香薰中药消毒液对病房常见菌的抑制作用研究

梁玉玲 戴卫波 陆丹倩

香薰中药消毒液对病房常见菌的抑制作用研究

梁玉玲 戴卫波 陆丹倩

目的观察香薰中药消毒液对病房常见菌的抑制作用。方法用K-B纸片扩散法观察香薰中药消毒液对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、肺炎链球菌及肺炎克雷伯菌等病房常见菌的抑制作用。观察香薰中药消毒液对病房消毒后1 h和通风后1 h的消毒效果。结果香薰中药消毒液对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌有较好的抑制作用, 尤其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌最为敏感。用于病房消毒, 在消毒1 h后及通风1 h后仍保持较好的消毒效果, 杀菌率均达75%以上, 并且消毒效果与0.5%过氧乙酸相当。结论香薰中药消毒液对病房常见菌有较好的抑制作用, 并且气味芳香, 值得推广。

香薰中药消毒剂；病房；消毒

对病房空气消毒是净化病房空气、控制和减少医院感染的重要措施之一。目前, 常用的有过氧乙酸、过氧化氢、甲醛喷洒等化学消毒剂消毒法和紫外线照射消毒法, 只能在无人条件下使用, 且消毒后病房气味难闻且有刺激性。在我国东晋时期葛洪著《肘后备急方》中就有记载用艾燃烧灸患者病床四角防治瘟疫传染, 这是我国早期的应用中药进行空气消毒的记载[1,2]。本研究采用气味芳香中药组方, 提取总挥发油制成香薰消毒液, 观察对病房常见菌的抑制作用, 现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 薰衣草、苍术、桂枝等药材由中山市中医院中药房提供, 经中山市中医院曾聪彦主任中药师鉴定为正品。

1.2 菌株 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus )ATCC-25923、铜绿假单胞菌(Escherichia coli)ATCC27853、大肠杆菌(Escherichia coli)ATCC25922、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae) ATCC49619、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae) ATCC35659, 标准菌株均为卫生部(现卫计委)临床检验中心提供, 实验操作是在中山市中医院检验科微生物室中完成。

1.3 试剂与仪器 MH琼脂培养基(江门市凯林贸易有限公司)；空白药敏试纸(OXOID)；吐温-80(广州化学试剂厂)；LRH-250A生化培养箱(广东省医疗器械厂) ；XSW-CJ-2A标准型净化工作台(吴江市津化设备总厂)； LMQR-4060型立式灭菌器(山东新华医疗器械股份有限公司)； DL-ZD1浊度仪(珠海迪尔生物工程有限公司) ；WH-203超声雾化器 (广东粤华医疗器械厂有限公司)。

1.4 实验方法

1.4.1 香薰中药消毒液的制备 称取400 g药材, 混合打成粗粉, 叶类药材剪碎, 加入圆底烧瓶, 按固液比1:6加入蒸馏水, 冷浸2 h, 按水蒸气蒸馏法收集挥发油。用1%吐温-80无菌液稀释, 配成100%、75%、50%、25%浓度香薰中药消毒液。

1.4.2 菌悬液的配制 金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌5种试验标准菌经平板分离培养24 h后, 用无菌接种环挑取数个菌落置于生理盐水稀释液中, 用浊度仪校正浓度至0.5麦氏标准液。

1.4.3 香薰中药消毒液抑菌活性试验[3,4]用微量移液器吸取30 μl各浓度香薰中药消毒液均匀涂布于无菌空白药敏纸片, 两面各15 μl。纸片吸透药液后贴于菌平板上, 做好标记,置于37℃恒温培养箱中培养24 h。以平板中贴浸30 μl有1%吐温-80无菌水液的纸片为空白对照。用游标卡尺测量抑菌圈直径。每组实验重复2次, 实验结果取平均值。

判断标准：不敏感(≤6 mm, -), 低度敏感(≤7 mm, +),中度敏感(＞7 mm, ++), 高度敏感(≥15 mm, +++)。

抑菌率(%)=[(药液抑菌圈平均直径—空白纸片直径)/空白纸片直径]×100%。

1.4.4 病房消毒试验[4]选取本院格局相同的病房20间,用浓度1 g/ml香薰中药消毒液进行喷雾消毒, 雾化量为0.7 g/m3,以0.5%过氧乙酸对照, 雾化剂量为2 ml/m3, 各随机消毒10间, 消毒后关闭门窗60 min。采用自然菌沉降法监测每间病房消毒前30 min、消毒后1 h及通风后1 h空气中细菌数量。分别在病房四角近墙1 m处和中间位置各放置一平皿, 开盖30 min。37℃恒温培养箱培养48 h, 肉眼观察并计数菌落数和杀菌率[1]。

空气菌落总数＝50000 N/A T (cfu/ m3),

式中A为平皿面积(cm2), T 为平皿暴露时间(min), N 为平皿平均菌落数(cfu/平皿)。

杀菌率=(消毒前平均菌落数-消毒后平均菌落数)/消毒前平均菌落数。

1.5 统计学方法 通过SPSS18.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 香薰中药消毒液抑菌活性试验 实验结果显示香薰中药消毒液对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌有较好的抑制作用, 尤其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌最为敏感,25%的浓度下抑制率仍达100%以上。对粪肠球菌和肺炎链球菌没有抑制作用。见表1。见图1-6。

2.2 病房消毒试验 实验结果显示香薰中药消毒液与0.5%过氧乙酸对病房均具有良好的消毒效果(P＜0.01), 消毒后1 h和通风后1 h两者消毒效果均能保持, 两消毒剂消毒效果相当。见表2。

表1 香薰中药消毒液对供试菌的抑菌圈直径(±s, n=3)

表1 香薰中药消毒液对供试菌的抑菌圈直径(±s, n=3)

注：-表示没有抑制作用

抑菌圈(mm)金黄色葡萄球菌 23.84±1.97 281.44 20.41±1.42 226.56 18.36±1.27 193.76 14.82±0.64 137.12 - 图1大肠杆菌 20.70±0.29 231.20 18.43±1.33 194.88 16.38±0.29 162.08 13.96±0.65 123.36 - 图2粪肠球菌 - - - - - - - - - 图3铜绿假单胞菌 11.57±0.37 85.12 8.31±0.26 32.96 7.59±0.61 21.44 7.63±1.01 22.08 - 图4肺炎链球菌 - - - - - - - - - 图5肺炎克雷伯菌 17.43±0.38 178.88 14.23±0.62 127.68 13.89±0.66 122.24 9.65±0.20 54.40 - 图6菌种100%香薰消毒液 75%香薰消毒液 50%香薰消毒液 25%香薰消毒液 空白纸片抑菌圈(mm)抑菌率(%)抑菌圈(mm)抑菌率(%)抑菌圈(mm)抑菌率(%)抑菌圈(mm)抑菌率(%)

表2 不同消毒剂消毒效果的比较(±s, %, n=10)

表2 不同消毒剂消毒效果的比较(±s, %, n=10)

注：与同组消毒前比较,aP＜0.01

类别 菌落数/(cfu/m3) 杀菌率消毒前30 min 消毒后1 h 通风后1 h 消毒后1 h 通风后1 h香薰中药消毒液 658±74 142±21a 164±35a 78.42 75.08 0.5%过氧乙酸 664±83 131±15a 148±26a 80.27 77.71

图1 金黄色葡萄球菌

图2 大肠杆菌

图3 粪肠球菌

图4 铜绿假单胞菌

图5 肺炎链球菌

图6 肺炎克雷伯菌

3 小结

本香薰消毒液是由薰衣草、苍术、桂枝等挥发油按一定配比组成, 具有气味芳香, 又能镇静、放松心情的效果。本研究显示香薰中药消毒液对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌有较好的抑制作用, 尤其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌最为敏感。并用于病房消毒, 在消毒1 h后及通风1 h后仍保持较好的消毒效果, 杀菌率均达75%以上, 并且消毒效果与0.5%过氧乙酸相当。对本香薰消毒液进行急性吸入毒性实验研究, 发现小鼠在20600 mg/m3吸入剂量下未见异常[5], 按照标准属于实际无毒。本香薰消毒液制备工艺简单, 消毒效果良好, 并能避免传统化学消毒剂的刺激性, 其芳香气味还能对患者及家属心情有较好的缓解作用, 值得推广。

[1]戴卫波, 梅全喜.葛洪《肘后备急方》中艾叶治疗疾病的机理探讨.中国民间疗法,2014,22(7):5-8.

[2]戴卫波, 梅全喜, 金世明.论葛洪《肘后备急方》对熏洗疗法的贡献.时珍国医国药,2013,24(10):2478-2480.

[3]彭伟文, 王英晶, 陆丹倩, 等.黑面神茎、叶不同提取物抑菌作用对比研究.中国医院药学杂志,2014,34(11):869-872.

[4]唐裕芳, 张妙玲, 陶能国, 等.苍术挥发油的提取及其抑菌活性研究.西北植物学报,2008,28(3):588-594.

[5]梁玉玲.香薰中药消毒剂对病房消毒的实验研究.中国中医药现代远程教育,2015,13(1):138-140.

Research of inhibition effect by aroma Chinese herb disinfectant for common bacteria in ward

LIANG Yu-ling, DAI Wei-bo, LU Dan-qian. Guangdong Zhongshan City Hospital of Traditional Chinese Medicine, Zhongshan528401, China

ObjectiveTo observe inhibition effect by aroma Chinese herb disinfectant for common bacteria in ward.MethodsK-B disk diffusion method was applied to observe inhibition effect by aroma Chinese herb disinfectant for common bacteria in ward, such as staphylococcus aureus, pseudomonas aeruginosa, escherichia coli, streptococcus pneumonia, and klebsiella pneumonia. Disinfection effects of aroma Chinese herb disinfectant in1 h after ward disinfection and ventilation were observed.ResultsAroma Chinese herb disinfectant provided good inhibition effects for staphylococcus aureus, pseudomonas aeruginosa, escherichia coli, and klebsiella pneumonia, and it is especially sensitive to staphylococcus aureus and escherichia coli. It also can maintain good disinfection effect in1 h after ward disinfection and ventilation, with sterilizing rates all above75%. Its disinfection effect is similar to that of 0.5% peroxyacetic acid.ConclusionAroma Chinese herb disinfectant can provide good inhibition effect for common bacteria in ward, with fragrant smell. It is worth promoting.

Aroma Chinese herb disinfectant; Ward; Disinfection

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.15.192

2015-04-01]

广东省中山市卫生局医学科研立项(项目编号：J2012070)

528401 广东省中山市中医院