2型糖尿病肾病不同时期尿Ⅳ型胶原含量的变化及临床意义*

刘艾芹，金立民，张德鱼，刘国平

(内蒙古自治区人民医院肾内科，内蒙古 呼和浩特 010050)

糖尿病肾病(Diabetic nephropathy，DN)是糖尿病常见一种严重并发症，是导致终末期肾病的重要原因之一［1］。因此，DN的早诊断、早治疗对于逆转损伤的肾功能具有重要意义［2］。研究显示DN病理改变主要表现为细胞外基质增多，造成肾小球硬化，进而引起DN发生［3］。Ⅳ型胶原是一种重要细胞外基质，可在肾组织内积聚导致肾小球硬化［4］。有研究认为Ⅳ型胶原水平的升高可反映肾损害的严重程度［5］。因此，对Ⅳ型胶原与DN关系的研究有可能为DN的早期诊治提供新的思路。本文通过检测和比较2型DN患者不同时期尿Ⅳ型胶原含量的变化，探讨两者间的关系，以期为DN的早期诊断指标的选择提供参考，现报告如下:

1 资料与方法

1.1 一般资料:选取2011年2月至2014年2月我院收治的2型糖尿病患者145例，其中男性83例、女性62例，年龄42－71岁，中位年龄(60.53±9.47)岁。所有患者均符合WHO关于2型糖尿病诊断标准;排除标准:感染、肿瘤、痛风、DM酮症、低血糖昏迷者;有原发性肝、肾疾病;有内分泌、脑血管纤维化、结缔组织及血液系统病史者。根据UAER分为正常白蛋白尿组(U1组，44例)、微量白蛋白尿组(U2组，45例)和临床白蛋白尿组(DN组，46例)。另选择同期健康体检者，设为正常对照组(N组，45例)，其中男性26例、女性19例，年龄41－70岁，中位年龄(60.47±9.33)岁。所有受试者或家属均对本试验签署知情同意书。

1.2 研究方法:所有受检者禁食8－10h后，于清晨取静脉血，采用日立7010生化分析仪，分别测定血肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN);留24h尿液，记录总尿量，加入用甲苯混匀后，取20mL置于－20℃冰箱保存。采用竞争性放射免疫法测定UAER、尿α1微球蛋白(α1－MG)和尿β2微球蛋白(β2－MG)水平，试剂盒由中国原子能科学研究院提供。Ⅳ－C采用一步夹心固相酶免疫法测定，具体方法某某文献。比较各组尿Ⅳ－C水平变化，分析其与UAER、血肌酐及尿素氮等指标的相关性。

1.3 统计学方法:采用SPSS17.0进行统计学处理，计量资料采用均数士标准差(±s)表示，采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，两组间两两比较差用q检验，计数资料采用χ2检验，相关性采用直线相关分析，采用Person检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组间一般临床资料和生化指标比较:各组间例数和年龄等一般资料差异无统计学意义(P＞0.05);DN组各项生化指标均显著高于正常组、微量组和对照组(P＜0.05);U2组α1－MG、β2－MG和 UAER 显著高于U1组和对照组(P＜0.05)，而BUN仅显著高于对照组(P＜0.05)，与 U1组无显著差异(P＞0.05);U1组BUN、α1－MG和UAER显著高于对照组(P＜0.05)，而Cr和β2－MG与对照组无显著差异(P＞0.05)。见表1。

表1 各组间一般资料与实验室资料比较

2.2 各组间尿Ⅳ型胶原含量比较:DN组、U1组、U2组和对照组Ⅳ－C水平分别为(288.31±92.45)μg/24h、(135.72±44.83)μg/24h、(81.59±23.61)μg/24h 和(69.87±13.43)μg/24h。DN 组显著高于U1组、U 两组和对照组(P＜0.05)，U2组显著高于U1组和对照组(P＜0.05)，U1 组显著高于对照组(P＜0.05)。

2.3 Ⅳ－C与DN主要检测生化指标相关性Ⅳ－C与Cr、α1－MG、β2－MG、BUN 和UAER 的相关系数分别达到 r=0.32、r=0.55、r=0.48、r=0.51 和 r=0.61。除与Cr相关系数未达到显著外，其余相关系数均达到显著水平(P＜0.05)。

3 讨论

糖尿病肾病(DN)是糖尿病患者严重的慢性微血管并发症，严重危及患者生命［6］。有研究显示，传统的DN早期诊断多以Cr、BUN、UAER及尿微球蛋白检查为主，然而这些生物标志物检查均存在着一定的不足，如:Cr、BUN水平易受饮食、民族、年龄等较多因素的影响［7］，作为DN患者肾功能损伤的诊断指标特异性较差，且其在机体中的蓄积程度只与肾小球滤过率有关，不能准确地反映肾小管损伤及坏死情况［8］。此外，血UAER和尿微球蛋白，只有在肾功能损伤后才能被检测出变化，而在微量蛋白蛋尿进一步发展之后，DN已经进入不可逆的进展期［9］。

DN基本病理改变为肾小球系膜细胞增殖、肾小球基底膜增厚、细胞外基质增多和肾小球硬化［10］。Ⅳ型胶原(Ⅳ－C)是肾脏基底膜致密层的主要成分，以非纤维网状的胶原蛋白形式存在，其主要功能之一是起支持作用［11］。有学者通过测定尿Ⅳ－C浓度，发现在糖尿病微血管病变早期，Ⅳ－C水平即出现升高，随着微血管病变加重，Ⅳ－C亦随之增高［12］。此外，还有研究发现在高糖环境中培养的系膜细胞Ⅳ－C合成及其mRNA水平增加，其机制可能由于胶原蛋白糖化使肾小球基底膜胶原合成增加，而且培养的系膜细胞使肾小球基底膜胶原合成增加，培养的系膜细胞原的分解可能减少，结果导致肾小球基底膜增厚，最终导致DN的发生［13］。田小平等［14］研究认为2型糖尿病肾病患者Ⅳ－C＞18.96ng/mL应高度怀疑早期DN的可能性。韦玉和等［15］研究认为Ⅳ型胶原可作为DN早期诊断的参考指标之一，在正常白蛋白尿期可能有前瞻性的应用价值。

本研究发现DN组Ⅳ－C水平显著高于其它组，且Ⅳ－C水平随着UAER的升高而升高，这说明DN患者和正常人群间Ⅳ－C水平存在差异。UAER是目前DN诊断的主要指标，其水平高低能预示DN的进展;α1－MG、β2－MG反映DM肾小管损害的敏感指标，提示DM、DN患者存在Ⅳ型胶原代谢异常。进一步对Ⅳ－C水平与DN临床早期诊断常用指标α1－MG、β2－MG、BUN和UAER间相关系数分析发现，与四者间的相关系数均达到显著水平，这说明2型DM患者Ⅳ－C在微量蛋白尿出现时就明显升高，提示血清Ⅳ－C与尿微量白蛋白一样可以作为肾功能损伤和早期DN标志。

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