GC-MS外标法分析核桃仁中的脂肪酸含量*

2015-03-13魏永生

化学工程师 2015年6期

耿薇，魏永生，刘静

（咸阳师范学院化学与化工学院，陕西咸阳712000）

核桃仁营养保健价值很高，中医认为,核桃性温,味甘,无毒,有健胃、补血、润肺、益胃、养神等功效。核桃仁的含油率一般在70%左右，主要由亚油酸等不饱和脂肪酸组成，具有防治血栓、降血压、防止血小板聚集、加速胆固醇排泄、促进卵磷脂合成、抗衰老的特殊功效。脂肪酸是人体不可缺少的营养成分之一，与健康密切相关[1，2]。已有用峰面积归一法分析核桃仁中的脂肪酸含量[3，4]，本文通过气相色谱-质谱联用（GC-MS）的外标法对核桃仁中的脂肪酸进行定量分析。

1 实验部分

1.1 仪器和试剂

GCMS-QP2010 气相色谱-质谱联用仪（日本岛津SHIMADZU 制作所），RE-52AA 旋转蒸发器（上海嘉鹏科技有限公司），10μL 微量进样器（澳大利亚SGE），Sartorius CP124S 电子天平（Max 120g，d=0.1mg），20～200μL 移液器（Thermo Finnpipette），SHB-IIIA 循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司），SB4200DTD 超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司），DF-101S 集热式恒温加热磁力搅拌器（河南省予华仪器有限公司），HR7625 飞利浦食品加工机，标准检验筛（40 目，孔径0.45 毫米），101 型电热鼓风干燥箱（北京科伟永兴仪器有限公司），索氏提取器。

核桃仁、硫酸、乙醚、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸，均为分析纯。

1.2 分析条件

气相色谱条件：J&W DB-WAX 弹性石英毛细管色谱柱（30m×0.25mm×0.25μm）；载气为高纯He，纯度≥99.999%；柱温：130～240。柱初温130℃，保持1min，以20℃·min-1升温至230℃，保持5min，再以20℃·min-1升温至240℃，保持6.5min，共18.00min。进样口温度250℃；柱前压84.6kPa，柱流量1.00mL·min-1，分流比1∶30；用微量进样器进样1.0μL。

质谱条件：EI 离子源，离子源温度200℃，GC-MS 接口温度200℃，电子能量70eV，电子倍增器电压0.97kV[2]，质量扫描范围29～450m·z-1，溶剂峰切除时间1.6min，质谱检测起测时间1.7min。

1.3 核桃仁油的提取

将核桃仁烘干，粉碎并过40 目筛。称取一定质量的样品，移入滤纸筒内，以乙醚作溶剂，利用索式提取器，恒温水浴30℃回流3h。倒出上清液，抽滤，用旋转蒸发仪将滤液蒸去乙醚，得到核桃仁油样品。

1.4 脂肪酸的甲酯化

准确称取脂肪酸或样品于25mL 比色管中，准确加入1%硫酸-甲醇溶液2.0mL，于70℃水浴加热60min。再加正己烷定容至10mL，振荡，加水至25mL，振荡，静置24h，吸取上层脂肪酸甲酯，做GC-MS 分析。

1.5 脂肪酸标准溶液的配制

选取常见的4 种脂肪酸：油酸，亚油酸，硬脂酸，棕榈酸。准确称量7 份4 种脂肪酸的标准系列于25mL 比色管中，按1.4 配制成标准溶液，做GC-MS分析。

2 结果与讨论

2.1 4 种脂肪酸的标准曲线

图1 为4 种脂肪酸标准品的GC-MS 总离子流图，对GC-MS 谱图进行鉴定和定量分析，应用SHIMADZU GCMSsolution Release 2.10 专业分析软件。根据GC-MS 检测得到的质谱信息，用质谱图检索数据库NIST 147 进行检索，通过与标准谱图对照及质谱碎片对峰的分析，确定每一个组分的化学结构[2]。采用计算机检索与人工解析各峰相应的质谱图。

绘制4 种脂肪酸的标准曲线，得到标准曲线方程及相关系数见表1。