藏药螃蟹甲化学成分研究(Ⅱ)

刘 敬，谢朝良，王 琼，赵 斌,3

(1.中山火炬职业技术学院 生物医药系，广东 中山 528436；2.中山市中医院，广东 中山 528436；3.国家中药现代化工程技术研究中心 中山健康产品分中心，广东 中山 528436)



藏药螃蟹甲化学成分研究(Ⅱ)

刘 敬1,2，谢朝良1，王 琼1，赵 斌1,3

(1.中山火炬职业技术学院 生物医药系，广东 中山 528436；2.中山市中医院，广东 中山 528436；3.国家中药现代化工程技术研究中心 中山健康产品分中心，广东 中山 528436)

目的：研究藏药螃蟹甲的化学成分。方法：采用多种柱层析方法对螃蟹甲浸膏进行分离纯化，根据波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。结果：从螃蟹甲乙酸乙酯提取部位分离鉴定出4个化合物，分别为Phlomisoside Ⅲ (Ⅰ)、β-胡萝卜苷(Ⅱ)、山柰素(Ⅲ)、熊果酸(Ⅳ)。结论：化合物Ⅲ和Ⅳ为首次从该植物中分离得到，为螃蟹甲药理作用的研究奠定了基础。

藏药；螃蟹甲；化学成分

螃蟹甲药材收载于卫生部药品标准藏药第一册(1995版)，为唇形科糙苏属植物螃蟹甲PhlomisyounghusbandiiMukerjee的干燥块根，主产于青海、西藏等省，藏医又称之为“露木尔”。该药具有疏风清热、散寒润喉、止咳化痰等功效，临床上常用于治疗咳嗽痰多、支气管炎等疾病[1]。笔者对螃蟹甲具有止咳平喘抗炎作用的乙酸乙酯提取部位进行了系统研究，共分离鉴定得到4个化合物，分别为Phlomisoside Ⅲ(Ⅰ)、β-胡萝卜苷(Ⅱ)、山柰素(Ⅲ)、熊果酸(Ⅳ)，其中化合物Ⅲ和Ⅳ为首次从该植物中分离得到，现报道如下。

1 仪器、试剂与药材

SGW X-4型显微熔点测定仪(南京科捷)；Nicolet is 10 型傅里叶变换红外光谱仪(美国Thermo Nicolet 公司)；Bruker BioTOF-Q型质谱仪(德国Bruker公司)；Bruker Avance 600 核磁共振仪(德国Bruker公司)。

柱层析用硅胶(200～300目)、薄层层析用硅胶GF254、薄层层析用硅胶H(青岛海洋化工厂)；RP-18反相硅胶(德国Merck)；Sephadex LH-20(日本Amersham Biosciences)。

螃蟹甲药材采自西藏昌都地区，经中山火炬职业技术学院谢朝良教授鉴定为唇形科植物螃蟹甲PhlomisyounghusbandiiMukerjee的干燥块根，标本存于中山火炬职业技术学院生物医药系。

2 提取与分离

称取螃蟹约10kg，粗粉碎后，采用乙醇回流提取并浓缩成浸膏，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，减压回收溶剂后得到乙酸乙酯部分136g。乙酸乙酯部位经重结晶后得化合物Ⅱ(1.2g)，再经反复硅胶柱层析、RP-18反相柱色谱和Sephadex LH-20柱分离得到化合物Ⅰ(41mg)、化合物Ⅲ(31mg)和化合物Ⅳ(29mg)。

3 结构鉴定

3.1 化合物Ⅰ

白色粉末，易溶于三氯甲烷、甲醇，mp132～134℃。分子式为C31H46O12；ESI-MS提示 m/z：633[M+Na]+，不饱合度为9；IR(cm-1)：3406,2931,1737,1602,1500,1078, 1024；1H-NMR(600MHz,CD3OD)δppm：6.26 (1H,br s,14-H), 7.35 (1H,br s,15-H), 7.23 (1H,brs, 16-H)， 1.65 (3H,s,17-CH3), 1.24 (3H,s,18-CH3), 0.89 (3H,s,20-CH3), 5.45 (1H,d,J =8.0Hz,1′-H), 5.67(1H,d, J=7.6 Hz, 1″-H)。13C-NMR(150MHz,CD3OD)δppm：36.4(C-1)，19.1(C-2)，37.8(C-3)，44.0(C-4)，52.6(C-5)，22.6(C-6)，35.2(C-7)，128.6(C-8)，138.9(C-9)，41.4(C-10)，30.1(C-11)，25.5(C-12)，125.4(C-13)，110.7(C-14)，143.3(C-15)，138.6(C-16)，19.4(C-17)，28.6(C-18)，175.8(C-19)，19.0(C-20)，94.0(C-1′)，80.5(C-2′)，78.3(C-3′)，69.4(C-4′)，78.9(C-5′)，61.6(C-6′), 104.7(C-1″)，77.2(C-2″)，78.3(C-3″)，70.6(C-4″)，67.9(C-5″)。上述波谱数据与文献[2-3]报道基本一致，故确定为phlomisoside Ⅲ。

3.2 化合物Ⅱ

白色颗粒，易溶于氯仿、甲醇，mp289～290℃。Liebermann- Burchard反应呈阳性；薄层色谱中其Rf值与β-胡萝卜苷标准品基本一致，与其混合后熔点不下降，故确定为β-胡萝卜苷(β-daucosterol)。

3.3 化合物Ⅲ

黄色固体粉末，HCl-Mg反应呈阳性，分子式为C15H10O6。ESI-MS(m/z): 309[M+Na]+。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ：12.45(1H,s,5-OH)，10.73(1H,s,2-OH)，10.06(1H,s,7-OH)，9.33(1H,s,3′-OH),8.03(2H,d,J=8.9Hz,H-2′,6′), 6.92(2H,d, J =8.9Hz,H-3′,5′),6.40(1H,d,J =2.0Hz,H-8), 6.18 (1H,d,J=2.0Hz,H-6)。13C-NMR(150MHz, DMSOd6) δ：176.3(C-4)，164.5(C-7)， 161.3(C- 5)，159.8(C-4′)，156.6 (C-9)，147.2(C-2)，136.1(C-3)，130.0(2C,C-2′, 6′)，122.1(C-1′)，115.9(2C,C-3′, 5′)，103.4(C-10)，98.7(C-6)，93.9(C-8)。该化合物的理化性质及波谱数据与文献[4]报道基本一致，故确定为山柰素(kaempferol)。

3.4 化合物Ⅳ

白色粉末，mp279～282℃。1H-NMR(600MHz，CDCl3)δ：0.85(3H，d，J=6.4Hz，H-29)，0.94(3H,d,J=6.2Hz,H-30)，0.77(3H,s,H-24)，0.80(3H,s,H-25)，0.93(3H,s,H-27)，0.99(3H,s,H-23)，1.07 (3H,s,H-26)，5.25(1H,t,H-12)；13C-NMR(150MHz,CDCl3)：179.6(C-28)，138.9(C-13)，125.4(C-12)，78.8(C-3)，55.0(C-18)，52.8(C-5)，47.9(C-17)，47.3(C-9)，42.0(C-14)，39.2(C-8)，39.1(C-19)，38.7(C-4)，38.5(C-1)，36.9(C-22)，36.8(C-10)，32.8(C-7)，30.5(C-21)，28.0(C-23)，27.9(C-15)，26.7(C-2)，24.2(C-16)，23.3(C-11)，23.1(C-27)，21.0(C-30)，18.1(C-6)，17.0(C-26)，16.8(C-29)，15.4(C-24)，15.2(C-25)。该化合物上述数据与文献[5]报道的数据基本一致，故确定为熊果酸(ursolic acid)。

4 结论

本研究采用多种柱层析方法结合波谱数据和理化性质鉴定从螃蟹甲乙酸乙酯部位分离鉴定出4个化合物，分别为Phlomisoside Ⅲ (Ⅰ)、β-胡萝卜苷(Ⅱ)、山柰素(Ⅲ)、熊果酸(Ⅳ)，其中化合物Ⅲ和Ⅳ为首次从该植物中分离得到，为螃蟹甲药理作用的研究奠定基础。

[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准·藏药分册[S].1995:126.

[2] KATAGIRI M, OHTANI K, KASAI R,et al. Diterpenoid glycosyl esters from Phlomi younghusbandii and P.medicinalis roots[J]. Phytochemistry,1994,35(2):439-442.

[3] 余振喜,王钢力,边巴次仁,等.萝卜秦艽化学成分的研究Ⅰ[J].中国中药杂志,2006,31(8): 656-658.

[4] 陈改敏,张建业,张向沛,等.马鞭草黄酮类化学成分的研究[J].中药材,2006,29(7):677-678.

[5] 陈德昌.中药化学对照品工作手册[M].北京:中国医药科技出版社, 2000:168.

(责任编辑：尹晨茹)

2015-03-09

刘敬(1980-)，女，博士，中山火炬职业技术学院讲师，研究方向为中药药效及作用机理。

R284.1

A

1673-2197(2015)14-0015-01

10.11954/ytctyy.201514006