米邦塔仙人掌果胶对慢性不可预知温和应激小鼠绝望症状的改善作用

肖同楚，黄朝明，杨兴娥，湛进进，郭莲军

(1. 湖北省宜昌市夷陵区妇幼保健院，湖北 宜昌 443100；2. 华中科技大学同济医学院，湖北 武汉 430030)

米邦塔仙人掌果胶对慢性不可预知温和应激小鼠绝望症状的改善作用

肖同楚1，黄朝明1，杨兴娥1，湛进进2，郭莲军2

(1. 湖北省宜昌市夷陵区妇幼保健院，湖北 宜昌 443100；2. 华中科技大学同济医学院，湖北 武汉 430030)

目的 研究米邦塔仙人掌果胶(MCP)对慢性不可预知温和应激(CUMS)小鼠绝望症状的改善作用。方法 雄性昆明种小鼠随机分为空白对照组、模型组、MCP低剂量组(50 mg/kg)、MCP中剂量组(100 mg/kg)、MCP高剂量组(200 mg/kg)。除空白对照组不进行任何应激处理外，其余组均进行CUMS，各MCP组均在进行CUMS期间每天灌胃相应剂量MCP。造模结束24 h后进行悬尾实验，48 h后进行强迫游泳实验。结果 模型组悬尾实验潜伏期显著短于空白对照组(P<0.01)，累计不动时间显著长于空白对照组(P<0.01)；MCP高剂量组潜伏期显著长于模型组(P<0.05)，MCP中、高剂量组累计不动时间显著短于模型组(P均<0.01)。模型组强迫游泳实验潜伏期显著短于空白对照组(P<0.01)，累计不动时间显著长于空白对照组(P<0.01)；MCP各给药组潜伏期与空白对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)，而MCP高剂量组累计不动时间显著短于模型组 (P<0.05)。结论 MCP能较好地缓解CMS小鼠的行为绝望症状。

米邦塔仙人掌果胶；慢性不可预知温和应激； 绝望症状；小鼠

抑郁症是一种以持久的心境低落为主要特征的精神疾病，目前全世界约有4 亿人受其影响，且发病率逐年增加[1]。慢性应激诱导的氧化应激损伤介导抑郁症是抑郁症的发病机制之一，慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)模型能很好地模拟人类抑郁症中慢性、低水平应激源促进疾病发生，加速疾病发展的机制[1]。研究显示植物果胶有较好的抗氧化、抗炎、抗溃疡、抗癌和调节免疫的作用[2-3]。米邦塔仙人掌富含果胶成分，然而关于米邦塔仙人掌果胶(milpa alta cactus pectin，MCP)在神经和精神系统疾病特别是抑郁症方面的作用尚少见报道。本实验采用小鼠悬尾实验和强迫游泳实验探讨了MCP对小鼠CUMS模型抑郁样绝望症状是否有改善作用，现将结果报道如下。

1 实验资料

1.1药品与试剂 MCP(棕色粉末)由华中科技大学同济医学院药理学系提取，用双蒸水溶解配置成低(5 mg/mL)、中(10 mg/mL)、高(20 mg/mL)3种浓度，调节pH值至中性。

1.2 实验动物与分组 清洁级健康雄性昆明种小鼠50只，体质量15～20 g，由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供，许可证号：SCXK(鄂) 2008-0007，合格证号：00020736；饲养条件：12 h昼夜交替，室温(24±2)℃，空气湿度(50±10)%，除造模及必要的断水断食外，小鼠均可自由进水进食。将50只小鼠随机分为空白对照组、模型组、MCP低剂量组(50 mg/kg)、MCP中剂量组(100 mg/kg)、MCP高剂量组(200 mg/kg)，每组10只。

1.3 模型制备及干预方法 空白对照组不进行任何应激处理，正常条件饲养；其余组给予CUMS造模，造模过程包括断水16 h、断食16 h、45°倾斜鼠笼4 h、潮湿垫料24 h、通宵照明、2 h/2 h昼夜交替、昼夜颠倒、陌生气味4 h、4 ℃冷水游泳、陌生气味4 h、活动限制2 h共11种应激因子。每天随机给予(让动物不可预知)以上2种刺激因子，同一种应激因子间隔时间至少48 h，持续6周。各MCP组均在进行应激处理期间每天9:00—10:00灌胃相应剂量MCP，灌胃体积为0.1 mL/10 g，模型组给予同等体积的双蒸水。

1.4 悬尾实验 CUMS造模结束24 h后进行小鼠悬尾实验。在离小鼠尾部尖端约1 cm处，用胶带将其倒置悬挂于空中，使其头部离实验平台约5 cm，检测小鼠在5 min内的潜伏期(从挣扎到第一次完全静止不动的时间，不动指小鼠没有任何的肢体和身体运动)和累计不动时间。采用双盲测试法检测。

1.5 强迫游泳实验 悬尾实验完成24 h后，进行小鼠强迫游泳实验。主要设备为一个高20 cm、直径为15 cm的圆柱形透明容器。向容器内加入温度为(24±2)℃，深15 cm的自来水。放入小鼠，实验者以秒表计时，记录其在5 min内的潜伏期(从挣扎到第一次完全静止不动的时间，不动指小鼠在水中停止挣扎，呈漂浮状态，或仅有微小的肢体运动，以保证其头部浮于水面上)和累计不动时间。采用双盲测试法检测。

2 结 果

2.1悬尾实验 模型组潜伏期明显短于空白对照组(P<0.01)；MCP高剂量组潜伏期明显高于模型组(P<0.05)；MCP低、中剂量组潜伏期与模型组比较差异无统计学意义(P均>0.05)。模型组累计不动时间显著高于空白对照组(P<0.01)；MCP中、高剂量组累计不动时间明显短于模型组(P均<0.01)，MCP低剂量组与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 悬尾实验中各组潜伏期与累计不动时间比较

注：①与空白对照组比较，P<0.01；②与模型组比较,P<0.05;③与模型组比较,P<0.01。

2.2 强迫游泳实验 模型组潜伏期明显短于空白对照组(P<0.01)； 而MCP低剂量组和MCP中剂量组潜伏期明显低于模型组(P<0.01和P<0.05)。模型组累计不动时间显著高于空白对照组(P<0.01)；MCP高剂量组累计不动时间明显短于模型组(P<0.05)，MCP低剂量组累计不动时间显著高于模型组(P<0.01)。见表2。

表2 强迫游泳实验中各组潜伏期与累计不动时间比较

注：①与空白对照组比较，P<0.01；②与模型组比较,P<0.01;③与模型组比较,P<0.05。

3 讨 论

悬尾实验和强迫游泳实验被广泛用于抑郁动物行为绝望的评价。有研究比较了C57BL/6J、BALB/cJ、DBA/2J3个不同种系的小鼠CUMS造模后在悬尾实验和强迫游泳试验中的反应，发现以上3种动物在这2项试验中的表现明显不同[4]；李腾飞等[5]探讨7BL/6、BALB/c、ICR和昆明小鼠在悬尾实验和强迫游泳实验悬尾实验中的行为学差异，发现C57BL/6小鼠的不动时间显著长于其他3种品系小鼠，但是4种品系小鼠在强迫游泳实验中的不动时间差异无显著性。本实验中CUMS显著缩短小鼠悬尾实验和强迫游泳实验的潜伏期并增加其累计不动时间，与文献[6-7]报道一致。而MCP对CUMS小鼠在悬尾实验和强迫游泳实验中行为绝望的改善效应不尽相同：①在悬尾实验中，MCP高剂量能显著增加CUMS小鼠潜伏期，MCP中、高剂量可显著降低CUMS小鼠累计不动时间；在强迫游泳试验中，虽然MCP高剂量明显降低CUMS小鼠累计不动时间，但是MCP高剂量并未使潜伏期显著增加。②在强迫游泳实验中，MCP低、中剂量可降低CUMS小鼠潜伏期，增加累计不动时间。分析认为使用的小鼠鼠种可能是导致以上现象的一个原因。另外Cryan等[8]回顾了二十年来使用2个实验的部分文献认为悬尾实验比强迫游泳试验能更好地反映抗抑郁药的疗效，悬尾实验检测灵敏度相对较低可能是出现上述不一致现象的另一个原因。在悬尾实验中龙须菜提取物10mg/kg能表现出良好的抗抑郁效应，但是在强迫游泳试验中100mg/kg才能显现出良好的抗抑郁效果。这与本研究观察到在悬尾实验中MCP中、高剂量能表现出良好的抗抑郁效应，但在强迫游泳试验中只有MCP高剂量才能表现出良好的抗抑郁效果的结果一致。

虽然MCP对CUMS小鼠在2个试验中潜伏期和累计不动时间的影响不太一致，但是MCP高剂量可明显缩短CUMS小鼠在这2项实验中的累计不动时间；另外悬尾实验检测灵敏度高于强迫游泳试验，MCP可明显增加CUMS小鼠在悬尾实验中的潜伏期，降低累计不动时间；故认为MCP能较好地缓解CUMS小鼠的行为绝望症状。

[1] 谢正，李恒芬，代娟，等. 抑郁症动物模型的建立及评价[J]. 国际神经病学杂,2007,23(4):212-215

[2]WongTW,ColomboG,SonvicoF.Pectinmatrixasoraldrugdeliveryvehicleforcoloncancertreatment[J].AAPSPharmSciTech，2011,12(1):201-214

[3]AlimiH,HfaiedhN,BouoniZ,etal.AntioxidantandantiulcerogenicactivitiesofOpuntiaficusindicaf.inermisrootextractinrats[J].Phytomedicine，2010,17(14):1120-1126

[4]MaoQQ,IpSP,TsaiSH,etal.Antidepressant-likeeffectofpeonyglycosidesinmice[J].JEthnopharmacol，2008,119(2):272-275

[5] 李腾飞,孙秀萍,石哲,等. 不同品系小鼠在三种常见抑郁监测方法中的行为学表现[J]. 中国比较医学杂志,2011,21(8):20-23

[6]MaoQQ,IpSP,KoKM,etal.Peonyglycosidesproduceantidepressant-likeactioninmiceexposedtochronicunpredictablemildstress:effectsonhypothalamic-pituitary-adrenalfunctionandbrain-derivedneurotrophicfactor[J].ProgNeuropsychopharmacolBiolPsychiatry，2009,33(7):1211-1216

[7]BessaJM,MesquitaAR,OliveiraM,etal.Atrans-dimensionalapproachtothebehavioralaspectsofdepression[J].FrontBehavNeurosci，2009,3:1

[8]CryanJF,MombereauC,VassoutA.Thetailsuspensiontestasamodelforassessingantidepressantactivity:reviewofpharmacologicalandgeneticstudiesinmice[J].NeurosciBiobehavRev，2005,29(4/5):571-625

Study on the improvement of milpa alta cactus pectin on desperate symptoms in mice exposed to chronic unpredictable mild stress

XIAO Tongchu1, HUANG Chaoming1, YANG Xing’e1, ZHAN Jinjin2, GUO Lianjun2

(1. Yichang City Yiling District Maternal and Child Health Hospital, Yichang 443100, Hubei, China; 2.Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, Hubei, China)

Objective It is to investigate the effect of milpa alta cactus pectin (MCP) on desperate symptoms in mice exposed to chronic unpredictable mild stress (CUMS). Methods The male Kunming mice were randomly divided into 5 groups such as control group, CUMS+Vehicle group, CUMS+MCP 50 mg/kg group, CUMS+MCP 100 mg/kg group, and CUMS+MCP 200 mg/kg group. Except the control group, the other groups were exposed to CUMS for 6 weeks. And during this period, the animals were treated with corresponding drug by intragastric administration. While the ends of the model, the tail suspension test (TST) was carried out after 24 hours, and the forced swimming test (FST) were conducted after 48 hours. Results In TST, the latency of the CUMS+Vehicle group was significantly shorter (P<0.01), and the immobility time was significantly longer than that of the control group (P<0.01); the latency of the CUMS+MCP 200 mg/kg group was significantly longer than that of the CUMS+Vehicle group (P<0.05), and the immobility time of the CUMS+MCP 200 mg/kg and 100 mg/kg groups was significantly shorter than that of the COMS+Vehicle group (allP<0.01). In FST, the latency of the CUMS+Vehicle was significantly shorter (P<0.01), and the immobility time was significantly longer than that of control group (P<0.01); the latency of the MCP groups was no significant difference compared with the control group (allP>0.05), and the immobility time of the CUMS+MCP 200 mg/kg groups was significantly short than that of the CUMS+Vehicle group (P<0.05). Conclusion MCP can improve the desperate symptoms in mice exposed to CUMS.

milpa alta cactus pectin; chronic unpredictable mild stress; desperate symptoms; mice

肖同楚，男，主治医师，主要研究方向为慢性病防治。

郭莲军，E-mail:gljy2008@126.com

中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(2011TS073)；国家重大创新平台重点资助新药研发项目(2009ZX09301-014)

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.24.003

R-332

A

1008-8849(2015)24-2630-03

2015-01-10