2组患者性别、年龄、临床分期等比较差异无统计学意义(P均>0.05),具有可比性。

1.2治疗方法

1.2.1对照组 采用吉西他滨联合奥沙利铂化疗。吉西他滨1 000 mg/m2，第1,8天，静滴30 min；奥沙利铂85 mg/m2静滴，第1天。

1.2.2治疗组 在常规化疗的基础上加上DC-CIK治疗。采集患者外周血50～100 mL，采血当日患者饮食要清淡，采用血液成分分离机循环外周血，采集单核细胞，再将分离出的单核细胞放在超洁净实验室进行诱导、激活，定向培养出DC-CIK细胞，参照文献[3]方法，待细胞成熟后，再将DC-CIK分次回输到患者体内。每次回输前2 d对培养液行涂板及细菌学培养，每次回输细胞前1 h以凝胶法测细菌内毒素。每次输注DC-CIK细胞不低于1×109个，4周为1个疗程，每个疗程输入细胞总数>1×1010个，DC-CIK与化疗不同时进行，一般间隔1～2周。2个疗程后评价疗效。

1.3观察指标 ①观察2组近期疗效按WHO标准判定。完全缓解(CR)：可见的肿瘤病变完全消失，维持4周以上;或所有的症状、体征完全消失至少4周。部分缓解(PR)：肿瘤病灶的最大直径及其最大的垂直横径的乘积缩小50%以上，其他病灶无增大，无新病灶出现，维持4周以上；或估计肿瘤大小减少大于等于50%，至少4周。稳定(SD)：肿瘤病灶的两径乘积缩小不足50%，或增大不超过25%，无新病灶出现，维持4周以上；或病情无明显变化至少4周，估计肿瘤大小减少不足50%，增大不到25%。进展(PD)：肿瘤病灶的两径乘积增大25%以上或出现新病灶；或有新病变出现，或原有病变估计增大大于等于25%。以CR+PR计算客观缓解率(RR)，以CR+PR+SD计算疾病控制率(DCR)。②观察2组患者生活质量、免疫功能、不良反应情况以及1年生存率。生活质量采用KPS评分判定。治疗前及治疗结束后1周抽取2组患者外周血，检验辅助性T细胞(CD3+CD4+)、抑制性T细胞(CD3+CD8+)、NK细胞(CD3-CD56+)以及NKT细胞(CD3+CD56+)百分率。不良反应按WHO标准判定但不予分级。1年生存率指接受治疗的患者经1年随访尚存活数所占的比例。

2 结 果

2.1近期疗效 2组均完成2周期治疗。治疗组CR 1例，PR 13例，SD 7例，PD 5例，客观缓解率54% ，疾病控制率81%；对照组CR 0例，PR 12例，SD 3例，PD 11例，客观缓解率46%，疾病控制率58%。2组客观缓解率比较差异无统计学意义(P>0.05)，疾病控制率比较差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2生活质量 治疗组和对照组治疗前KPS评分均为(70±10)分。对照组化疗后KPS评分为(75±10)分，与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗组治疗后KPS评分为(85±17)分，与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。

2.3免疫力功能 治疗前2组辅助性T细胞、NK细胞、抑制性T细胞及NKT细胞百分率比较差异无统计学意义(P均>0.05)。治疗后治疗组各指标均明显改善(P均<0.05)，而对照组化疗后仅辅助T细胞、NKT细胞百分率明显降低(P均<0.05)。治疗后2组各指标比较均有显著性差异(P均<0.05)。见表1。

表1 2组治疗前后免疫功能情况比较

注：①与治疗前比较，P<0.05;②与对照组比较，P<0.05。

2.4不良反应 治疗组骨髓抑制、恶心呕吐、白细胞减少发生率均明显低于对照组(P均<0.05)。但治疗组在输入细胞过程中及输入后出现寒战高热2例，未出现心肾功能异常。见表2。

2.51年生存率 治疗组中位生存期为11.5个月，其中12例尚在随访，1年生存率为46%；对照组中位生存期10.4个月，其中7例还在随访，1年生存率为27%。采用Kaplan-Meier方法绘制疾病无进展生存率曲线，经Log-rank检验，2组比较差异无统计学意义(P>0.05)，见图1。

表2 2组不良反应发生情况比较 例

注：①与对照组比较，P<0.05。

图1 2组1年生存率比较

3 讨 论

肿瘤的免疫治疗可与手术、放化疗等治疗手段联合使用提高肿瘤治疗的综合疗效，而且该治疗方式是通过激发和增强自身的免疫力从而有效清除少量残留的肿瘤细胞，防止肿瘤的复发。DC-CIK疗法采用共培养树突状细胞(DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)进行治疗。DC细胞来源于CD14+或者CD34+细胞，是一种抗原提呈细胞，可以向初始T淋巴细胞提呈抗原，激活抗原特异性的细胞毒T淋巴细胞反应[8]。DC是目前所知的功能最强大的抗原提呈细胞，是唯一能显著刺激未致敏T细胞增殖的细胞，与单核巨噬细胞和B淋巴细胞相比其提呈抗原和刺激T细胞增殖的能力增大了100～1 000倍;而肿瘤的发生、转移以及预后都与DC细胞的减少或者缺失有关。经过DC细胞治疗后肿瘤部位会发现特异性T细胞的浸润[9]。DC细胞在外周血或者人骨髓中为非成熟状态，可由一些细胞因子如GM-CSF、IL-4和TNF-α刺激转化为成熟状态从而发挥作用。近年来，以DC细胞为基础的免疫治疗被认为是肿瘤免疫治疗新的支撑点。CIK细胞是一种新型的免疫活性细胞，是一类对恶性肿瘤细胞具有高度杀伤能力的T淋巴细胞，主要效应细胞以同时表达CD3+(T细胞表面抗原)和CD56+(NK细胞表面标志)为特征，具有NK细胞非MHC限制性杀瘤活性和T淋巴细胞的抗肿瘤优点[10]。CIK在体外增殖速度快，细胞杀伤活力强，能精确地杀伤肿瘤细胞而不损伤任何正常组织，对多种耐药肿瘤细胞同样敏感，特别擅长清除残留及转移的微小病灶，防止癌细胞复发，同时也能够提升患者免疫力；DC-CIK联合治疗比单纯的CIK有更强的抗肿瘤效果[11]。单纯的CIK细胞对肿瘤的近期疗效明显，但是远期疗效及杀伤肿瘤细胞的特异性不及DC，而DC细胞的近期疗效相对较弱，所以采用DC-CIK共同治疗具有较好的理论基础。DC-CIK共治疗细胞的增殖能力和杀死肿瘤能力均较单DC或者CIK有明显增强，杀瘤谱更广，对肿瘤的杀死高达71%，而且能够提高自身抵抗力，间接杀死肿瘤细胞。且DC-CIK治疗不良反应小，能增强患者自身的抵抗力，改善患者的身体状况，提高生活质量，减轻患者的痛苦。张泉成等[12]研究发现DC-CIK疗法联合TACE及RFA治疗小肝癌能够提高患者术后的肝功能和免疫力，降低肝癌的复发率，延长患者生存期。郭伟伟等[13]也发现DC-CIK联合TACE术治疗原发性肝癌能够取得良好的临床疗效，增强患者的免疫力，提高患者的生活质量。刘涛等[14]发现自体DC/CIK细胞治疗宫颈癌临床效果良好。

本研究结果显示，治疗组疾病控制率和KPS评分均明显高于对照组。治疗组治疗后辅助T细胞及NK细胞百分率显著提升，抑制T细胞的百分率显著降低；而对照组辅助T细胞百分率显著降低，抑制T细胞的百分率略有上升，NK细胞百分率几乎不变。提示DC-CIK疗法联合化疗提高了患者的免疫力，而单纯化疗患者的免疫力进一步降低。治疗组1年生存率为58%，其中12例尚在随访；而对照组为46%，其中7例还在随访。2组的1年生存率比较差异无统计学意义，可能是病例数不多的原因。2组不良反应均为血液学毒性和消化道反应，但是治疗组不良反应比对照组明显减轻。以上结果和DC-CIK治疗其他肿瘤的结果相似[15-16]，说明DC-CIK疗法联合化疗治疗中晚期胃癌具有良好疾病控制率，能够改善生活质量，提高患者免疫力和生存率，减轻不良反应，值得临床应用和推广。

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Study on DC-CIK combined with chemotherapy in the treatment of patients with advanced gastric cancer

WU Fubing, HUANG Wen, WANG Kangxia, WANG Mingyuan, XU Fanggui, HUANG Chunkai, WANG Xing

(The First Hospital Affiliated to PLA Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command, Putian351100,Fujian,China)

Objective It is to observe the clinical effect and safety of Dendritic cell-Cytokine induced killers (DC-CIK) combined with chemotherapy in the treatment of advanced gastric cancer. Methods 56 patients with advanced gastric cancer were randomly divided into two groups. The patients were treated by chemotherapy in gemcitabine combined with oxaliplatin in the control group, and were treated by routine chemotherapy combining with DC-CIK in the treatment group. After treatment, the therapeutic effect, life quality, 1-year survival and toxicities of the two groups were observed. Results The remission rate (RR) and disease control rate (DCR) were 54% and 81% in treatment and 46% and 58% in control group respectively. There was no significant difference in RR (P>0.05) but was significant difference in DCR between both groups (P>0.05). after treatment, the KPS score was 85±17 of treatment group and 75±10 of control group respectively, there was significant difference between the two groups (P<0.05). The immunity was improved in the treatment group and declined in the control group obviously; there was significant difference in the immunity between the two groups. Compare with control group, the 1-year survival of treatment group was not remarkable but its survival time was more than control group. The main toxicities were hematological toxicities and digestive tract reactions in two group, but the treatment group was lighter than control group (P<0.05). Conclusion DC-CIK combined with chemotherapy has significant clinical effect on advanced gastric cancer and does not have obvious toxic and side effect. Moreover it can improve the RR, survival and quality. So it is worth popularizing and applying on clinic.

chemotherapy; Dendritic cell-Cytokine induced killers; advanced gastric cancer

吴付兵，男，硕士，主治医师，主要从事肿瘤的综合治疗。

王星，E-mail: wxing1972@126.com

莆田市科技计划项目(莆市科2012S02(1))

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.03.005

R735.2

A

1008-8849(2015)03-0242-04

2014-07-25