CD117、CD44在卵巢浆液性肿瘤中的表达及临床意义

马 琳，吴小华

（1.河北省邢台市第三医院妇科，河北 邢台054001；2.中国人民解放军白求恩国际和平医院妇科，河北 石家庄050082）

卵巢浆液性囊腺癌是最常见的卵巢恶性肿瘤，浸润和转移是其最重要的生物学行为［1］。CD117是由原癌基因c-kit编码的一种跨膜酪氨酸激酶的受体［2］。CD44是细胞表面蛋白，参与细胞的黏附和迁移［3］。另外，CD44是透明质酸受体，通过激活丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）和磷酯酰肌醇3激酶（phosphoinositide-3-kinase，PI3K ）／丝氨酸／苏氨酸 蛋 白 激 酶 （serine／threonine kinase phosphorylation，AKT）信号通路，促进肿瘤细胞的增殖和存活［4-5］。目前，国内外关于 CD117和CD44同时在卵巢浆液性囊腺癌发生发展过程中的研究及其相互关系尚未见报道。本研究采用免疫组织化学方法，检测CD117和CD44在卵巢浆液性囊腺癌中的表达情况，并分析它们与临床病理特征的关系及其相互之间的关系，以探讨CD117和CD44在卵巢浆液性囊腺癌进展中的可能作用及与生物学行为的关联。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2008年1月—2013年3月河北省邢台市第三医院病理科手术切除45例卵巢浆液性囊腺癌和8例卵巢交界性积液性囊腺瘤存档蜡块，对全部病例的所有蜡块重新切片，HE染色，由2位高年资病理医师严格按照2000年WHO标准进行明确诊断复核。同时收集研究病例的临床病理资料，包括患者的年龄、病理分级、有无淋巴结转移和FIGO分期等。本研究卵巢浆液性囊腺癌45例，年龄49～63岁，平均（55.0±2.0）岁；卵巢交界性浆液性囊腺瘤8例，年龄51～58岁，平均（54.0±2.0）岁；同时以10例正常卵巢组织作为对照，年龄48～58岁，平均（56.0±2.0）岁，均来自子宫肌瘤同时行卵巢切除、病理证实无异常者。所有病例术前均未进行放疗和化疗。3组年龄差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 实验方法 所有新鲜标本固定，包埋，切片，一张进行HE染色，一张采用免疫组织化学ElivisionTMplus两步法检测组织中CD117和CD44的表达。CD117用已确定为阳性胃间质瘤切片作为阳性对照，CD44用已确定为阳性扁桃体切片作为阳性对照，用PBS代替第一抗体作为阴性对照。

1.3 免疫组织化学结果判定 CD117和CD44染色主要定位于细胞膜和细胞浆，阳性判断标准为细胞膜、细胞浆呈清晰棕黄色细颗粒。根据阳性细胞与染色强度对免疫组织化学结果进行半定量分析。首先将染色强度打分：0分为无色，1分为淡黄色，3分为棕褐色，2分为染色强度介于1分和3分之间；随机选择5个高倍视野（400）计数肿瘤细胞总数200个和阳性细胞个数，得出阳性细胞百分率，0分为阴性，1分为阳性细胞≤10%，2分为＞10%～50%，3分为＞50%～75%，4分为＞75%。将每张切片着色程度得分与着色细胞百分率得分相乘最后得分：≤3分为（-），＞3分为（＋）。

1.4 统计学方法 应用SPSS 17.0软件进行统计分析。计数资料比较采用χ2检验；相关性采用Spearman等级相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 不同卵巢组织中CD117和CD44的表达 卵巢浆液性囊腺癌的CD117蛋白阳性率高于卵巢交界性浆液性囊腺瘤组织和正常卵巢组织（P＜0.05）；卵巢浆液性囊腺癌的CD44表达阳性率高于正常卵巢组织（P＜0.05）。见表1。

表1 不同卵巢组织中CD117和CD44的表达Table 1 Expression of CD117and CD44in different groups（例数，%）

2.2 不同病理特征CD117、CD44的表达阳性率比较 在CD117的表达上，年龄≥55岁者CD117阳性表达率高于＜55岁者（P＜0.05）；高级别病理分级CD177阳性表达率高于低级别病理分级（P＜0.01）；有淋巴结转移者CD177阳性表达率高于无淋巴结转移者（P＜0.01）；FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期CD177阳性表达率高于FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期者（P＜0.01）。在CD44的表达上，年龄≥55岁者CD44阳性表达率与＜55岁者差异无统计学意义（P＞0.05）；高级别病理分级CD44阳性表达率高于低级别病理分级（P＜0.05）；有淋巴结转移者CD44阳性表达率高于无淋巴结转移者（P＜0.01）；FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期CD44阳性表达率高于FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期者（P＜0.05）。见表2。

表2 CD117、CD44的表达与卵巢浆液性囊腺癌临床病理特征的关系Table 2 CD117，CD44expression and clinical pathological features（例数，%）

2.3 CD117与CD44在卵巢浆液性囊腺癌中表达的相关性 由Spearman等级相关分析可知CD117的表达与CD44表达呈正相关（rs=0.421，P=0.004）。

3 讨 论

卵巢恶性肿瘤是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一，其中20%为恶性上皮性卵巢肿瘤。卵巢浆液性囊腺癌占卵巢上皮性恶性肿瘤的60%［6］。当卵巢癌细胞位于卵巢内时，其5年生存率可≥90%，而实际上＞75%的患者被发现时已是晚期，且肿瘤已转移到上腹部或腹腔外转移，5年生存率仅为20%。卵巢癌预后较差的主要原因与卵巢组织的解剖位置、患者缺少早期临床症状、早期诊断手段有限等有关［7］。

寻找肿瘤发生初期时的基因改变对肿瘤的早期诊断及后续治疗极其重要。本研究检测CD117和CD44在卵巢浆液性肿瘤和正常卵巢中的表达，初步探讨二者在卵巢肿瘤的发生、发展中的相互关系。

3.1 CD117在卵巢浆液性肿瘤中的表达 CD117又称c-kit，是一种酪氨酸激酶，其配体为干细胞因子，常表达于造血干细胞、生殖细胞、黑色素细胞、胃肠道Cajal细胞及其对应肿瘤［8-10］。

目前，国内有关CD117在卵巢癌中表达的研究鲜见报道。国外研究表明，卵巢上皮性癌中CD117阳性表达率为0%～87%［11-13］。本研究结果显示，卵巢浆液性囊腺癌中CD117蛋白阳性表达高于卵巢交界性浆液性囊腺瘤组织和正常卵巢组织（P＜0.05）。与Schmandt等［14］报道一致。本研究结果显示，在卵巢浆液性囊腺癌中，FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期CD177阳性表达率高于FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期者，差异有统计学意义（P＜0.05），提示卵巢浆液性囊腺癌的进展与CD117蛋白表达升高相关；有淋巴结转移者与无淋巴结转移者相比CD117蛋白阳性表达率显著升高，说明CD117蛋白与肿瘤的侵袭、转移关系密切相关。卵巢浆液性囊腺癌中CD117蛋白高表达的原因目前尚不清楚，可能原因是CD117基因突变后使CD117受体二聚体形成受阻，并且使不同底物蛋白磷酸化，刺激肿瘤细胞的恶性克隆。

3.2 CD44在卵巢浆液性肿瘤中的表达 本研究结果表明，卵巢浆液性囊腺癌中CD44蛋白表达高于正常卵巢组织（P＜0.05）。CD44蛋白表达量在高级别卵巢浆液性囊腺癌中明显高于低级别者，提示CD44蛋白表达量与FIGO分期有相关性（P＜0.05）。表明卵巢浆液性肿瘤的发生、发展、浸润和转移均与CD44密切相关，并且CD44蛋白的表达与肿瘤的生物学行为之间存在正相关，因此部分低度恶性卵巢肿瘤中亦有较高CD44表达，提示为发生恶变的重要信号之一，该指标有望成为临床预测卵巢瘤早期恶变的一个参考指标［15］。

3.3 CD117与CD44在卵巢浆液性囊腺癌中表达的相关性 本研究相关性分析显示CD117和CD44在卵巢浆液性囊腺癌中表达呈正相关，该结果与宋楠等［16］在胸腺上皮肿瘤中的研究结果一致。CD117和CD44蛋白的联合表达可能在卵巢浆液性囊腺癌的侵袭和转移中起协同作用：CD44的表达使癌细胞容易发生细胞黏附，CD117的异常表达促进肿瘤细胞增殖和抗凋亡信号的失调，便于肿瘤的恶性克隆，多因素的综合作用使卵巢癌的转移更容易发生［17］。

综上所述，CD117、CD44蛋白在卵巢浆液性囊腺癌中高表达与病理分级、淋巴结转移及FIGO分期密切相关，可能成为判断预后和指导治疗的一个指标。近年来，针对特异分子的靶向药物为临床治疗肿瘤开辟了一个新的天地。相信在不久的将来它们也能为卵巢浆液性囊腺癌的治疗开辟一条新途径。

［1］ Li J，Fadare O，Xiang L，et al.Ovarian serous carcinoma：recent concepts on its origin and carcinogenesis［J］.J Hematol Oncol，2012，5：8.

［2］ Huang R，Wu D，Yuan Y，et al.CD117expression in fibroblasts-like stromal cells indicates unfavorable clinical outcomes in ovarian carcinoma patients［J］.PLoS One，2014，9（11）：e112209.

［3］ Anand MT，Kumar S.CD44：a key player in breast cancer［J］.Indian J Cancer，2014，51（3）：247-250.

［4］ Zhu R，Wang SC，Sun C，et al.Hyaluronan-CD44interaction promotes growth of decidual stromal cells in human firsttrimester pregnancy［J］.PLoS One，2013，8（9）：e74812.

［5］ Weigand S，Herting F，Maisel D，et al.Global quantitative phosphoproteome analysis of human tumor xenografts treated with a CD44antagonist［J］.Cancer Res，2012，72（17）：4329-4339.

［6］ Morice P，Denschlag D，Rodolakis A，et al.Recommendations of the Fertility Task Force of the European Society of Gynecologic Oncology about the conservative management of ovarian malignant tumors［J］.Int J Gynecol Cancer，2011，21（5）：951-963.

［7］ Vargas AN.Natural history of ovarian cancer ［J］.Ecancermedicalscience，2014，8：465.

［8］ 段爱红，吴小华，孙志强，等.CDll7和Ki67在卵巢上皮性癌组织中的表达及临床意义［J］.河北医科大学学报，2013，34（12）：1525-1528.

［9］ 王江，俞清翔，何占坤，等.食管间质瘤与胃间质瘤的临床特点及内镜治疗［J］.临床荟萃，2014，29（5）：490-492.

［10］ 彭林涛，许欣.食管鳞状细胞癌及相应癌旁组织中层黏连蛋白、CD44v6、血管内皮生长因子的检测及临床意义［J］.临床荟萃，2011，26（23）：2058-2060.

［11］ Huang R，Wu D，Yuan Y，et al.CD117expression in fibroblasts-like stromal cells indicates unfavorable clinical outcomes in ovarian carcinoma patients［J］.PLoS One，2014，9（11）：e112209.

［12］ Chen D，Zhang Y，Wang J，et al.MicroRNA-200c overexpression inhibits tumorigenicity and metastasis of CD117＋CD44＋ovarian cancer stem cells by regulating epithelial-mesenchymal transition［J］.J Ovarian Res，2013，6（1）：50.

［13］ Trinh DT，Shibata K，Hirosawa T，et al.Diagnostic utility of CD117，CD133，SALL4，OCT4，TCL1and glypican-3in malignant germ cell tumors of the ovary［J］.J Obstet Gynaecol Res，2012，38（5）：841-848.

［14］ Schmandt RE，Broaddus R，Lu KH，et al.Expression of c-ABL，c-KIT，and platelet-derived growth factor receptorbeta in ovarian serous carcinoma and normal ovarian surface epithelium［J］.Cancer，2003，98（4）：758-764.

［15］ Ween MP，Oehler MK，Ricciardelli C.Role of versican，hyaluronan and CD44in ovarian cancer metastasis［J］.Int J Mol Sci，2011，12（2）：1009-1029.

［16］ 宋楠，姜格宁，陈岗，等.p53、CD117及CD44v在胸腺上皮肿瘤中的表达及其意义［J］.中华实验外科杂志，2010，27（9）：1211-1214.

［17］ Curley MD，Garrett LA，Schorge JO，et al.Evidence for cancer stem cells contributing to the pathogenesis of ovarian cancer［J］.Front Biosci（Landmark Ed），2011，16：368-392.