急性脑梗死血小板聚集及活化指标的变化及临床意义



急性脑梗死血小板聚集及活化指标的变化及临床意义

但刚,江忠勇,刘媛,胡莉娜,熊杰

[摘要]目的观察急性脑梗死(acute cerebral infarction,ACI)患者血小板聚集性及血小板活化指标P选择素、膜GPⅡb/Ⅲa的变化,探讨活化血小板在ACI发病中的作用。方法选取75例急性脑梗死患者作为ACI组,选取78例健康体检者作为正常对照组。利用血小板聚集测试仪、流式细胞仪,检测两组对象血小板聚集率及血小板表面表达的P选择素、膜GPⅡb/Ⅲa等活化指标含量。结果与正常对照组比较,ACI患者组的血小板聚集率明显升高(P<0.05),血小板表面表达的P选择素、膜GPⅡb/Ⅲa明显升高(P<0.05)。结论ACI患者血小板活化水平明显升高,聚集功能明显增强,患者处于高凝状态,是导致ACI发生的重要原因之一。

[关键词]脑梗死；血小板聚集；P选择素；GPⅡb/Ⅲa

急性脑梗死(acute cerebral infarction,ACI)主要是由于供应脑部血液的动脉出现粥样硬化和血栓形成,导致血流减慢,使血小板极易与粥样斑块发生黏附。一旦脑部小动脉循环出现缺血、缺氧,将会进一步引起脑组织的软化坏死,其中以ACI最为常见。据不完全统计,ACI发病率约50%~80%[1],致残率极高。

在ACI的病理生理过程中,血小板活化起着非常重要的作用,而高血压、糖尿病、肥胖、脂代谢异常、动脉粥样硬化等也是脑血管病的重要危险因素,与血小板活化关系密切[2]。本研究应用血小板聚集仪检测血小板聚集功能,流式细胞术检测血小板活化指标(血小板P-选择素和膜GPⅡb/Ⅲa复合物),研究这些指标在ACI患者体内的含量变化,并与正常对照组比较,探讨ACI患者血小板聚集及活化相关指标的变化及临床意义。

1对象与方法

1.1研究对象收集我院神经内科2012年8月~2014年4月收治的急性脑梗死的住院患者病例资料,共75例。纳入标准：ACI诊断均符合2002年中国脑血管病诊断与鉴别诊断防治指南的诊断标准[3]：通过CT或MRI证实为脑梗死,急性发病并在发病后36 h内入院治疗。排除标准：脑血管畸形、房颤、自身免疫性疾病及恶性肿瘤患者；近期服用过抗血小板药；近期有感染性疾病或外周血白细胞升高。75例中,男性42例,女33例,年龄37~88(65.8±12.1)岁。另选取同期来我院进行健康检查的正常人78例为对照组,排除脑血液病、高血压肝肾疾病、肿瘤等疾病患者,其中男41例,女37例,年龄30~79(66.8±19.2)岁。两组性别、年龄差异无统计学意义。

1.2标本采集患者入院后溶栓治疗前,抽取卧位外周静脉血,血小板聚集功能检测抽取静脉血2.7 ml,109 mmol/L枸橼酸钠抗凝；血小板P-选择素和膜GPⅡb/Ⅲa检测抽取静脉血各2 ml,EDTA-K2抗凝。对照组体检时采集标本,方法同上。

1.3检测指标

1.3.1血小板聚集功能检测采用美国Helena Laboratories公司生产的血小板聚集仪(型号：Agg RAM)进行检测,所有检测试剂均为该仪器配套试剂,诱导剂为腺苷二磷酸(ADP),ADP最终诱导浓度5 μmol/L。严格按照试剂操作步骤进行检测。

1.3.2血小板活化指标-P选择素、膜GPⅡb/Ⅲa检测选用美国Beckman Coulter公司生产的Epics XL流式细胞仪,试剂为单克隆抗体:CD62P PE为藻红蛋白标记的抗P选择素的McAb,PAC-1FIT C为异硫氰酸荧光素标记的抗GPⅡb/Ⅲa(即纤维蛋白原受体,Fib-R)McAb,均购自美国BD公司。严格按照试剂操作步骤进行检测。

2结果

与正常对照组比较,ACI组血小板聚集率明显升高(P<0.05),血小板P选择素和血小板膜GPⅡb/Ⅲa也明显升高(P<0.05)。见表1。

表1　两组血小板聚集率、P选择素和GPⅡb/Ⅲa表达变化的比较

注：与正常对照组比较,①P<0.05

3讨论

血小板聚集功能是血小板的重要生理特性,是指血小板与血小板之间的黏附及聚集。血小板相互作用聚集成团,是参与止血和血栓形成的重要过程[4]。血小板聚集后能够增强血栓的形成,而血栓又通过磷酸化进一步激活血小板,被激活的血小板强烈促进局部血栓的形成[5]。本组资料显示,ACI患者血小板聚集功能与正常对照组比较,明显增强(P<0.05),提示血小板聚集功能增强是ACI患者发病的重要因素之一。

通常情况下,P选择素表达水平较低,甚至会不表达[6]。P选择素在多个病理生理过程中都发挥着重要的作用,如血栓形成、动脉粥样硬化等。有研究表明,在血栓前状态存在血小板活化,P选择素可增高。P选择素水平增高,不仅反映血小板活化、内皮功能受损,而且也反映了活动性炎性反应,同时也是斑块不稳定的敏感指标[7]。本研究结果显示,脑梗死患者血小板P选择素和膜GPⅡb/Ⅲa也明显升高,表明它们与脑梗死的发生有内在联系。血小板P选择素和膜GPⅡb/Ⅲa复合物是血小板活化的重要指标,当血小板活化之后,就会导致血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa复合物产生变化,有利于GPⅡb/Ⅲa与纤维蛋白原之间更好地结合[8]。因此，通过检测GPⅡb/Ⅲa的表达量,可以更加精准、及时地发现血小板是否活化。

活化血小板表达的膜糖蛋白参与血小板的黏附,在促进血栓形成、脑梗死启动中起着重要作用[9]。本研究结果提示,血小板聚集功能和血小板P选择素和GPⅡb/Ⅲa复合物可作为血小板活化的敏感指标,在脑梗死的预防和诊断中占重要地位,可作为ACI辅助诊断及疗效判定的参考指标。

【参考文献】

[1]中华神经病学学会.各类脑血管疾病诊断要点[J].中华神经科杂志,1996,29(6):379-380.

[2]何来鹏,王欣.脑梗死急性期患者血小板膜GPⅡb/Ⅲa复合物和P-选择素的表达[J].广东医学院学报,2014,32(4):462-463.

[3]崔亮,钟远,燕虹,等.老年无症状多发性腔梗患者认知功能与血小板聚集率之间的关系[J].中国现代医学杂志,2011,21(8)：1052-1056.

[4]贺志安,张晨光,涂晓艳,等.急性脑梗死患者治疗前后血液流变学及血小板聚集性的变化[J].中国临床康复,2006,10(28):55-57.

[5]沈庆乐,李培英,张存琪,等.脑血管意外患者的选择素、组织因子、血液流变学的监测及意义[J].高血压杂志,2004,12(1):48-49.

[6]李天资,潘兴寿,蓝景生,等.老年高血压伴高尿酸血症患者血小板活化与纤溶功能的变化[J].第三军医大学学报,2010,32(22):2465-2467.

[7]梁智.P选择素在缺血性脑血管病患者中的变化及临床意义[J].中国社区医师,2014,30(21):122-123.

[8]Verdelho A,Madureira S,Moleiro C,et al.White matter changes and diabetes predict cognitive decline in the elderly:the Ladis study[J].Neurology,2010,75(2):160-167.

[9]Holmes Dr Jr.,Kereiakes Dj,Kleiman Ns,et al.Combining antiplatelet and anticoagulant therapies[J].J Am CollCardiol,2009,54(2):95-109.

Changes and clinical significance of platelet aggregation and activation markers in patients with acute cerebral infarction

Dan Gang,Jiang Zhongyong,Liu Yuan,Hu Lina,Xiong JieDepartment of Laboratory,Clinical Trial and Medical Research and Service Center,General Hospital of Chengdu Military Command,Chengdu,Sichuan,610083,China

[Abstract]ObjectiveTo observe the changes of platelet aggregation and platelet activation markers P selectin and membrane GPⅡb/Ⅲa in patients with acute cerebral infarction(ACI)and study the role of platelet activation in the pathogenesis of ACI.MethodsPatients with ACI were selected to constitute an ACI group(n=75)and healthy subjects were selected to constitute a control group(n=78).Aggregation tester and flow cytometry were used to check the platelet aggregation and contents of activation markers expressed on platelet surface,including P selectin and membrane GPⅡb/Ⅲa.ResultsCompared with the control group,the platelet aggregation of the patients in the ACI group increased significantly(P<0.05),and P selectin and membrane GPⅡb/Ⅲa expressed on platelet surface increased significantly(P<0.05).ConclusionIt is one of the important reasons to cause the incidence of ACI that the level of platelet activation in patients with ACI becomes significantly higher,the aggregation function is enhanced obviously,or the patients are in hypercoagulable state.

[Key words]cerebral infarction;platelet aggregation;P selectin;GPⅡb/ⅢA

(收稿日期:2014-10-29)

文章编号1004-0188(2015)02-0124-03

doi:10.3969/j.issn.1004-0188.2015.02.004

中图分类号R 743.32

文献标识码A

通讯作者:熊杰,E-mail：byx410@sina.com

基金项目:四川省卫计委科研课题(140007)；国家高技术研究发展计划(863计划)(2011AA02A111)
作者单位:610083 成都,成都军区总医院临床实验医学研究与保障中心检验科