乳腺癌组织中ER、PR、HER-2、BRCA-1的表达情况及与远期预后的关系

原庆会，何　伟，王安群，杨永红

(绵阳市中心医院病理科，四川 绵阳 621000)

乳腺癌组织中ER、PR、HER-2、BRCA-1的表达情况及与远期预后的关系

原庆会，何伟※，王安群，杨永红

(绵阳市中心医院病理科，四川 绵阳 621000)

摘要：目的研究乳腺癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER-2)、乳腺癌易感基因1(BRCA-1)的表达情况及与远期预后的关系。方法将2004年1月至2008年9月在绵阳市中心医院普外科接受乳腺癌根治术的350例患者纳入研究，通过免疫组织化学法检测乳腺癌组织中ER、PR、HER-2、BRCA-1的表达情况，随访患者的复发情况和存活情况。结果 ①ER、PR、HER-1、BRCA-1的阳性率分别为58.0%、54.6%、45.1%、53.7%；②ER、PR、BRCA-1阳性患者的无瘤生存时间、3年存活率、5年存活率均高于阴性患者(P<0.01)；HER-2阳性患者的无瘤生存时间、3年存活率、5年存活率均低于阴性患者P<0.01；③ER、PR、BRCA-1高表达是远期生存情况的危险因素，HER-2高表达是远期生存情况的保护因素。结论ER、PR、HER-2和BRCA-1的表达情况可作为判断乳腺癌患者预后情况的可靠指标，4项指标联合检测可对患者的病情进行全面判断，并针对性的制订综合治疗方案。

关键词：乳腺癌；雌激素受体；孕激素受体；人表皮生长因子受体；乳腺癌易患基因

乳腺癌是女性发病率极高的恶性肿瘤，原癌基因激活、抑癌基因失活、雌孕激素过度刺激等因素均参与疾病的发生过程。雌激素受体(estrogen receptor，ER)、孕激素受体(progesterone receptor，PR)的表达与雌孕激素的作用密切相关，人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2，HER-2)是一类原癌基因，乳腺癌易患基因1(breast cancer type 1 susceptibility gene，BRCA-1)是一类抑癌基因，在乳腺癌的发生、转移、复发中发挥重要作用。本研究联合检测了乳腺癌组织中ER、PR、HER-2、BRCA-1的表达情况，并分析了其与远期预后的关系。

1资料与方法

1.1一般资料收集2004年1月至2008年9月在绵阳市中心医院普外科接受乳腺癌根治术的350例患者纳入研究，纳入标准：①明确的乳腺癌诊断；②接受乳腺癌根治术；③术前未接受放化疗；④取得患者知情同意。患者年龄38～65岁，平均(48±7)岁；TNM分期：Ⅱ期174例、Ⅲ期142例、Ⅳ期34例。

1.2试验材料免疫组织化学试剂盒和常规试剂购买于碧云天公司，抗体购买于santa cruz公司。

1.3免疫组织化学法乳腺癌组织固定于4%多聚甲醛，常规石蜡包埋后以蜡块形式保存。检测时，连续切片后制作石蜡切片，微波加热进行抗原修复，逐步脱蜡至水，滴加1∶300的ER、PR、HER-2、BRCA-1第一抗体，4 ℃湿盒孵育过夜，而后滴加Envision第二抗体，37 ℃湿盒孵育30 min。最后显色、冲洗、复染、封片，镜下观察。

1.4免疫组织化学结果判断阳性染色细胞呈棕褐色或棕黄色，ER、PR阳性染色位于细胞核，HER-2阳性染色位于细胞膜，BRCA-1阳性染色位于细胞质。参照Omranipour等[1]的研究对免疫组织化学结果进行评价：无阳性细胞为“-”,阳性细胞计数<25%为“+”,阳性细胞计数25%～50%为“++”,阳性细胞计数>50%为“+++”。“-”“+”判断为基因表达阴性，“++”“+++”判断为基因表达阳性。

1.5随访方法随访开始时间为乳腺癌根治术出院当日，随访截止时间为2013年5月。随访形式：门诊随访、电话随访、家庭访视。随访内容包括肿瘤复发情况、远处转移情况和存活情况。无瘤生存时间按首次发现原发病灶出现病理性质完全相同的肿瘤计算。

2结果

2.1乳腺癌组织中ER、PR、HER-2及BRCA-1的表达情况350例乳腺癌组织样本中，ER阳性203例、阳性率为58.0%；PR阳性191例、阳性率54.6%；HER-2阳性158例、阳性率45.1%；BRCA-1阳性188例、阳性率53.7%。

2.2远期预后情况的单因素分析ER、PR、BRCA-1阳性患者的无瘤生存时间、3年存活率、5年存活率均高于阴性患者(P<0.01)；HER-2阳性患者的无瘤生存时间、3年存活率、5年存活率均低于阴性患者，差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

2.33年生存率的多因素Logistic回归分析对3年生存情况进行Logistic回归分析，采用向后筛选法，ER、PR、HER-2、BRCA-1均纳入方程，ER、PR和BRCA-1是3年生存情况的危险因素(OR=1.875，2.421，3.293)，HER-2是3年生存情况的保护因素(OR=0.342)。见表2。

表1　乳腺癌根治术患者远期预后情况的单因素分析结果

ER：雌激素受体；PR：单激素受体；HER-2：人表皮生长因子受体2；BRCA-1:乳腺癌易患基因1

表2　乳腺癌根治术患者3年生存率的多因素Logistic回归分析

ER：雌激素受体；PR：单激素受体；HER-2：人表皮生长因子受体2；BRCA-1:乳腺癌易患基因1

2.45年生存率的多因素Logistic回归分析对5年生存情况进行Logistic回归分析，采用向后筛选法，ER、PR、HER-2、BRCA-1均纳入方程，ER、PR和BRCA-1是5年生存情况的危险因素(OR=1.875,2.421,3.293)，HER-2是5年生存情况的保护因素(OR=0.342)。见表3。

表3　乳腺癌根治术患者5年生存率的多因素Logistic回归分析

ER：雌激素受体；PR：单激素受体；HER-2：人表皮生长因子受体2；BRCA-1:乳腺癌易患基因1

3讨论

乳腺癌是女性最为常见的恶性肿瘤，其发生的分子机制复杂，包括雌孕激素、原癌基因、抑癌基因、细胞周期蛋白等都参与其中。乳腺癌的发生与ER、PR的过度激活密切相关，

雌孕激素的持续所用可刺激乳腺导管，增加癌变风险[2]。相关的病理学研究显示，乳腺癌患者的ER、PR的阳性率分别为60%～70%和50%～65%[3]。目前，ER和PR可以作为预测乳腺癌患者预后的重要因素，并且ER和PR可作为生物靶向治疗和综合化疗的靶点[4]。Itoh等[5]的研究认为，ER阳性和PR阳性乳腺癌患者的远期存活情况远优于阴性患者。本研究通过单因素分析也发现了一致的结果，ER、PR阳性患者的无瘤生存时间和远期存活率均高于阴性患者，远期预后情况更好。

HER-2是一类原癌基因，其基因序列与HER十分相似[6]。HER-2的表达产物是一种具有膜外位点的跨膜癌基因蛋白，其过表达一般仅存在于肿瘤细胞[7]。Slamon等[8]在1987年的研究首次发现，HER-2过度表达的乳腺癌患者的平均生存时间仅为3年，远低于HER-2阴性的乳腺癌患者。随后，国内很多学者的研究均发现了乳腺癌组织中HER-2的表达与患者远期预后的密切关系[9-11]。本研究单因素分析结果提示，HER-2阴性患者的预后更为理想，其无瘤生存时间和远期存活率均高于阳性患者。

BRCA-1是一类抑癌基因，具有正常生理功能的BRCA-1蛋白参与DNA损伤的修复，BRCA-1在正常乳腺细胞核内起重要的调控作用，参与细胞周期的调控，抑制细胞分裂，促进终末分化，诱导细胞凋亡，为一个重要的细胞周期负调控子[12]。BRCA-1突变则导致BRCA-1编码的蛋白质从细胞核内进入细胞质中，从而丧失与DNA结合的功能，导致上述细胞凋亡功能丧失，从而最终导致细胞恶变[13]。Huszno等[14]通过回顾性研究发现，BRCA-1是决定乳腺癌患者远期预后的独立危险因素，BRCA-1低表达可导致乳腺癌细胞过度增殖，增加乳腺癌根治术后复发和死亡的风险。本研究结果也显示，BRCA-1阳性患者的无瘤生存时间和远期存活率均高于阴性患者。

在以上单因素分析的基础上，本研究还通过Logistic回归的方法对ER、PR、HER-2、BRCA-1表达情况在乳腺癌患者远期预后中的影响作用进行了分析，结果显示，ER、PR和BRCA-1高表达是远期生存情况的危险因素，HER-2高表达是远期生存情况的保护因素。

综上所述，ER、PR、HER-2和BRCA-1的表达情况可作为判断乳腺癌患者预后情况的可靠指标，4项指标联合检测可对患者的病情进行全面判断，并针对性地制订综合治疗方案。

参考文献

[1]Omranipour R,Alipour S,Hadji M,etal.Accuracy of estrogen and progesterone receptor assessment in core needle biopsy specimens of breast cancer[J].Iran Red Crescent Med J,2013,15(6):515-518.

[2]汪海新，应明真，王梅.ER、PR、HER-2、P53在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及临床意义[J].医学研究杂志，2013，42(2)：27-31.

[3]张作文，刘胜春，吴凯南，等.雌孕激素受体状况对青年乳腺癌的远期预后价值[J].重庆医科大学学报，2013，38(1)：94-97.

[4]Zegarac M,Nikolic S,Gavrilovic D,etal.Prognostic factors for longer disease free survival and overall survival after surgical resection of isolated liver metastasis from breast cancer[J].J BUON,2013,18(4):859-865.

[5]Itoh M,Iwamoto T,Matsuoka J,etal.Estrogen receptor (ER) mRNA expression and molecular subtype distribution in ER-negative/progesterone receptor-positive breast cancers[J].Breast Can-cer Res Treat,2014,143(2):403-409.

[6]仇加高.乳腺浸润性导管癌中p53和表皮生长因子受体的表达及其意义[J].实用癌症杂志，2013，28(1)：31-33.

[7]廖志东，郑少秋，匡亚玲，等.HER-2、HIF-1α、GLUT-1及VEGF表达在乳腺浸润性导管癌淋巴结转移中作用[J].临床与实验病理学杂志，2012，28(1)：22-25.

[8]Slamon DJ，Clark GM，Wong SG，etal．Humanbreast cancer:correlation of relapse and survival with amplification of the HER-2/neu oncogene[J]．Science,1987,235(4785):177-182．

[9]杨黎，朱霞，冉立.HER-2、PCNA、Bcl-2、Bax在乳腺癌组织中的表达与预后的关系[J].癌症，2007，26(7)：756-761.

[10]Jeng KS,Sheen IS,Jeng WJ,etal.High expression of Sonic Hedgehog signaling pathway genes indicates a risk of recurrence of breast carcinoma[J].Onco Targets Ther,2013,27(7):79-86.

[11]Tripsianis G,Papadopoulou E,Romanidis K,etal.Overall survival and clinicopathological characteristics of patients with breast cancer in relation to the expression pattern of HER-2,IL-6,TNF-α and TGF-β1[J].Asian Pac J Cancer Prev,2013,14(11):6813-6820.

[12]Mihály Z,Györffy B.HER2-positive breast cancer:available targeted agents and biomarkers for therapy response[J].Magy Onkol,2013,57(3):147-156.

[13]Cortesi L,Razzaboni E,Toss A,etal.A rapid genetic counselling and testing in newly diagnosed breast cancer is associated with high rate of risk-reducing mastectomy in BRCA1/2-positive Italian women[J].Ann Oncol,2014,25(1):57-63.

[14]Huszno J,Budryk M,Koosza Z,etal.The influence of BRCA1/BRCA2 mutations on toxicity related to chemotherapy and radiotherapy in early breast cancer patients[J].Oncology,2013,85(5):278-282.

Expression of ER,PR,HER-2,BRCA-1 in Breast Cancer Tissues and Its Relation with Long-term Prognosis

YUANQing-hui，HEWei，WANGAn-qun，YANGYong-hong.

(DepartmentofPathology,MianyangCentralHospital,Mianyang621000,China)

Abstract:ObjectiveTo study the expression of estrogen receptor(ER),progesterone receptor(PR),human epidermal growth factor receptor 2(HER-2),breast cancer type 1 susceptibility gene(BRCA-1) in breast cancer tissues and its relation with long-term prognosis.MethodsA total of 350 patients with breast cancer who received radical operation in General Surgery Department of Mianyang Central Hospital from Jan.2004 to Sep.2008 were enrolled and the expression of ER,PR,HER-2,BRCA-1 were detected by immunohistochemistry.Then recurrence and survival condition were followed up.Results ①The positive rate of ER,PR,HER-1,BRCA-1 were respectively 58.0%,54.6%,45.1%,53.7%.②Tumor free survival time,three year survival rate,five years survival rate of ER,PR,BRCA-1 positive patients were higher than those of negative patients(P<0.01);tumor free survival time,three year survival rate,five years survival rate of HER-2 positive patients were lower than negative patients(P<0.01).③High expression of ER,PR,BRCA-1 were risk factors of long-term survival; high expression of HER-2 was protective factor of long-term survival.ConclusionExpression of ER,PR,HER-2 and BRCA-1 can be used as reliable index to judge the prognosis of patients with breast cancer,and the combined detection can provide comprehensive judgment on the condition of the patient to make targeted therapy.

Key words:Breast cancer; Estrogen receptor; Progesterone receptor; Human epidermal growth factor receptor; Breast cancer susceptibility gene

收稿日期：2014-02-17修回日期：2014-07-15编辑：伊姗

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.04.056

中图分类号：R737

文献标识码：A

文章编号：1006-2084(2015)04-0722-03