铅中毒肉牛血铅含量的测定与分析

郭春艳

（招远市毕郭畜牧兽医站，山东招远 265412）

铅中毒肉牛血铅含量的测定与分析

郭春艳

（招远市毕郭畜牧兽医站，山东招远 265412）

铅中毒是动物最常见的一种重金属或矿物质中毒病。判定铅中毒最常用和最有效的方法是检测血铅，血铅水平能准确地反映出机体近期铅中毒程度。本次实验利用火焰原子吸收光谱法（FAAS），测定了甘肃张掖某养牛场4头铅中毒的肉牛的血铅含量，为其提供铅中毒实验室检测指标。

1 材料与方法

1.1 材料

取自甘肃张掖某养牛场铅中毒西门塔尔改良肉牛颈静脉血样4份。

1.2 主要实验仪器

美国热电公司生产的热电S4型原子吸收光谱仪、德国产赛多利斯（SARTORIAS）BP221S型电子天平、pb空心阴极灯、微量移液管、调温电炉、容量瓶（50 ml、100 ml、1 000 ml）、烧杯（50 ml）。原子吸收光谱检测方法的工作条件详见表1。1.3 主要试剂

表1 原子吸收光谱法测定Pb元素的工作条件

铅标准溶液、肝素钠溶液（5g/L），硝酸（GB626），高氯酸（GB623）、混合酸消化液：硝酸与高氯酸比为 4∶1、试验用水为去离子水。

1.4 实验原理

血样经湿消化处理后，导入到S4型原子吸收光谱仪中，经火焰原子化后。将血液置于228.8 nm的共振线下测定铅。铅元素的吸收值与其含量成正比，与标准系列比较可定量得出Pb的含量[1]。

2 方法与步骤

2.1 实验器材的前处理

实验所用的器皿（烧杯、玻璃棒、容量瓶等）均使用硝酸溶液（3%）浸泡24 h后用去离子水冲洗，晾干备用。

2.2 标准液的配制

铅标准溶液：略。此硝酸铅溶液浓度为1 000 μg/ml。

铅的标准使用液：准确吸取铅标准液（1 000 μg/ml）10.0 ml，置于盛有少量0.5 mol/ml硝酸溶液的100 ml的容量瓶中。加入0.5 mol/L的硝酸稀释至刻度，此溶液的浓度为100 μg/ml。

铅的标准校正液：准确吸取铅标准使用液1、3、5 ml，用0.5mol/L的硝酸溶液稀释至各100 ml，使铅的标准稀释液浓度为：1.0、3.0、5.0μg/ml[2]。

2.3 样品采集

分别随机采取铅中毒肉牛1号、中毒肉牛2号、中毒肉牛3号、4号的颈静脉血各5 ml，分别加入提前加有100μl的5 g/L肝素钠溶液的1、2、3、4编号真空采血管中，充分震荡，置于4 ℃冰箱内保存。使用前放至室温。

2.4 样品的处理

吸取0.5 ml血样到50 ml烧杯中，加入10 ml HNO3-HClO4（3∶1）混合酸小心摇匀，勿使样品黏附于瓶壁上。静置24 h，然后在电炉上加热挥发多余的酸，消化至冒白烟，消化液为无色透明或淡黄色为止。冷却后，过滤到50ml容量瓶中，并用去离子水洗涤消化烧杯3次以上，并定容至50 ml，即得样品溶液[3]。

同时，取与消化血样相同量的混合酸消化液，按上述操作做试剂空白实验测定。

2.5 仪器操作条件

将波长、狭缝、灯电流、燃烧器类型、空气流量、乙炔燃气流量、各程序温度、时间，按表1原子吸收光谱法测定Pb元素的工作条件和仪器说明书，调至最佳状态或需要的状态。

2.6 测定

用校正液做出标准曲线，然后将消化好的血样、空白液和Pb标准浓度系列分别导入S4型原子吸收光谱仪进行测定，并记录下来。

3 实验结果

本次实验经测定得到张掖某养殖场铅中毒肉牛的血铅含量，详见表2。

表2 张掖某养殖场随机抽取的四头铅中毒肉牛血铅含量

4 分析与讨论

4.1 分析

实验室常用血铅含量参考值是0.05～0.25 mg/kg，超过0.30 mg/ kg就被认为是铅中毒[4]。单位换算之后，血铅含量参考值可看为0.30 mg/L。经实验测得四头病牛体内血铅含量分别是血铅标准的48倍、83倍、13倍、27倍，均属于铅中毒。

对照组试样中未检测出铅含量，排除了容器和试剂铅污染的可能性。

4.2 讨论

（1）铅是一种对机体多个系统和器官均具有毒性的重金属元素，在体内无任何生理功能，理想血液中铅的水平应为零[6]。肉牛意外或蓄意采食含铅的物质可导致铅中毒[7]。本实验中的铅中毒肉牛是由于采食了铅含量严重超标的饲料而导致的铅中毒。铅对牛的急性致死量为600～800 mg/kg。牛的慢性中毒量为每6～7 mg/kg的铅摄入量（相当于饲料中100～200 μg/g）[8]。

（2）发病机理。铅在消化道内形成不溶性铅复合物而吸收不良，但在摄食大剂量或长期小剂量摄食铅之后，均可引起急性或慢性蓄积性铅中毒。铅毒主要抑制细胞内含巯基（-SH）的酶，而使机体的生化和生理功能发生障碍，引起小动脉痉挛，损伤毛细血管内皮细胞，影响能量代谢而导致卟啉代谢紊乱，阻碍高铁血红蛋白的合成，改变红细胞及其膜的正常功能，阻抑肌肉内磷酸肌酸的再合成等，从而出现一系列病理变化。

（3）血铅（PbB）：铅进入机体后，吸收入血，其中95%以上的铅是与红细胞结合的形式存在，血浆中只占5%[9]。血铅（PbB）测定可反映机体近期内的铅负荷，是一项敏感性较好的早期检测指标。

5 结论

本次实验利用火焰原子吸收光谱法（FAAS），测定了4头铅中毒的西门塔尔改良肉牛的血铅含量，结果表明，4头被测肉牛的血铅含量均严重超过了肉牛的正常血铅含量。测定的结果对于其铅中毒的最终确诊具有重要意义。