电化学发光免疫分析法检测低值HBsAg与乙肝五项检测结果比较

蔡 丹,陈建明,李慧梁,田 佳

(湖南省湘潭市中心医院输血科 411100)



·临床研究·

电化学发光免疫分析法检测低值HBsAg与乙肝五项检测结果比较

蔡 丹,陈建明,李慧梁,田 佳

(湖南省湘潭市中心医院输血科 411100)

目的 比较电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测低值乙肝表面抗原(HBsAg)与酶联免疫吸附试验(ELISA)法乙肝五项[HBsAg、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]的检测结果，为临床和科研提供一定的科学依据。方法 根据ECLIA检测HBsAg的结果，将207例患者分为3组：A组，HBsAg为>0.05～5.00 IU/mL；B组，HBsAg为>0.20～0.50 IU/mL；C组，HBsAg为0.05～0.20 IU/mL。采用ELISA法对3组进行HBsAg检测，对C组进行乙肝五项检测及6个月追踪HBsAg检测，对测定结果进行比较分析。结果 A、B、C组ECLIA法和ELISA法测定HBsAg的阳性符合率分别为100.00%、98.08%、30.43%，C组显著低于A、B组，差异有统计学意义(P<0.05)。对C组中ELISA法检测HBsAg为阴性，HBeAb、HBcAb同时阳性或HBcAb单项阳性的患者，进行6个月追踪检测，HBsAg阳性符合率提高至45.65%。结论 ECLIA法检测低值HBsAg的灵敏度明显高于ELISA法，能有效提高检测的准确性。

电化学发光免疫分析； 酶联免疫吸附试验； 乙肝五项

乙型肝炎病毒(HBV)感染是危害人类健康最严重的问题之一。全球超过1/3的人口曾感染过HBV，其中超过3.6亿人转化为慢性感染[1]；每年约有62万人死于HBV感染引起的急性重型肝炎、肝硬化和肝癌，此外还新增感染450万人，其中1/4发展为肝病[2]。我国是HBV感染的高发流行地区，流行病学调查显示人群中乙肝表面抗原(HBsAg)阳性携带者为7.18%[3]。乙型肝炎是目前流行最广泛、危害最严重的病毒性肝炎之一，而HBsAg是HBV感染最主要的病原标志和直接证据之一[4]。有资料显示，低水平HBsAg携带者在人群中占有一定比例，正常人群HBsAg水平在5 IU/mL以下者占2.34%[5]。乙型肝炎血清学特征复杂多变，HBV感染者会在不同时期出现不同的血清标志物，且不同时期的血清标志物浓度不一，因此选择高灵敏度的检测方法，对乙型肝炎的临床诊断、治疗、疗效观察及预防都有着重要的意义。目前我国大部分医疗机构正在由酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测向电化学发光免疫分析(ECLIA)技术发展，本文对ECLIA检测低值HBsAg的结果与ELISA法检测乙肝五项[HBsAg、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]的结果进行了比较，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 以2011年11月至2013年11月本院输血前和手术前ECLIA检测血HBsAg(结果为0.05～0.50 IU/mL)的患者为研究对象，共207例，其中男111例，女96例，年龄22～81岁，平均46.5岁。

1.2 仪器与试剂 ARCHITECT i2000sr化学发光免疫检测系统由美国雅培提供，试剂盒临界值为0.05 IU/mL，ELISA法试剂盒由上海科华生物有限公司提供，试剂盒临界值为0.105 IU/mL，酶标仪为芬兰雷勃MK3型，洗板机为芬兰雷勃4MK2型。

1.3 方法 ECLIA法和ELISA法均严格按照说明书操作。根据ECLIA法检测HBsAg的结果，将患者分为3组：A组，HBsAg为>0.50～5.00 IU/mL，63例；B组，HBsAg为>0.20～0.50 IU/mL，52例；C组，HBsAg为0.05～0.20 IU/mL，92例，其中ELISA法阴性者64例(HBeAb、HBcAb同时阳性36例，HBcAb单项阳性28例)。观察A、B、C组中，ECLIA法和ELISA法检测HBsAg的阳性符合率。对C组中ELISA法阴性的64例患者追踪3个月，3个月后再次分别采用ECLIA法检测HBsAg，ELISA法检测乙肝五项，如3个月后ELISA法检测结果为阳性，则不再追踪，对于ELISA法检测结果仍为阴性的患者，再连续追踪3个月，方法同上，观察其HBsAg阳性符合率是否提高。

2 结 果

A组与B组比较，ECLIA法和ELISA法的阳性符合率差异无统计学意义(P>0.05)，但C组的阳性符合率较A组和B组显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)。对C组中ELISA法检测HBsAg阴性、HBeAb、HBcAb同时阳性或HBcAb单项阳性的患者，进行6个月追踪检测，结果HBsAg阳性符合率提高至45.65%，见表1。

表1 各组ELISA法检测HBsAg结果比较

注：*表示追踪6个月后的C组。

3 讨 论

目前，HBV感染人群中，有一部分血清HBsAg呈低值水平状态存在[6]，一般认为这是由于机体处于感染HBV的早期即窗口期，体内虽有病毒复制但HBsAg编码呈低水平表达。另外，还有些慢性乙型肝炎患者的病毒S区或X区基因突变也会影响到HBsAg表达，血清中HBsAg处于低值水平和HBsAg阴性的隐匿性乙型肝炎感染(HBcAb阳性)，加之目前的ELISA诊断试剂对不同突变的HBsAg检测能力不相同，使血清中低值水平HBsAg的乙型肝炎患者易被漏检。正如马红霞等[7]采用ELISA法和ECLIA法检查血清中HBsAg的结果显示：ECLIA法和ELISA法检测HBsAg的阳性率分别为5.82%(519例)和5.06%(451例)。说明ECLIA法检测HBsAg的敏感性更高。但低值水平HBsAg也可作为HBV感染的标志，0.1 μg/L的HBsAg即有传染性，因此低值水平HBsAg的检出率对乙型肝炎的诊断、疗效观察，特别是对于流行病学调查、控制母婴传播、保障输血安全具有重要意义。

本研究中采用的ARCHITECT i2000sr化学发光免疫检测系统是以顺磁性珠作为包被载体，与标本中的相应抗体或抗原结合后，加入吖啶酯作为标记，在特定的磁场区发生沉积，经反复洗涤使抗体与抗体复合物或游离抗原分离，加入激发液与预激发液后，测定其相应的发光强度即可判断标本的抗原抗体浓度。该方法具有重复性好、灵敏度高、准确性高、无放射性、能快速检查等优点[8]。本研究结果显示，对于ECLIA法测定HBsAg值为>0.50～5.00 IU/mL的患者(A组)，ELISA法检测HBsAg的阳性符合率为100.00%；对于ECLIA法测定HBsAg值为>0.20～0.50 IU/mL的患者(B组)，ELISA法检测HBsAg的阳性符合率为98.08%；对于ECLIA法测定HBsAg值为0.05～0.20 IU/mL的患者(C组)，ELISA法测定HBsAg的阳性符合率为30.43%，显著降低，与其他两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。对C组中ELISA法检测HBsAg阴性、HBeAb、HBcAb同时阳性或HBcAb单项阳性的患者，进行6个月追踪检测，结果HBsAg阳性符合率提高至45.65%，说明ELISA法漏检的有一部分为免疫“窗口期”，随着HBsAg滴度提高达到ELISA法检测水平；一部分为HBV的S基因、X基因变异导致HBsAg低水平的表达和隐匿性HBV感染，一直处于HBsAg低值水平，对常规采用ELISA法检测HBsAg应同时进行乙肝五项检测很有意义，应综合乙肝五项结果和临床症状综合进行分析，特别对HBcAb阳性、HBsAg阴性的患者应有进一步的检测方法降低漏检率。有研究证明，HBcAb的检测有助于降低输血传播HBV的感染性，尤其在减少隐匿性HBV感染方面，如美国、加拿大等国家，已将HBcAb作为常规检测项目，大大提高了输血安全性[9]。在HBV流行率较高的地区如中国台湾、日本等，HBV DNA在HBcAb阳性人群中的检出率则高达4%～24%[10]，说明HBcAb阳性率与HBV感染率有密切关系，本研究结论与之相符。

综上所述，ECLIA法具有灵敏、特异、精密度高、准确度好、线性范围宽等优点，并能够降低HBsAg漏检率，操作简单、实用性强，可作为常规检测。对未开展ECLIA检测的应关注乙肝五项检测结果，尽可能减少漏检率。

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10.3969/j.issn.1672-9455.2015.07.046

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1672-9455(2015)07-0982-02

2014-11-10

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