3种肿瘤标记物联合血清MMP-7及胆汁MMP-7检测对胆管癌的临床意义

任清河　杨　凌

1　内蒙古边防总队医院普外科，内蒙古呼和浩特市　010010；　2　内蒙古医科大学附属医院临床医学研究中心



3种肿瘤标记物联合血清MMP-7及胆汁MMP-7检测对胆管癌的临床意义

任清河1杨凌2

1内蒙古边防总队医院普外科，内蒙古呼和浩特市010010；2内蒙古医科大学附属医院临床医学研究中心

胆管癌是一种起源于胆管上皮的恶性肿瘤，占所有胃肠道肿瘤的 3%，是第二常见的肝胆肿瘤。最近流行病学研究显示胆管癌的发病率和死亡率有逐年增加趋势[1,2]。其在临床上具有恶性程度高、发展缓慢、易于转移、早期诊断率低等特点，往往确诊时已错过最佳治疗时机，预后很差，患者平均存活时间很短，因此，早期诊断并积极进行有效的综合治疗是改善预后的关键问题[3]。相对于影像学手段而言，肿瘤标志物检测是诊断胆管癌的重要手段之一，尤其是血清肿瘤标志物联合检测具有操作简便、费用较低、特异性高等优点，对于胆管癌的术前诊断以及隐匿性病灶的检出大有裨益。为探讨多种肿瘤标志物在早期胆管癌诊断中的临床价值，本文采用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对 58例早期胆管癌患者血清肿瘤标志物糖类抗原(CA19-9)、糖类抗原CA125、癌胚抗原(Carcino embryonie antigen,CEA)、基质金属蛋白酶(Matrix metallo preteinases 7,MMP-7)和胆汁MMP-7水平进行了检测，现报告如下。

1资料与方法

1.1临床资料选取2012年3月—2013年5月内蒙古边防总队医院经手术和病理证实胆管癌的患者58例作为胆管癌组，所有患者均经病理学诊断确诊，其中，男32 例，女26例，平均年龄(55.19±3.76)岁；胆管癌类型包括肝内型25例，肝门周围型18例，下段胆管型15例。另选同期该院收治的胆道良性疾病患者60例作为良性对照组，其中，男27 例，女33例，平均年龄(53.14±4.13)岁。两组患者年龄、性别等一般临床资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2检测方法抽取患者空腹静脉血 3.0ml，室温下静置 3～4h，离心(3 000rpm/min)，10min后吸留取上清，存储于-80 ℃冰箱待测。在注射造影剂之前收集胆汁且所有胆汁都源于梗阻或狭窄段以上，离心(3 000rpm/min)，10min后吸留取上清，存储于-80℃冰箱待测。采用ELISA法检测血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7水平及胆汁MMP-7水平，具体操作步骤严格按照试剂说明书进行。血清中其他生化检查包括总胆红素、直接胆红素、谷草转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶。

2结果

2.1一般生化指标检测与良性对照组的一般生化指标比较，胆管癌组患者的总胆红素、直接胆红素、谷草转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶及碱性磷酸酶水平增高，差异有统计学意义(P<0.05)，而谷丙转氨酶水平差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2两组血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7水平及胆汁MMP-7水平比较两组人群血清中MMP-7水平检测的拟合曲线方程为y=0.016x2-0.238x+1.821，R2=0.996；胆汁中MMP-7水平检测的拟合曲线方程为y=0.013x2-0.241x+1.864，R2=0.998。与良性对照组相比较，胆管癌组患者血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7及胆汁MMP-7水平增高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

分组n总胆红素(mg/dl)直接胆红素(mg/dl)谷草转氨酶(U/L)γ-谷氨酰转肽酶(IU/L)碱性磷酸酶(IU/L)谷丙转氨酶(U/L)胆管癌组58212.34±20.31168.04±10.37107.21±15.32542.53±71.57512.34±61.2798.82±15.14良性对照组6040.56±10.1731.16±10.4665.45±16.81417.32±113.71218.19±45.43105.17±18.25t5.1796.9202.8152.1724.1210.371P0.0000.0000.0280.0310.0000.711

2.3两组血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7水平及胆汁MMP-7水平相关性分析对各项指标进行 Logistic 回归分析，结果显示，两组人群 CA19-9、CA125、血清 MMP-7 与胆管癌诊断呈现正相关(P<0.05)；而胆汁 MMP-7、血清CEA水平与胆管癌无相关性(P>0.05)。对两组人群的年龄、一般生化指标、血清 MMP-7 和胆汁 MMP-7 表达水平进行 Spearman 相关分析，结果表明血清 MMP-7及胆汁 MMP-7 表达水平与上述指标均无相关性(P>0.05)。

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3讨论

肿瘤标志物(Tumor marker)是指在患者血清、尿液或组织细胞中表达水平升高的与肿瘤相关的物质。同一种肿瘤标志物可表达不同的肿瘤，同一肿瘤也可存在多种肿瘤标志物阳性的情况，联合2种或2种以上的肿瘤标志物能明显提高肿瘤诊断的敏感性和特异性[4,5]。多项研究表明，血清中的肿瘤标记物CA19-9[6]、CA125[7]、CEA[8]、MMP-7[9]水平对胆管癌的诊断具有重要价值。

糖类抗原是目前临床上应用较为广泛的肿瘤标记物[10]。CA19-9是一种大分子糖蛋白，含有一定的黏液成分，结构包括唾液酸化的Ⅰ型乳糖系岩藻五糖，能够被包括肿瘤细胞在内的多种蛋白表达出来。CA19-9的水平变化与胆道癌的大小呈现一定的相关性，并能够随疾病的发展逐渐升高，且存在远处转移者CA19-9水平升高更明显[11,12]。已有研究表明，单独检测CA19-9并不能可靠的鉴别胆道良、恶性疾病，但血清CA19-9的测定可能是诊断胆管癌的有效肿瘤标志物。蔡珍华等研究结果表明，血清CA19-9在胆胰恶性肿瘤中可显著升高，在消化道良性疾患特别是良性肝病或者胆管梗阻性黄疸中也可有不同程度的增高[13]。而CA125的相对分子质量为2×106，是一种糖蛋白表面抗原广谱的肿瘤标志物。研究表明，其在胚胎发育过程中由体腔上皮细胞表达，出生后消失。同时，报道称血清CA125水平的增高与肿瘤负荷的增加有关[14]。国外学者Chen的研究表明， CA125的血清学水平变化较少受到炎症和胆道结石病的影响，并具有相对较高的特异性[15]。本研究结果显示，胆管癌组患者血清CA19-9水平较胆道良性疾病患者增高，与上述研究结果相符。

CEA 是一种分子量较小、仅为18 000的酸性糖蛋白，妊娠2 个月 CEA 存在于胎儿的消化道上皮组织、胰腺和肝脏中，胎儿出生后其浓度会显著下降。成人消化道产生少量 CEA，但成人肿瘤组织中可表达，并分泌到体液如血液、胆汁中。正常 CEA 主要进入肠道，少量进入血液和淋巴液，癌细胞分泌的 CEA 可进入患者的多种细胞外液[16,17]。CEA是目前应用最广泛的肿瘤标记物，在多种肿瘤中均呈升高趋势[18]。本研究结果显示，胆管癌组患者血清CA19-9水平、血清CEA水平较胆道良性疾病患者增高，与上述研究结果相符。

MMP-7 相对分子质量最小，为一种锌依赖肽链内切酶类，具有消化特定细胞外基质的作用，参与肿瘤周围浸润、远处转移和肿瘤新生血管的形成等过程[19]。尹文琤等报道血清 MMP-7 对区分胆管癌和胆管良性疾病有价值[20]。最近研究表明胆汁不仅参与肠内脂质的吸收，而且胆汁酸是一种重要的信号分子参与机体新陈代谢，并且具有细胞保护和抗癌作用。胆汁作为胆管上皮细胞的微环境，必然受胆管上皮细胞的影响，现已经发现的与胆管癌有关的胆汁中蛋白有黏蛋白、IGF1 等[21]。本研究中，与胆道良性疾病组患者相比，胆管癌组患者的血清MMP-7水平及胆汁MMP-7水平增高，与上述研究结果相符。此外，本研究的Logistic 回归分析结果显示，两组人群 CA19-9、CA125、血清 MMP-7 与胆管癌诊断呈现正相关，而胆汁 MMP-7、血清CEA水平无相关性，血清 MMP-7及胆汁 MMP-7 表达水平与一般生化指标均无相关性。究其原因可能为研究所涉及样本量偏少所致，后续将进一步扩大样本量展开研究。

参考文献

[1]张水军,翟文龙.胆管癌实验研究现状与展望〔J〕.中华实验外科杂志,2014,31(11):2369-2370.

[2]包万员,佘刚,朱峰，等.胆道系统肿瘤的化疗现状与进展〔J〕.中华肝胆外科杂志,2014,20(10):758-761.

[3]刘玲,顾殿华,张建淮，等.肝外胆管癌的手术治疗效果分析〔J〕.肝胆外科杂志,2014,22(5):336-337,341.

[4]王传新.肿瘤标志物的临床应用与研究进展〔J〕.中华检验医学杂志,2014,(9):641-644.

[5]张海英.血清肿瘤标志物联合检测在常见恶性肿瘤筛查中的应用价值〔J〕.中国实验诊断学,2014,18(8):1352-1354.

[6]Cai WK,Lin JJ,He GH,etal. Preoperative serum CA19-9 levels is an independent prognostic factor in patients with resected hilar cholangiocarcinoma 〔J〕. Int J Clin Exp Pathol,2014,7(11):7890-7898.

[7]马洪波,黄涛,韩风，等.3种肿瘤标志物联合检测对胆管癌诊断的临床意义〔J〕.重庆医学,2012,41(25):2603-2604.

[8]Ince AT,Ylldlz K,Baysal B,etal. Roles of serum and biliary CEA,CA19-9,VEGFR3,and TAC in differentiating between malignant and benign biliary obstructions 〔J〕. Turk J Gastroenterol,2014,25(2):162-169.

[9]Lumachi F,Lo Re G,Tozzoli R,etal. Measurement of serum carcinoembryonic antigen,carbohydrate antigen 19-9,cytokeratin-19 fragment and matrix metalloproteinase-7 for detecting cholangiocarcinoma: a preliminary case-control study 〔J〕. Anticancer Res,2014,34(11):6663-6667.

[10]高锋.糖类抗原及其相关分子在肿瘤诊断中的研究进展〔J〕.检验医学,2014,29(9):873-876.

[11]Kondo N,Murakami Y,Uemura K,etal. Elevated perioperative serum CA 19-9 levels are independent predictors of poor survival in patients with resectable cholangiocarcinoma 〔J〕. J Surg Oncol,2014,110(4):422-429.

[12]卢慧英,贾素英.肿瘤标志物对原发性肝癌及胆管癌的诊断价值分析〔J〕.癌症进展,2014,12(6):602-605.

[13]蔡珍华,吴婷.血清CA19-9对肝胆胰疾病的临床诊断价值〔J〕.胃肠病学和肝病学杂志,2013,22(11):1155-1158.

[14]熊会玲,吴杰,范彦，等.肿瘤标志物CA19-9、CEA和CA125联合检测对胆管癌诊断价值的评估〔J〕.实用医学杂志,2013,29(24):4006-4009.

[15]Chen CY,Shiesh SC,Tsao HC,etal. The assessment of biliary CA125,CA19-9 and CEA in diagnosing cholangio-carcinoma the influence of sampling time and hepatolithiasis 〔J〕. Hepatogastroenterology,2002,49(45):516-620.

[16]杨长成,王文涓,高锋，等.癌胚抗原相关黏附分子1与肿瘤〔J〕.检验医学,2014,29(9):877-883.

[17]赵建军,阎涛,毕新宇，等.血清癌胚抗原水平与肝细胞肝癌预后的相关性分析〔J〕.中华肿瘤杂志,2014,36(6):430-434.

[18]董振南,董静肖,田亚平，等.癌胚抗原升高在良恶性疾病中的辅助诊断价值〔J〕.标记免疫分析与临床,2011,18(1):1-4.

[19]张平峰,蔡军,吴安涛，等.MMP-7在肿瘤中的研究进展〔J〕.实用临床医学,2014,15(2):131-133.

[20]尹文琤,李鸿雁,马力文，等.E-cadherin、β-catenin和MMP-7在胆管癌中的表达及意义〔J〕.癌症进展,2012,10(6):620.

[21]王坚,戴佳奇,张超峰，等.胆汁酸对胆管癌细胞株QBC939中IL-6表达与细胞活力的影响〔J〕.中华外科杂志,2010,48(12):919-923.

(本文通讯作者：杨凌)

(编辑雅文)

摘要目的：探讨胆管癌患者血清中糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)、基质金属蛋白酶(MMP-7)和胆汁MMP-7水平的变化及其临床意义。方法：选取2012年3月—2013年5月，内蒙古边防总队医院经手术和病理证实胆管癌的患者58例作为胆管癌组，另选同期该院收治的胆道良性疾病患者60例作为良性对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测研究人群的血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7及胆汁MMP-7水平变化情况，并进行各指标间的相关性分析。结果：与良性对照组患者相比，胆管癌组患者的总胆红素、直接胆红素、谷草转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶水平增高，差异有统计学意义(P<0.05)，而谷丙转氨酶水平差异无统计学意义(P>0.05)；胆管癌组患者血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7及胆汁MMP-7水平较良性对照组增高，差异有统计学意义(P<0.05)；Logistic 回归分析，结果显示，两组人群 CA19-9、CA125、血清 MMP-7 与胆管癌诊断呈现正相关(P<0.05)；而胆汁 MMP-7与血清CEA水平无相关性(P>0.05)；血清 MMP-7及胆汁 MMP-7 表达水平与上述生化指标均无相关性(P>0.05)。结论：联合检测血清CA19-9、CA125、CEA、MMP-7及胆汁MMP-7水平能提高胆管癌诊断的效能，有较高的临床参考价值。

关键词胆管癌CA19-9CA125CEAMMP-7 R735.8

文献标识码：A

文章编号：1001-7585(2015)15-1980-03

Clinical Significance of Combined Detection of Serum CA19-9,CA125,CEA,MMP-7 and Bile MMP-7 in Patients with Cholangiocarcinoma

REN Qinghe*,YANG Ling.*TheGeneralSurgeryDepartmentoftheArmedPoliceBorderDefenseCorpsHospitalofInnerMongol,InnerMongolhohhot010010

ABSTRACTObjective：To evaluate the clinical significance of combined detection of serum CA19-9,CA125,CEA,MMP-7 and bile MMP-7 in patients with cholangiocarcinoma. Methods:The serum level of CA19-9,CA125,CEA,MMP-7 and bile level of MMP-7 in 58 patients with cholangiocarcinoma (experimental group)and 60 patients with bile duct benign disease(control group) were detected by enzyme linked immunosorbent assay and correlation analysis in the general surgery department of the armed police Border Defense Corps Hospital of Inner Mongol from March 2012 to May 2013. Results:Compared to control group,the levels of total bilirubin,direct bilirubin,glutamic oxalacetic transaminase,γ-glutamyl transpeptidase,alkaline phosphatase increased and there was statistically significant difference (P<0.05). However,there was no statistically significant difference (P>0.05) of the level of glutamic-pyruvic transaminase between the two group. Then the levels of CA19-9,CA125,CEA,MMP-7 and bile MMP-7 in patients with cholangiocarcinoma higher than patients with bile duct benign disease and there was statistically significant difference (P<0.05). The logistic regression analysis showed that the levels of serum CA19-9,CA125 and MMP-7 of the two groups positively related with bile duct carcinoma diagnosis (P<0.05),but bile MMP-7 level has no related with serum CEA level (P>0.05). The level of MMP-7 of serum and bile have no related with biochemical criterion (P>0.05). Conclusion:The combined detection of serum CA19-9,CA125,CEA,MMP-7 and bile MMP-7 were helpful to the efficiency of cholangiocarcinoma diagnosis and have the higher clinical reference value.

KEY WORDSCholangiocarcinoma,CA19-9,CA125,CEA,MMP-7

收稿日期2015-04-20